超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱法快速鉴定鬼针草化学成分

利用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱联用技术对鬼针草的化学成分进行快速鉴定。采用Hypersil GOLD C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，在加热电喷雾离子源(HESI)正负离子模式下对样品进行数据采集。采用高分辨质谱数据，结合对照品、文献、在线数据库，从鬼针草中鉴定出28种成分，包括10种黄酮类成分，6种氨基酸类成分，10种有机酸类成分，2种其它成分，其中壬二酸、7-羟基香豆素、没食子酸3种成分为首次在鬼针草中发现。该研究可为鬼针草的快速鉴定、质量控制方法建立和药效基础研究提供参考。     

超高效液相色谱–串联四极杆飞行时间质谱法快速筛查食物中有毒化合物

以一起化学物质引起的食物中毒事件为例,建立超高效液相色谱–串联四极杆飞行时间质谱(UPLC–QTOF–MS)法快速筛查食物中有毒化合物的方法。用乙腈提取样品,采用基于QuEChERS原则的净化技术,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸–甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,经ACQUITY UPLC BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱分离。采用全信息串联质谱(MS^E)模式对样品进行质谱(ESI⁺)全信息采集,一次进样分析能够得到被分析物的一级和二级精确质量质谱数据,采用一级离子和二级质谱碎片进行标准质谱库匹配。在可疑食物及中毒人员血液中检出莫能菌素,确认了本次事件是由莫能菌素引起的食物中毒,建立了莫能菌素的质谱数据库。该方法适用于突发性化学中毒事件的快速筛查和检测。     

GC–MS法分析茵陈挥发油成分

采用水蒸气蒸馏法提取茵陈中挥发性成分挥发油,用气相色谱–质谱联用技术(GC–MS)对茵陈挥发油成分进行分析鉴定,并采用峰面积归一化法测定其相对含量。共检出52种挥发性成分,鉴定了其中31种主要挥发性成分,含量较高的组分为石竹素(15.27%)、(–)-斯巴醇(6.64%)、石竹烯(4.89%)等。GC–MS法适用于茵陈挥发性成分的定性分析,具有灵敏度高、分析速度快的特点。     

高效液相色谱–质谱法分析僵蚕蛋白酶解多肽

分析僵蚕蛋白酶解多肽类成分的相对分子质量和氨基酸组成。采用高效液相色谱–质谱联用正离子模式进行分析,以Hola C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.7μm)为分离色谱柱,以0.05%甲酸水溶液和0.05%甲酸–乙腈溶液为流动相,根据质谱一级、二级碎片离子信息,确定酶解多肽类相对分子质量信息和氨基酸组成。僵蚕样品经酶解后得到相对分子质量在500~1 000之间的多肽,经LC–MS分析,多肽由低于10个的氨基酸组成。高效液相色谱–质谱法分析平台可用于分析多肽化合物的相对分子质量和氨基酸组成,这有利于酶解多肽的生物活性分析。     

UPLC-Q Exactive Plus-MS分析高粱壳化学成分及黄嘌呤氧化酶体外抑制活性筛选

采用高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱对高粱壳中的化学成分进行分析鉴定，并通过高效液相色谱法筛选抑制黄嘌呤氧化酶活性成分。该实验使用Hypersil GOLD C₁₈色谱柱(2.1 nm×30 nm,3μm)，以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱，流速1.0 m L/min，进样量10μL。质谱分析采用ESI离子源，在正离子模式下采集数据，利用Xcalibur 4.1软件结合数据库对所得数据进行分析，共鉴定出27种化学成分。对刺槐素、葛根素、芹菜素、根皮苷、异鼠李素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮6种化学成分进行活性筛选，发现芹菜素和3,3’,4’,7-四羟基黄酮对黄嘌呤氧化酶(XO)表现出较强的抑制活性，IC₅₀分别为18.11和34.59μmol/L。     

高效液相色谱-质谱法快速鉴定复方毛冬青冲剂中三萜皂苷活性成分

建立了高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)快速鉴定复方毛冬青冲剂中三萜皂苷活性成分的方法.以甲醇为萃取剂超声萃取复方毛冬青冲剂30 min.采用高效液相色谱-离子阱质谱(HPLC-IT-MS)和高效液相色谱-飞行时间质谱(HPLC-TOF-MS)对萃取液进行分析,选用Agilent Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),以水(含0.1 %甲酸)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱后流出液采用电喷雾离子阱质谱(ESI-IT-MS)和电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF-MS)的正、负离子模式进行检测.检测结果经离子阱一级质谱(IT-MS1)、离子阱二级质谱(IT-MS2)和分析时间质谱(TOF-MS)信息分析,并与相关文献报道进行比较,鉴定出1种三萜酸和8种三萜皂苷成分,并推测了其它3种可能的三萜皂苷化学成分,通过对照品对比分析,三萜酸确证为Ilexgenin A,其中一种三萜皂苷确证为Ilexsaponin A1.本方法无需对照品即可快速有效地鉴定出复方毛冬青冲剂中的三萜皂苷活性成分,为建立冲剂的质量标准提供了依据.     

基于UPLC-UV-Q-TOF MS的僵蚕嘌呤(核苷)类成分多指标定量指纹图谱研究北大核心CSCD

嘌呤(核苷)是机体细胞生命活动中的主要遗传物质,但目前缺乏对僵蚕中该类成分的整体定量研究。该文采用ACE Excel 2 AQ水性柱(2.1 mm×150 mm,2μm)进行分离,以10 mmol/L磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相,分别优化了样品提取与色谱条件,建立了中药僵蚕中嘌呤(核苷)类成分的超高效液相色谱-紫外(UPLC-UV)指纹图谱方法。利用四极杆-飞行时间质谱(Q-TOF MS)对9个特征峰物质进行二级鉴定,并对其质谱裂解规律进行总结。其中,2′-甲氧基-鸟苷单磷酸、6-(β-羟基乙基氨基)-嘌呤、2′-甲氧基-腺苷单磷酸和N6-(2-羟乙基)-腺苷首次从僵蚕中鉴定。基于该方法,对其中的鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、6-(β-羟基乙基氨基)-嘌呤、腺苷、N6-(2-羟乙基)-腺苷7个成分进行绝对定量测定。2′-甲氧基-鸟苷单磷酸和2′-甲氧基-腺苷单磷酸因缺乏对照品,采用相对定量分析。结果表明,各指标成分的精密度、重现性、稳定性、耐用性的相对标准偏差(RSD)均不大于5.0%,7种成分的线性关系良好(r^(2)≥0.9994),检出限(LOD)为0.266~0.474μg/mL,定量下限(LOQ)为0.843~1.58μg/mL,平均加标回收率为94.0%~101%,RSD不大于3.4%。采用该方法对13批不同产地僵蚕药材进行分析,发现各成分含量具有显著差异。该研究可为僵蚕的质量评价提供技术支持和科学依据。     

基于HPLC-TOF/MS与HPLC-MS/MS的养心氏片主要成分研究

采用高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术(HPLC-TOF/MS),建立了快速鉴定养心氏片化学成分的定性方法,并利用高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)对养心氏片的主要成分进行定量分析。HPLC-TOF/MS法以ZORBAX Eclipse Plus C18(100 mm×3.0 mm,1.8μm)为色谱柱,乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min~(-1),柱温30℃,质谱采用正、负离子扫描,可推断鉴定养心氏片中的30种成分。HPLC-MS/MS法采用Waters XBridgeBEH C18(150 mm×4.6 mm,2.5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min~(-1),柱温30℃,Scheduled MRM正负离子切换监测模式定量分析。对养心氏片中16种主要成分进行HPLC-MS/MS分析,16种成分的质量浓度与峰面积呈良好线性,相关系数r≥0.997,检出限为0.039 1~78.1μg/L,定量下限为0.156~312μg/L,平均加标回收率为96.8%~103.8%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~3.5%。结果表明,该方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于养心氏片中多组分的同时定性和定量分析,为养心氏产品的质量控制、药理研究和应用奠定了基础。     

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速筛查化妆品中18种香豆素类化合物

建立了化妆品中18种香豆素类化合物(二氢香豆素、7-羟基香豆素、6-甲氧基-7-羟基香豆素、6,7-二甲氧基香豆素、香豆素、7-甲氧基香豆素、4-甲基-7-羟基香豆素、补骨脂素、8-甲氧基补骨脂素、7-甲基香豆素、异补骨脂素、5-甲氧基补骨脂素、4-甲基-7-乙氧基香豆素、欧前胡素、2',4,8-三甲基补骨脂素、8-羟基补骨脂素、异欧前胡素、环香豆素)的超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱快速筛查方法。膏霜、水剂、香波、散粉、唇膏等不同类型的化妆品样品经超声提取后,样品提取液高速离心处理,浓缩上清液,以Oasis HLB固相萃取柱净化,经Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm)在10min内完成有效分离后,采用大气压化学电离-四极杆-飞行时间质谱进行筛查分析。18种香豆素类化合物的定量下限为10~60μg/kg。在低、中、高3个加标水平的平均回收率为85.2%~95.1%,相对标准偏差为3.2%~8.6%。该方法准确、快速、灵敏,为化妆品样品的高通量快速筛查提供了可靠实用的技术手段。     

基于UHPLC-QTOFMS的黄芩汤化学成分和大鼠入血成分分析北大核心CSCD

建立了一种超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UHPLC-QTOF MS)联用鉴定黄芩汤化学成分及大鼠灌胃给药后入血成分的方法。采用ACQUITY UPLC XBridge BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.5µm),以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱;使用电喷雾离子源正负离子模式采集碎片信息。依据质谱裂解规律,结合对照品、文库比对分析,初步鉴定了黄芩汤中68种化学成分和35种入血成分,并讨论了黄芩素、黄芩苷、芍药苷、甘草苷等的治疗潜力。该方法高效、稳定、灵敏,可为黄芩汤的药效物质基础研究提供参考,也可用于其他复方的成分分析,有助于提升传统中药中小分子药物发现的效率。     

基于UPLC-Q-TOF-MS法分析凉山虫草化学成分

应用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对凉山虫草提取物的主要化学成分进行定性分析。采用Agilent SB-C_(18)(50 mm×4.6 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.25 m L/min,柱温30℃;质谱分析采用信息关联模式(IDA)正、负离子分别采集。应用Peak View软件的Formula Finder等功能、各色谱峰的质谱数据与数据库匹配结合各色谱峰的二级碎片裂解规律,共鉴定出27个化合物,其中8个为虫草中未曾报道物质;主要化学成分包括生物碱、糖苷、核苷、氨基酸等成分。该方法精确、可靠、高效,适用于凉山虫草成分的快速鉴定,为凉山虫草的开发利用以及阐明其药效物质基础提供了参考。     

超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法快速分析东革阿里化学成分

应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对东革阿里提取物的化学成分进行定性分析。采用Agilent Eclipse Plus-C_(18) RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱。质谱分析采用电喷雾正离子模式采集,通过对照品比对及高分辨质谱数据解析,鉴定了49种化学成分,包括29种苦木素二萜、4种β-咔巴啉类生物碱、12种铁屎米-6-酮类生物碱、3种联苯新木脂素类及1种角鲨烯型三萜。该方法快速、可靠、高效,能较全面地反映东革阿里的化学成分,可为深入阐明东革阿里的药效物质基础及质量标准研究提供参考。     

多囊卵巢综合征相关雄性激素的液相色谱-串联质谱检测

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血清中硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、雄烯二酮(A4)、睾酮(T)、17-羟基孕酮(17-OHP)、双氢睾酮(DHT)5种激素的分析方法。血清样本经蛋白沉淀后,采用固相萃取,经Agela Venusil MP C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,3μm)分离,以含0.1%甲酸的甲醇和含0.02%甲酸的水为流动相进行梯度洗脱。使用正-负离子多反应监测模式进行数据采集。结果表明,5种激素在各自质量浓度范围内线性关系良好(r2>0.995),回收率为96.0%~105%,各激素的批内精密度和批间精密度均小于10%,DHEAS、A4、T、17-OHP、DHT的定量下限(LOQ)分别为5.00、0.05、0.05、0.025、0.025 ng/mL。该方法快速、准确、灵敏,适用于临床对多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清雄性激素水平的检测。     

基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术快速解析杜仲颗粒化学成分

建立了定性分析杜仲颗粒化学成分的超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱组合式高分辨质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)方法。杜仲颗粒采用甲醇超声提取,Thermo Scientific Syncronis C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱。利用LTQ-Orbitrap-MS负离子模式采集,通过对照品比对及高分辨质谱数据解析,鉴定了25种化学成分,包括8种环烯醚萜类、8种黄酮类、5种苯丙素类、3种木脂素类化合物及1种非还原性双糖。该方法简便、快速、准确,可为进一步分析杜仲颗粒的药效物质基础提供依据。     

在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测头孢噻吩钠的杂质谱

建立了在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱检测头孢噻吩钠杂质谱的方法,有效地解决了流动相中含不挥发性磷酸盐的色谱系统不适合用于液相色谱-质谱快速鉴定杂质的难题。一维高效液相色谱(HPLC)以Symmetry C18为色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 2.5)和乙腈梯度洗脱;二维以ACQUITY UPLC BEH C18为色谱柱,以0.1%(v/v)甲酸水溶液和0.1%(v/v)甲酸乙腈溶液梯度洗脱。以HLB C18为捕集柱,用0.1%(v/v)甲酸水溶液进行捕集和脱盐,采用正离子模式采集数据。对头孢噻吩钠中6个杂质进行了结构鉴定,对其来源进行了分析,并进一步确证了《中国药典》2010年版对头孢噻吩钠杂质A认定有误。采用本方法可以快速、简便、灵敏地对头孢噻吩钠杂质谱进行检测。     

干姜中的二芳基庚烷类化合物及其在四逆汤煎煮过程中的立体选择性反应

采用高效液相色谱多级质谱联用鉴定了干姜水煎剂的18个二芳基庚烷类化合物。发现此类化合物的电喷雾质谱碰撞诱导裂解反应的特征主要表现在吡喃环的次级逆Diels Alder反应裂解或C1和C5OH发生次级麦氏重排裂解,这两种裂解反应对归属芳环的取代非常重要。比较了复方四逆汤配伍对二芳基庚烷类化合物的影响,从色谱保留行为、质谱数据等推测化合物2-(3,4-二羟基-5-甲氧基苯基)-6-(3,4-二羟基苯乙基)-2氢-吡喃-4-醇(Ⅲ-1)的一组差向异构体,2-(3,4-二羟基-5-甲氧基苯基)-6-(4-羟基苯乙基)-2氢-吡喃-4-醇(Ⅲ-2)的一组差向异构体以及2-(3,4-二羟基-5-甲氧基苯基)-6-(4-二羟基-3-甲氧基苯乙基)-2氢-吡喃-4-醇(Ⅲ-3)的2组差向异构体在复方煎煮过程中发生显著的立体选择性反应,由外消旋体变成单一旋光异构体。吡喃环4-位的乙酰化可能是减少这种反应的关键因素。     

液相色谱–串联质谱法测定中药材中11种真菌毒素

建立液相色谱–串联质谱(LC–MS/MS)法同时测定中药材中11种真菌毒素的方法。样品经乙腈–水提取,以0.1%甲酸甲醇溶液–0.1%甲酸水溶液为流动相,用Waters Acquity BEH C₁₈柱分离,采用LC–MS/MS法测定,内标法定量。11种真菌毒素的质量浓度在0.1～100 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数均不小于0.996,检出限为0.08～1.40 μg/kg。样品加标回收率为76.1%～97.6%,测定结果的相对标准偏差为3.97%～8.58% (n=6)。该方法简单、稳定、可靠,适合中药材中11种真菌毒素的测定。     

固相萃取/液相色谱-串联质谱法测定麦卢卡蜂蜜特征化合物

建立了固相萃取/液相色谱-串联质谱(SPE/LC-MS/MS)同时测定麦卢卡蜂蜜中4种特征化合物2'-甲氧基苯乙酮(2'-MAP)、2-甲氧基苯甲酸(2-MBA)、3-苯基乳酸(3-PA)和4-羟基苯基乳酸(4-HPA)的方法。蜂蜜样品用含1%甲酸水溶液溶解,经HLB固相萃取柱净化,Thermo Hypersil Gold C18(50 mm×2.1 mm,1.9μm)色谱柱分离,0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱。4种化合物在电喷雾正/负离子多重反应监测模式(MRM)下同时进行检测,外标法定量。结果表明,2'-MAP、2-MBA和4-HPA在0.01~1.0 mg/L、3-PA在0.1~10.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)均大于0.99。方法检出限(LODs)和定量下限(LOQs)分别为0.1~1.0 mg/kg和0.5~5.0 mg/kg。蜂蜜样品的平均加标回收率为79.4%~98.3%,相对标准偏差(n=6)为3.2%~8.7%。利用该方法对采集于新西兰不同产地的12个品种的114个巢蜜样本和4个国家的50个商品化蜂蜜进行了验证。该法灵敏度和准确度高,分析速度快,可为判别单花种、多花种及非麦卢卡蜂蜜提供参考。     

液相色谱-串联质谱法测定血浆中甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素

建立了血浆中甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素的液相色谱-串联质谱定量测定方法。生物样本经过固相萃取方式进行前处理,采用Venusil XBP Silica色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)分离,流动相为甲酸-甲酸铵水溶液(A相)和甲酸-水-甲酸铵乙腈溶液(B相),梯度洗脱。在电喷雾正离子模式下,以多反应监测模式检测待测组分。在最优条件下,分析物在相应的浓度范围内相关系数均大于0.999,加标回收率为85%～109%。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap高分辨质谱联用快速鉴定半夏中的化学成分

利用UHPLC-Q-Orbitrap四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术对半夏的化学成分进行快速识别和鉴定。以80%(V/V)甲醇提取,Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm, 1.7μm）分离,0.1%甲酸水（A）-0.1%甲酸的乙腈（B）溶液作为流动相进行梯度洗脱。质谱采用正、负离子监测模式,利用全扫描及自动触发二级质谱扫描,快速识别和鉴定半夏中的化学成分。根据高分辨质谱数据,从半夏中共分析鉴定出111个化合物,包括生物碱类37个、氨基酸及其衍生物20个、黄酮类17个、萜类12个、有机酸及其衍生物6个、苯丙素类5个、其它类14个。该方法可为半夏质量控制和药效物质研究提供参考。