超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中三聚氰胺的残留量

建立一种用超高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术测定乳制品中三聚氰胺残留量的方法.样品经含5%乙酸铅的三氯乙酸溶液提取,离心分离后经PCX-C18混合填料固相萃取柱净化.色谱分离采用Agilent ZORBAX-CN柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm),以10 mmol/L V(乙酸铵)∶V(乙腈)＝10∶90混合溶液为流动相.采用电喷雾离子源,正离子多反应监测(MRM)模式检测.该方法在1～1000 ng/mL范围内线性关系良好.在添加水平为10,30,45 μg/kg时,回收率在78.5%～92.6%之间,相对标准偏差在3.5%～8.6%之间,检出限为10 μg/kg.该方法适合于乳制品中三聚氰胺残留量的检测.     

润肌皮肤膏中松香酸的含量测定

采用反相高效液相色谱法检测了润肌皮肤膏的主要成分之一的松香酸。实验选用SinoChrom ODS-BP色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),甲醇和20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH2.25)为流动相,等度洗脱(85:15),流速为1 mL/min,检测波长为241 nm。松香酸在4.66~125μg/mL浓度范围内与峰面积线性良好,相关系数为0.9990,峰面积的相对标准偏差为1.5%,加标回收率为95.0%~101.3%。方法可用于测定润肌皮肤膏中松香酸的含量。     

离子色谱法紫外检测器测定印染废水中的染料酸性红26

采用离子色谱法测定印染废水中的酸性红26,以100 mmol/L高氯酸钠–乙腈(体积比1∶1)为淋洗液,流速为1.0 mL/min,经IonPacAS16(250 mm×4 mm)分析柱分离,采用紫外–可见检测器于540 nm波长处检测,用外标法定量。酸性红26的线性范围为0.1～20 mg/L,相关系数为0.9999,加标回收率为98.4%～101.0%,以信噪比为3计算检出限,酸性红26的检出限为0.03 mg/L。色谱保留时间、色谱峰面积和色谱峰高测定结果的相对标准偏差分别为0.10%,0.50%,0.15%(n=10)。在淋洗液中添加乙腈以增强洗脱能力和改善峰形。使用紫外检测法可以避免印染废水中大量阴离子的干扰。     

固相萃取/反相高效液相色谱法对血清中胰岛素的测定

采用固相萃取纯化血清样品,荧光胺柱前衍生,建立了反相高效液相色谱/荧光检测血清中胰岛素的方法.色谱条件:LunaC5柱(100 mm×4.6 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-Tris缓冲溶液(10 mmol/L,pH 8.5)梯度洗脱,流速:1 mL/min.激发波长(λex)273 nm,发射波长(λem)476 nm,进样量20 μL.结果表明:胰岛素在10 ～800 μg/L范围内峰面积和质量浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.997 1;检出限为5 μg/L.日内、日间精密度分别为1.5%、1.0%,回收率为92%.     

抑制型电导检测离子色谱法测定饮用水中高氯酸盐

建立抑制型电导检测离子色谱法测定饮用水中的高氯酸盐。选用IonPac^?AS19色谱柱(250 mm×4 mm)，柱温为30℃，电导池温度为35℃，用40 mmol/L氢氧化钾溶液作为淋洗液，氢氧化钾淋洗液由淋洗液发生器在线产生，淋洗液流量为1.0 mL/min，淋洗方式为等浓度淋洗。采用AERS 500(4 mm)型抑制器，抑制器电流为99 mA，进样体积为500μL，高氯酸盐的色谱峰面积与质量浓度在0.030～0.200 mg/L范围内的线性关系良好，相关系数为0.999 2，方法检出限为0.002 mg/L，定量限为0.010 mg/L。7次重复测定结果的相对标准偏差为2.49%～3.78%，样品加标回收率为90.0%～101%。该方法适用于饮用水中高氯酸盐的检测。     

氧弹燃烧-离子色谱法测定涂料中氯和溴的含量

涂料中有机化合物通过氧弹燃烧转化为无机离子,其中可溶性氯和溴离子被吸收液吸收后,经离子色谱仪测定。采用IonPacAS22(4 mm×250 mm)阴离子色谱柱,IonPacAG22保护柱,以4.5 mmol/L Na2CO3-1.4 mmol/L NaHCO3为流动相,流速为1.0 mL/min。氯和溴离子的质量浓度在1～20 mg/L范围内分别与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999,平均加标回收率为94.7%～96.2%,测定结果的相对标准偏差小于1.0%(n=6)。该方法检测时间短、损失量少,适用于涂料中氯和溴含量的测定。     

高效液相色谱法测定间苯二酚反应液中间苯二酚的含量

建立了高效液相色谱法测定间苯二酚反应液中间苯二酚含量的方法。色谱柱为Diamonsil ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为A与B的混合液(体积比为5∶95,A:乙腈,B:5 mmol/L1,8-二胺辛烷与20 mmol/L庚磺酸钠水溶液混合后调节至pH4.5),检测波长为276 nm。间苯二酚与反应液中其它杂质分离较好。间苯二酚的浓度在0.1~0.5 g/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性。加标回收率为99.25%~99.44%,测定结果的相对标准偏差为0.85%(n=8)。     

Determination of Silicate in Cyclotella Meneghiniana Kiits Solution Using Non-suppressed Conductance Detection Ion Chromatography

采用戴安阴离子AS23(4 mm×250 mm)分析柱和AG23(4 mm×50 mm)保护柱、恒温电导检测器,建立了测定硅藻培养液中硅酸根(SiO23-)含量的非抑制电导检测离子色谱法.以4 mmol/L碳酸钠为淋洗液,淋洗液流速1.0 mL/min,进样体积100 μL,采用峰高定量.该法测定SiO2-3的线性范围为0～ 40 mg/L,检出限为0.017 mg/L,重复测定同一标样的相对标准偏差(RSD,n=7)小于5％,峰面积和峰高的RSD分别为10.9％、4.8％.测定不同生长时期硅藻培养液中的SiO2-3,样品的加标回收率为102％ ～ 120％.该法灵敏、准确、简便易行,适用于硅藻培养液中SiO2-3的检测.     

亲水相互作用色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定肝组织中羟脯氨酸

采用亲水相互作用色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱系统,建立了肝组织中胶原蛋白水解物羟脯氨酸(Hyp)的快速定量检测方法。将正常及四氯化碳肝纤维化模型小鼠的肝组织样品酸水解,经过滤、稀释后,采用Hypersil GOLD HILIC色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)分离,以水-乙腈(28∶72,v/v)为流动相进行等度洗脱,最后用配有电喷雾离子源的四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱在正离子模式下进行检测。结果表明,Hyp在0.78~100.00μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(R2)为0.998 3,方法的定量限为0.78μg/L,样品加标回收率为97.4%~100.9%,相对标准偏差为1.4%~2.0%(n=6)。此外,该方法与传统的氯胺T法进行比较,发现两种方法的检测结果相关性良好,Pearson相关系数为0.927;较氯胺T法,该法具有操作简便、准确度高的优点。该方法可用于肝组织中Hyp的快速定量分析。     

反相高效液相色谱柱前衍生法测定发酵液中的5-氨基乙酰丙酸

建立了同时检测发酵液中5-氨基乙酰丙酸和甘氨酸的柱前衍生反相高效液相色谱法。使用ZORB-AX SB-AQ型色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm),以甲醇-50 mmol/L醋酸钠缓冲溶液(pH 6.2)作为流动相梯度洗脱。流速为1 mL/m in,柱温25℃,254 nm波长下检测30 m in。在此条件下,5-氨基乙酰丙酸和甘氨酸在浓度为0.8~23 mmol/L和1.3~66 mmol/L时与色谱峰面积值之间线性关系良好,回归系数均在0.9997以上。发酵液产物的加标回收率在94.9%~104.7%。将检测结果与分光光度法相比,符合较好。测试数据表明,此方法简单、可靠,对于发酵产物的分离效果好。     

L-羟脯氨酸寡肽混合物的高效液相色谱分离与质谱分析

研究了三氯氧磷辅助下L-羟脯氨酸的成肽反应,建立了采用反相高效液相色谱-质谱/质谱联用技术分离鉴定羟脯氨酸寡肽混合物的方法,优化了L-羟脯氨酸寡肽混合物的色谱分离条件。实验以YWG C8柱(10 μm,250 mm×10 mm)为分离柱,以乙腈-0.06%三氟乙酸水溶液(体积比为2∶98)为流动相进行等度洗脱,在正离子模式下对洗脱物进行了电喷雾电离串联质谱鉴定。结果显示,分离出的各组分分别为L-羟脯氨酸二肽、L-羟脯氨酸环二肽和L-羟脯氨酸三肽。     

对甲氧基苯磺酰氯柱前衍生生物胺的高效液相色谱分离

采用对甲氧基苯磺酰氯作为柱前衍生试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的生物胺衍生化方法,并对葡萄酒中生物胺含量进行检测。通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最适衍生化条件:衍生温度50℃,缓冲液pH 9.0,衍生时间15 min。实验建立了7种生物胺的HPLC分离方法:Beckman ODS柱;流动相A为10 mmol/L的NH4Ac溶液(pH 6.37),B相为乙腈;采用梯度洗脱;流速1 mL/min;检测波长240 nm,室温。     

高效液相色谱法测定舒普深中的舒巴坦钠和头孢哌酮钠

 应用反相高效液相色谱外标定量法同时测定了舒普深中的舒巴坦钠和头孢哌酮钠。采用 pH 4 0的磷酸水溶液 乙腈 (体积比为 80∶2 0 )组成的流动相 ,在ODS柱上 ,于 12min内同时测定舒巴坦钠和头孢哌酮钠。方法简单 ,重现性好 ,在线性范围内舒巴坦钠的相关系数为 0 9997(n =5 ) ,头孢哌酮钠的相关系数为 0 9991(n=5 )。方法适于对药品舒普深的生产过程及临床上该药的血药浓度的监测。     

Determination of radiolabelled proline and hydroxyproline in collagen hydrolysates by high-performance liquid chromatography with on-line radiometric detection

Radiolabelled proline and hydroxyproline were separated on a C8 column (10 cm X 4.6 mm I.D.) with 10.4 mM sodium dodecyl sulphate in water-n-propanol (88:12, v/v) (pH 2.6) as the mobile phase at a flow-rate of 0.6 ml/min. The retention times of hydroxyproline and proline were 5 and 8 min, respectively. On-line radiometric detection was performed either in a homogeneous mode (liquid scintillator was added to the column effluent in the ratio 3.33:1) or in a heterogeneous mode (the detection cell was packed with a solid scintillator and 0.1 M ammonia was mixed with the column effluent in the ratio 1:6 in order to prevent adsorption of amino acids on the cell packing). Detection limits were in the range 100-900 dpm for individual isotopes and detection modes and the reproducibilities were better than 10%. The application of the method to a collagen synthesis study is reported.     

Fast separation and sensitive detection of carcinogenic aromatic amines by reversed-phase micro-liquid chromatography coupled with electrochemical detection

A micro-LC method was developed for the fast and sensitive analysis of aromatic amines by electrochemical detection. The chromatographic separation of nine carcinogenic aromatic amines was performed on an ABZ + PLUS column with detection limits up to pM L(-1) levels. Mobile phase comprised of methanol-acetate buffer of pH 5 (45:55, v/v) used at a flow rate of 0.2 ml min(-1). The detection was performed with a 6 mm glassy carbon electrode at an applied potential of 0.8 V versus Ag/AgCl. An intraday RSD for retention time and peak area were between 0.22% and 0.73% and 1.86% and 4.03%, respectively. The interdays RSD for retention time and peak area were between 0.47% and 1.35% and 2.04% and 4.42%, respectively. The applicability of the assay has been demonstrated by analyzing these aromatic amines in lake water and synthetic food colour additives. A comparison is given between electrochemical and UV detection.     

反相高效液相色谱法测定人肌腱中的胶原蛋白

建立了测定人肌腱中胶原蛋白含量的高效液相色谱法。动物肌腱中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用2,4-二硝基氯苯对水解产物衍生化,然后以0.01 mol/L乙酸钠-乙酸缓冲液(pH 6.0)-乙腈(体积比为80∶20)为流动相,经反相C18柱分离,紫外检测器于360 nm波长处检测来测定羟脯氨酸的含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量来计算胶原蛋白的含量。该方法对羟脯氨酸的检出限为3 μg/L,羟脯氨酸为3 μg/L~100 mg/L时与峰面积的线性关系良好;样品测定的相对标准偏差为1.95%,加标回收率为98.4%~110.8%。对60份人肌腱样品中胶原蛋白的含量进行了测定。所建立的方法灵敏、准确、干扰少,适用于肌腱中胶原蛋白含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定白肋烟烟叶中的游离氨基酸

建立了一种用于烟草中游离氨基酸测定的反相高效液相色谱法．实验采用超声波水解、邻苯二甲醛／3-巯基丙酸作为衍生剂进行柱前衍生．色谱柱为依利特C18柱（4．6mmi．d．×250mm,5μm）,流动相A为18mmol／L的醋酸钠溶液（pH7．2）含体积分数为0．002％的三乙胺和0．3％的四氢呋喃,流动相B组成为：100mmol／L的醋酸钠溶液（pH7．2）-乙腈-甲醇（体积比为1：2：2）,流速为1．0mL／min,柱温为40℃．荧光检测器,激发波长350nm,发射波长450nm．方法的回收率为95．3％～100．7％,RSD为2．32％～9．24％（n=6）．该方法简便、准确、重现性好．测定了不同肥料配比生产的白肋烟烟叶中17种游离氨基酸的含量．结果表明,不论有机肥与无机肥怎样配比,天冬氨酸的含量与各氨基酸相比都是最高的;随着饼肥的加入,大部分氨基酸的含量是先增加后逐渐降低的趋势,15％饼肥＋85％无机肥与30％饼肥＋70％无机肥配比时,大部分游离氨基酸的含量接近,30％饼肥＋70％无机肥配比时的游离氨基酸总量最高,综合考虑,30％饼肥＋70％无机肥配比时的烟叶质量最好．     

超声萃取高效液相色谱法测定指画颜料中的6种防腐剂

建立指画颜料中2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮、苯甲酸等6种防腐剂的超声萃取-高效液相色谱的测定方法。经试验确定,萃取溶剂为100%甲醇,萃取时间为10 min,萃取温度为25℃。采用Hypersil ODS柱(250 mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为245 nm。在0.5~20 mg/L检测范围内6种防腐剂的质量浓度与其色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数r≥0.999 2,方法检出限为1.15~1.71μg/L,测定结果的相对标准偏差为1.54%~3.18%(n=8),加标回收率为84.2%~108.0%。该方法操作简单,灵敏度高,可用于指画颜料中6种防腐剂含量的分析检测。     

柱前衍生–高效液相色谱法测定白刺果中氨基酸含量

建立一种快速测定不同产地的白刺果中氨基酸含量的HPLC方法。采用柱前邻苯二甲醛(OPA)和氯甲酸芴甲酯(FMOC)联合在线衍生、二元梯度洗脱(流动相A:40 mmol/L NaH2PO4·H2O,pH 7.8;流动相B:乙腈–甲醇–水的体积比为4.5∶4.5∶1)、反相C18短柱分离(色谱柱:Zorbax Eclipse AAA C18柱,75 mm×4.6 mm,3.5μm)、二极管阵列检测器(检测波长:338 nm;参考波长:390 nm)和荧光检测器(激发波长:340 nm;发射波长:450nm)联合检测,内标法定量。各氨基酸含量在4.5~900μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.991 2~0.999 8,除了蛋氨酸(部分氧化降解)加标回收率为78.1%外,其它各氨基酸的加标回收率为93.1%~105.1%,相对标准偏差为3.21%~6.23%(n=5)。对产自青海、新疆和内蒙古等3个地区的白刺果中氨基酸含量进行了测定,氨基酸总量分别为11.23,10.47,8.84 g/(100 g),并对各种不同类型氨基酸占氨基酸总量的比例进行了分析。该法适合于白刺果氨基酸含量的测定。     

对甲氧基苯磺酰氯柱前衍生测定尿中游离羟脯氨酸与脯氨酸

以对甲氧基苯磺酰氯为衍生试剂,建立了分离测定人尿中游离羟脯氨酸和脯氨酸的高效液相色谱方法。考察了衍生温度、衍生缓冲液pH值、衍生时间、衍生剂用量对衍生反应的影响以及流动相组成、流动相缓冲液浓度、pH值和柱温对分离的影响。在优化条件下,羟脯氨酸和脯氨酸分别在5～100μmol/L和5～250μmol/L范围内呈良好线性,相关系数分别为0.999 4、0.999 5,检出限(S/N=3)分别为0.50 nmol/L和0.20 nmol/L,回收率(n=5)分别为95%～99%和96%～102%,相对标准偏差分别为2.1%～4.3%和2.0%～4.8%。该方法可用于人尿中游离羟脯氨酸和脯氨酸的定性定量分析。