Immersionsrefraktometrie an lebenden Zellen mit der Brechzahlgradientenmethode

Zusammenfassung Zur immersionsrefraktometrischen Bestimmung der mittleren Brechzahl des Cytoplasmas von Gewebekulturzellen wird der in Frage kommende Brechzahlbereich über einen Brechzahlgradienten des Mediums kontinuierlich und definiert durchlaufen. Bei Grenzdunkelfeldbeleuchtung im Mikroskop wird die Beugungslichtintensität, die der Brechzahldifferenz zwischen Medium und Objekt proportional ist, mikroskopphotometrisch gemessen. Sie durchläuft bei Brechzahlgleichzeit ein Minimum. Es werden die mathematischen Bedingungen angegeben, unter denen es die Gradientenmethode gleichzeitig gestattet, den osmotischen Druck des Immersionsmediums aufrechtzuerhalten und damit Isotonie für die Zellen zu gewährleisten.

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Immersion refractometry on living cells with the method of refractive index gradient

For microscopically determining the average refractive index of the cytoplasm of single tissue culture cells by immersion refractometry, a method is described which by means of a gradient mixing device permits continuous variation of the refractive index of the immersion medium in a definite manner within the interesting range. Using a special type of dark field illumination the intensity of diffracted light is measured as a function of the difference in refractive indices of cytoplasm and medium by use of a microscope photometer. The intensity measured reaches a minimum at equal refractivity. The mathematical conditions are described, under which the device provides for constant osmotic pressure of the medium during variation of its refractive index, thereby maintaining isotonic conditions.

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Mit Unterstützung durch Battelle Memorial Institute, Columbus/Ohio (USA).