柱前衍生HPLC法测定滚山珠中3种氨基酸的含量

采用异硫氰酸苯酯柱前衍生HPLC法对滚山珠中甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的含量进行测定。结果表明:甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的线性范围分别为0.028~0.126 mg/m L(R2=0.999 6)、0.012~0.054 mg/m L(R2=0.9999)、0.014~0.063 mg/m L(R2=0.999 8),3种氨基酸的平均回收率在100.01%~100.54%之间,RSD值在1.12%~1.85%之间(n=9)。说明该方法稳定可靠,适用于滚山珠中甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的含量测定。以此方法测定贵州省内11个不同地点的滚山珠药材中甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的含量,结果表明上述3种氨基酸含量在贵州省不同地区比较稳定,为滚山珠药材质量标准的建立提供了理论依据。     

柱前衍生化HPLC法测定发酵液中L-瓜氨酸和L-鸟氨酸含量

建立一种应用异硫氰酸苯酯将L-瓜氨酸和L-鸟氨酸柱前衍生后进行定量分析的高效液相色谱法.实验结果表明,瓜氨酸在0.2～2.0 mg/mL范围内线性回归显著(R2=0.999 8),平均回收率99.87%;鸟氨酸在0.2～2.0 mg/mL范围内线性回归显著(R2=0.999 7),平均回收率100.92%.应用该方法对发酵液中L-瓜氨酸和L-鸟氨酸含量进行测定取得了满意的结果,能有效指导谷氨酸棒杆菌L-瓜氨酸的发酵生产.     

柱前衍生HPLC法测定沙棘中痕量5-羟色胺

研究了高效液相色谱-柱前衍生荧光检测法检测了不同生境的沙棘中痕量5-羟色胺.用荧光试剂2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基氯甲酸酯((DBCEC-Cl))作为柱前衍生化试剂对痕量5-羟色胺进行衍生后,荧光检测法进行测定.测定线性回归方程的相关系数R2=0.9990.检出限在10.93fmol.平均回收率在99.9%,RSD%为0.92%.结果表明生长在干旱地的沙棘中5-羟色胺量高于生长在潮湿地沙棘中5-羟色胺量.     

柱前衍生RP—HPLC法测定熊去氧胆酸的含量

采用溴乙酰基对硝基苯为衍生化试剂,柱前衍生RP-HPLC法,探讨了熊去氧胆酸的含量测定,对实验方法进行了验证,并用于实际样品的分析,结果满意。     

柱前衍生氨基酸的色谱分析

对氨基酸的反相高效液相色谱的双荧光检测了作了介绍。采用邻苯二甲醛／巯基乙醇与９－芴基氯甲酸酯柱前衍生物,同时采用两台串联的荧光检测器对伯氨基酸和仲氨基酸进行分析;利用高半胱氨酸、高丝氨酸、正缬氨酸（ＮＶＡＬ）,硫代脯氨酸（ＴＰＲＯ）四种内标消降了系统误差。同时,由样品各组分保留时间重现性的相对误差及标准氨基酸衍生物的回收率实验来确定该方法的准确性。结果表明：此检测氨基酸方法灵敏度高,检出高且重现性     

OPA柱前衍生法测定硫酸新霉素的含量

建立了一种硫酸新霉素的HPLC分析方法.以邻苯二甲醛(OPA)为衍生化试剂进行柱前衍生化,334nm作为检测波长,流动相为甲醇水溶液(V甲醇∶V水=70∶30),标准曲线为Y=1×106X+4.123 8×104,r=0.998 3,平均回收率为99.48%.用该方法测定发酵液中硫酸新霉素的含量取得了满意的结果.     

柱前衍生化-HPLC测定马氏珠母贝肉中氨基酸的含量

以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂,对氨基酸进行柱前衍生,建立了35℃下,醋酸钠缓冲液、甲醇及乙腈为流动相,用Eclipse AAA氨基酸分析柱和二极管阵列检测器的氨基酸色谱分析方法,18种氨基酸在36 min内获得了较好的分离,在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与浓度的线性相关系数在0.990 6～0.999 8之间,相对标准偏差为1.96%～5.45%(n=5).并测定了马氏珠母贝肉蛋白中氨基酸的组成和含量.结果表明,马氏珠母贝肉蛋白中含有至少18种氨基酸,其中8种必须氨基酸总含量达39%以上,是一种优质的功能食品原料.     

PITC柱前衍生反相色谱法和OPA柱后衍生离子交换色谱法测定氨基酸含量的比较

本文主要讨论了氨基酸的两种测定方法──ＰＩＣＯ·ＴＡＧ反相色谱法和柱后衍生离子交换色谱法（ＩＥＣ），并对两种方法进行了比较，总结出ＰＩＣＯ·ＴＡＧ法测定氨基酸的优越性。     

单糖柱前PMP衍生HPLC测定方法探讨

从PMP萃取酸度、萃取次数探讨了柱前PMP衍生方法对单糖-PMP衍生物的影响,并从流动相比例、缓冲液pH值、缓冲盐浓度三个方面对单糖柱前衍生HPLC的分离效果进行了优化研究.结果表明:单糖进行PMP衍生后,用HCl中和至pH为7.0,能最大限度避免单糖-PMP衍生产物的损失;使用三氯甲烷萃取PMP三次时,能在除去PMP的情况下避免单糖-PMP衍生产物的损失;降低流动相中有机相的比例或提高缓冲液的pH值,有利于色谱峰分离度的提高;提高缓冲盐浓度,有利于保持色谱峰的对称性.     

PMP柱前衍生HPLC法测定松乳菇多糖的单糖组成

建立了一种1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮（PMP）柱前衍生高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）法测定松乳菇多糖中单糖组成。通过单因素实验优化PMP衍生单糖的条件为反应时间40 min,反应温度70°C和PMP浓度0.8 mol/L。以Agilent Zorbax SB-C18色谱柱为分析柱,磷酸缓冲液（0.05 mol/L,pH=6.9）-乙腈为流动相,检测波长为250nm,进样量10μL,柱温20°C检测单糖组成。在此色谱条件下,各单糖线性关系良好（r2≥0.999 6）,精密度高（RSD≤2.23%）,重复性强（RSD≤2.11%）,加标回收率为97.16%～101.68%。该方法适用于松乳菇多糖中单糖组成的测定。     

HPLC法测定丙戊酸钠血药浓度柱前衍生化条件的优化

为了研究HPLC法测定丙戊酸钠血药浓度衍生时的最佳衍生条件,探讨不同衍生条件对血药浓度的影响,本实验采用L9(34)正交实验设计,以衍生试剂浓度、催化剂浓度、衍生温度和衍生时间为考察因素,确定最佳衍生条件。结果显示,A2B2C3D1为最佳衍生条件,即衍生试剂为2.0 mg/m L,催化剂浓度为20%,衍生温度为60℃,衍生时间5 min为最佳衍生条件。不同的衍生条件对测定结果有显著影响(P0.05),且衍生反应的主次因素为衍生试剂浓度衍生温度催化剂浓度衍生时间。由此可知,优化后的衍生条件方法回收率高,节约时间和成本,简便可行。     

DABS-Cl柱前衍生RP-HPLC法定量测定血清中游离氨基酸

采用DABS Cl柱前衍生RP HPLC法,在紫外436nm定量测定了人血清中18种游离氨基酸.在60min内18种游离氨基酸得到良好分离,在10～200nmol/mL浓度范围内与峰面积有良好线性关系(平均相关系数为0.9964±0.0059);用于测定人血清中18种游离氨基酸,其精密度平均(RSD)为0.90%±0.53%;稳定性平均(RSD)为8.56%±2.45%;平均加样回收率为107.80%±7.12%.结论:DABS Cl柱前衍生RP HPLC定量分析血清中游离氨基酸,具有较好精准性,是一种比较方便、稳定和可靠的检测方法.     

异硫氰酸苯酯柱前衍生法测定奶粉中的牛磺酸

采用异硫氰酸苯酯为衍生剂,反相液相色谱法测定牛磺酸的含量。使用VP-ODS柱,以醋酸钠缓冲液-乙腈体系为流动相,流速为1.0mL/min,在254nm波长处紫外检测。牛磺酸在5~100μg/mL范围与峰面积呈良好线性关系,相关系数r=0.9993,平均回收率为99.2,RSD=1.32%(n=6)。该方法结果准确,重现性好。     

邻苯二甲醛柱前衍生法测定海洋胶体中的水解氨基酸

用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法测定了厦门湾南部海域海洋胶体中氨基酸的组成和含量.该法的空白值为0～1.8×10-3μmol/L,检出限为2×10-3～9×10-3μmol/L,添加脲的回收率在99.5%～99.7%之间,相对偏差为3.4%～10.7%.结果表明,该海洋胶体中含有16种氨基酸,总量为150.83 μmol/L,其中赖氨酸是含量最多的氨基酸,浓度为35.59 μmol/L,占总水解氨基酸的23.6%.其次是天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、甘氨酸 苏氨酸、甲硫氨酸和亮氨酸,它们的含量相当,浓度分别为12.40、10.48、17.77、16.60、17.22和15.88 μmol/L,分别占总水解氨基酸的8.2%、7.0%、11.8%、11.0%、11.4%和10.5%.这8种氨基酸占了胶体中总水解氨基酸的83.5%,其余8种氨基酸只占16.5%.     

柱前衍生—高效液相色谱法测定酱油中游离氨基酸

建立一种测定酱油17种游离氨基酸的方法。酱油经离线衍生后,采用常用C18色谱柱,进行反相高效液相色谱分析。方法检出限为0.5μmol/L,样品加标回收率为92%～102%。该方法不需专用氨基酸分析色谱柱,灵敏度高、重现性好、检出限低、回收率高。     

HPLC法测定牛蒡子药材中牛蒡子苷的含量

利用高效液相色谱法,建立了牛蒡子药材中牛蒡子苷含量的测定方法.在色谱柱为TC-C18(5μm 4.6×250 mm);流动相为甲醇-水(48∶52);进样量为10μL;流速为1.0 mL/min;检测器为VWD;检测波长为280 nm的色谱条件下,牛蒡子苷在0.420～42.000μg/mL范围内具有良好的线性关系,线性回归方程为y=-1.762 7+309335 4.4x,r=0.999 8,平均加样回收率为114.43%.     

丹磺酰氯作为氨基酸柱前衍生试剂衍生条件的研究

用丹磺酰氯为柱前衍生试剂,对19种氨基酸的衍生物进行了高效液相色谱分离,研究了衍生试剂的用量、缓冲体系的pH值,衍生时间等条件的变化对衍生反应的影响,得到了用丹磺酰氯对氨基酸的最佳衍生条件。     

柱前衍生化HPLC荧光法测定脂肪胺化合物

采用新型荧光试剂4-（1-甲基-1H-菲并[9,10-d]咪唑-2-）苯甲酸（MPIBA）进行柱前衍生并经荧光检测对脂肪胺进行了高效液相色谱（HPLC）分离.衍生物的荧光激发和发射波长分别为λex=260 nm,λem=446 nm.80℃下在四氢呋喃（THF）溶剂中用N-乙基-N-′[（3-二甲氨基）丙基]碳二亚胺盐酸盐（EDC）作催化剂,衍生反应10min后获得稳定的荧光产物.在Eclipse XDB-C8色谱柱（4.6×150 mm,5 mm）上,采用梯度洗脱对12种游离脂肪胺衍生物进行了优化分离,实现了各种脂肪胺衍生物的快速、准确测定.该方法具有良好的重现性,多数脂肪胺的线性回归系数大于0.9996,检测限在10.5-53.4 fmol范围内,对实际样品臭豆腐中脂肪胺的测定测定结果满意.     

用DABS—CL试剂柱前衍生技术和反相HPLC法分离人血清中游离氨基酸

本文报导了用DAB5—CL柱前衍生HPLC法,在室温条件下,直接分离人血清中十八种游离基酸。对可能影响血清中游离氮基酸分离的一些因素作了探讨。结果表明该衍生技术较为迅速,简单,衍生物(DABS—氨基酸)具有较高的稳定性和灵敏度,整个衍生过程所需一小时内完成在25℃左右,血清氨基酸可得到较为满意的分离。