刚果红与蛋白质相互作用的分光光度研究及其分析应用

在pH4.1的Britton-Robinson缓冲介质中,刚果红与蛋白质在室温下能迅速结合生成红色复合物,其最大吸收波长为488nm,比刚果红本身紫移了32nm。用光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的方法。测定蛋白质(BSA)的表观摩尔吸光系数4ε88为2.876×105L.mol-1.cm-1,该法简便、快速、选择性好、灵敏度高,用于人血清样品和含乳饮料中蛋白质的测定,结果与考马斯亮蓝法一致。     

刚果红共振光散射法测定蛋白质

本文研究了生物染料刚果红(Congo red)与人血清白蛋白(HSA)作用的共振光散射光谱,pH为4．35的溶液中,刚果红与人血清白蛋白作用导致在575m处共振光散射明显增强,且共振光散射信号值与蛋白质的浓度具有线性关系。     

荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用*

荧光光谱法是研究蛋白质在水溶液中分子构象的一种有效方法。文章综述了常见的蛋白质荧光光谱的研究方法, 并介绍了几种荧光光谱新技术。     

水溶苯胺蓝与蛋白质结合反应的研究及应用

在pH 2.36的Britton-Robinson(B-R)缓冲介质中,水溶苯胺蓝与蛋白质形成显色化合物,其最大吸收波长为688nm,比试剂本身红移88nm,表观摩尔吸光系数达4.25×105L·mol-1·cm-1(牛血清白蛋白)。制定了四种蛋白质的标准工作曲线,用于人血清样品中总蛋白的测定,结果与溴甲酚绿法一致。     

氯氮平与蛋白质相互作用的研究

用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了在模拟人体生理条件下,氯氮平和牛血清蛋白（BSA）结合反应的特征,发现氯氮平对BSA有较强的荧光猝灭作用,且氯氮平的紫外吸收光谱和BSA的荧光光谱有一定程度的重叠,由此可得出其作用距离和结合过程的基本热力学参数。     

卡马西平与牛血清白蛋白结合反应的热力学特性研究

用荧光光谱法研究了卡马西平与牛血清白蛋白的结合反应的热力学特性,并发现卡马西平对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用。从荧光猝灭光谱数据,由stern-volmer方程、double-reciprocal方程和热力学公式,得到了25℃时结合反应的结合常数为2.047×104mol.L-1,其△Hθ、△Gθ和△Sθ分别为-14.46 kJ.mol-1-、32.88kJ.mol-1和-24.03 J.K-1。     

酸性品红与蛋白质结合反应的研究及应用

在pH1.4的Clark-Lubs缓冲介质中，蛋白质与酸性品红反应形成结合物，该结合物的最大吸收波长为576nm，与酸性品红相比，红移了34nm。据此拟定了分析方法，制定了牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)、γ-球蛋白(γ-G)和酪蛋白的工作曲线，测定的摩尔吸光系数均在10^5数量级，用于人血清中总蛋白的测定，结果与溴甲酚绿(BCG)法基本一致。     

光谱法研究甲芬那酸与蛋白质的相互作用

用UV Vis吸收光谱和荧光光谱法研究了在模拟人体生理条件下,甲芬那酸与牛血清白蛋白结合反应特征,发现甲芬那酸对牛血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用,且甲芬那酸的紫外吸收光谱和牛血清白蛋白的荧光发射光谱有一定程度的重叠,由此得出了其结合反应的结合常数、结合位点数和结合过程的基本热力学参数。     

蛋白质沉淀-原子荧光法测定牙周炎患者血清中非蛋白结合硒

采用蛋白质沉淀法处理样品,与原子荧光光谱仪联用测定了牙周炎患者血清中非蛋白结合硒。对无水乙醇与血清混合体积比、温度与加热时间、离心力大小、NO3-与NO2-残留、共存离子等影响因素进行了考察。方法检出限为0.81μg/L,相对标准偏差为1.3%～4.5%,回收率为92.7%～103.2%。利用此方法测定了牙周炎患者血清中非蛋白结合硒,并与健康人作了对比。     

三维荧光光谱法研究蛋白质溶液构象

采用三维荧光光谱法(三维荧光光谱、三维荧光偏振光谱)结合内源荧光探针色氨酸对牛血清白蛋白(BSA)和鸡蛋白蛋白(EA)及其在不同条件下的构象变化进行了研究.结果表明,三维荧光光谱法是一种研究蛋白质溶液构象很有效的分析方法,该方法能够较直观地表明色氨酸残基在蛋白质分子中的微环境及其在不同条件下的构象变化,并得出了一些有价值的结果.     

可可碱与牛血清白蛋白作用光谱特性的研究

本文应用荧光光谱法研究了可可碱（TB）与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的光谱特性。测定了18℃、30℃、40℃温度下的结合常数KA分别为1．68×10^4、1．58×10^4、1．45×10^4L／mol,结合位点数咒分别为1．04、1．03、1．03。实验结果表明：TB对BSA内源荧光的猝灭机理主要为静态猝灭;热力学参数探讨其相互作用机理,TB主要以静电力与BSA相互作用;研究了TB对BSA构象的影响,BSA的荧光主要源于色氨酸残基。同时研究了Cu^2＋存在下TB与BSA的相互作用。     

6-糠氨基嘌呤与牛血清白蛋白相互作用的研究

应用荧光光谱法研究了6-糠氨基嘌呤(KT)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的光谱特性。测定了16℃、28℃和39℃不同温度下的结合常数KA分别为:2.43×104、1.33×104、1.22×104L/mol,结合位点数n分别为:1.08、1.02、1.02。研究结果表明:KT对BSA内源荧光的猝灭机理主要为静态猝灭;探讨了相互作用机理,KT主要以静电作用与BSA相互作用;研究了KT对BSA构象的影响,表明BSA的荧光主要源于色氨酸残基,KT对BSA的构象有影响。     

曙红Y与牛血清蛋白作用的荧光光谱研究及分析应用

在pH 2.53的介质中,曙红Y与牛血清蛋白（BSA）作用形成复合物,最大吸收峰从513nm红移到529nm,曙红Y荧光光谱发生显著变化,最大发射光波长540nm（最大激发光波长308nm）荧光猝灭,其猝灭程度与BSA含量成正比,线性范围0－2.5mg/L ,相关系数0.999,检出限2.8μg/L(3σ）。作者研究了反应条件、干扰物质及进行了样品测试,结果令人满意。     

荧光法研究牛血清白蛋白与中性红的相互作用

用荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和吸收光谱研究了牛血清白蛋白与中性红的结合反应特征,用Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数方程等处理实验数据,得到了15℃时动态猝灭常数kq=5.434×1012L.mol-1.s-1;静态猝灭结合常数KLB=3.300×104L.mol-1,结合位点数n=1.18,根据F ster能量转移原理计算出中性红在牛血清白蛋白上的结合距离r=2.63 nm。     

硫酸长春碱与牛血清白蛋白相互作用的研究

本文利用荧光光谱法和紫外吸收光谱法研究了硫酸长春碱（Vinblastine Sulfate,VS）与牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）的相互作用,讨论了药物与蛋白相互作用时药物对蛋白微环境的影响。求得不同温度下（298K、308K和318K）药物与蛋白相互作用的结合常数及结合位点数。利用F6rster能量转移理论得药物与蛋白间的键合距离为3.34nm。热力学参数（△H=14.34kJ／mol,△S=36.92J／（mol·K））表明维持药物与蛋白质的相互作用力主要是疏水作用和静电作用。此外,基于硫酸长春碱的荧光猝灭效应,探讨了药物-蛋白质体系的几种物理化学参数包括电荷密度、离解常数及量子产率的变化效应;以及共存离子对药物-蛋白质体系结合常数的影响。     

光谱法研究核壳量子点CdTe/CdS与牛血清白蛋白的相互作用

应用荧光光谱、圆二色光谱和紫外吸收光谱等技术研究核壳量子点CdTe/CdS与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的结果表明,CdTe/CdS对BSA的荧光猝灭机理为静态猝灭。根据不同温度下量子点对BSA的荧光猝灭作用计算了结合常数、热力学参数,证明了量子点与BSA相互作用力主要是范德华力或氢键作用力。探讨了量子点对BSA构象的影响。     

氧氟沙星与脲诱导牛血清白蛋白结合的机制研究

摘要 利用荧光光谱和紫外光谱研究了脲（Urea）对牛血清白蛋白（BSA）结构的影响以及氧氟沙星（Oflxacin）与脲诱导的BSA结合的情况。结果显示：Urea诱导BSA变性历经两步、三态过程,且伴随中间态的形成。随着Urea浓度的增大,BSA荧光强度降低并先蓝移（344 nm～336 nm）,后又红移至350 nm。Urea浓度在4.6～5.2 mol/L范围时,Oflx对BSA中间态有强的猝灭作用（KQ=10.46×104 L/mol, Urea 4.8 mol/L）和较大的结合常数（KA=3.8807×105 L/mol, Urea 4.8 mol/L）,但是结合位点数小（n=0.76, Urea 5.0 mol/L）,能量传递效率低（E=0.3002, Urea 4.8 mol/L）。同步荧光光谱显示：Urea诱导BSA去折叠时,Trp-212残基微环境并未发生改变,而Tyr的最大荧光发射峰蓝移,Oflx的加入诱导Trp-212的微环境更具疏水性。Oflx加速了Urea对BSA的失活作用。     

用牛血清白蛋白泡沫提取硫酸庆大霉素

研究了用生物表面活性剂牛血清白蛋白（BSA）泡沫提取硫酸庆大霉素的条件及作用机理,并用微生物实验检验庆大霉素的生物活性。结果表明：BSA能替代化学表面活性剂用于氨基糖苷类抗生素的泡沫分离。硫酸庆大霉素的一步提取率为80．2％。     

核黄素与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

采用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱研究了核黄素与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的光谱行为。结果发现,在温度为293 K和310 K时核黄素与BSA的结合常数(Kb)分别为4.879×105L.mol-1和1.880×105L.mol-1,结合热力学方程计算得到了对应温度下的热力学参数。结果表明核黄素对BSA有较强的荧光猝灭作用,其荧光猝灭过程属于动态猝灭机制,二者主要靠疏水作用力结合。采用同步荧光光谱探讨了核黄素对BSA构象的影响。     

加替沙星与牛血清白蛋白的结合反应研究

应用简化的Hummel-Dreyer区带毛细管电泳方法（capillary zone electrophoresis， CZE）研究了牛血清白蛋白与加替沙星分子间的结合作用机制.在位点结合模型的基础上，得到了实用的非线性模拟计算公式，在优选的实验条件下，根据模拟计算公式计算了蛋白质-药物相互作用的结合参数.