核酸水解产物中腺嘌呤的荧光猝灭法测定及机理研究

研究了腺嘌呤猝灭伊文思蓝(Evans blue)的荧光猝灭机理并建立了测定腺嘌呤的新方法.当用253nm激发,伊文思蓝的最大发射波长位于387 nm,腺嘌呤对伊文思蓝的荧光具有猝灭作用.线性回归方程为:p(mg/L)=1.836×103 IF-1 -9.110,相关系数为0.999 7,线性范围为0.20～20.0 mg/L,检出限为0.18 mg/L,相对标准偏差(RSD)为5.6%.试验了pH、干扰离子、放置时间等对测定的影响,该方法可用于核酸水解产物中腺嘌呤的测定.     

吖啶黄荧光光度法测定腺嘌呤

碱性条件下,痕量腺嘌呤使得吖啶黄在激发波长为454 nm、发射波长为509 nm处的荧光强度明显增强,由此建立了荧光光度法测定痕量腺嘌呤的新方法.方法的线性范围为0.2～3.0×10-4 g/L,检出限为1.83×10-5 g/L,方法用于维生素B4片剂中腺嘌呤的测定,回收率为99.6%～101.4%.     

碳纳米管修饰电极差示脉冲阳极溶出伏安法测定腺嘌呤

在HAc NaAc缓冲溶液中,玻碳电极上修饰的少量碳纳米管对腺嘌呤的氧化起增强作用.研究了腺嘌呤在修饰电极上的伏安行为,优化了电氧化的最佳条件,并对其进行含量测定.方法的线性范围为2.0×10-8～1.0×10-5mol/L,检出限为1.0×10-9mol/L.用于模拟样品中痕量腺嘌呤的测定,结果满意.     

电化学预处理玻碳电极微分计时电位溶出法测定DNA中的嘌呤碱基及DNA浓度

研究了鸟嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、鸟嘌呤核苷、腺嘌呤核苷和变性DNA在电化学预处理玻碳电极上的恒电流微分计时电位溶出行为. 实验结果表明, 用电化学方法预处理玻碳电极操作简单, 效果明显, 预处理玻碳电极对嘌呤及其核苷和DNA的吸附能力大大增强, 用微分计时电位溶出法可以得到灵敏的溶出峰, 溶出峰高(dt/dE)与其浓度在一定范围内呈良好的线性关系, 可用于嘌呤碱基及其核苷的定量检测和DNA浓度的测定. 将该方法应用于酸变性DNA样品中鸟嘌呤与腺嘌呤的同时测定, 选择性好、灵敏度高; 还可获得有关DNA损伤的一些信息.     

乙醇含量的酶法测定

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理，通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)吸光度的变化率得出其酶促反应速度，对应不同的乙醇含量而制得标准曲线，试样中乙醇含量由测定值查标准曲线求得；讨论了pH值和抑制剂对测定的影响；方法简便、快速、准确。     

9-乙烯基腺嘌呤-顺丁烯二酰亚胺共聚物的合成及其特性的研究

由一种简便的方法合成了9-乙烯基腺嘌呤,并用9-乙烯基腺嘌呤与顺丁烯二酰亚胺共聚合,制得了一种新的聚合物。测定了该聚合物NMR,IR和UV,并与聚9-乙烯基腺嘌呤及聚顺丁烯二酰亚胺相比较,表明为一种共聚物,链间形成氢键。UV表明共聚物具有与RNA相同的紫外吸收。     

腺嘌呤和质子化腺嘌呤的结构和振动光谱

用密度泛函方法B3LYP/aug-cc-pVTZ分析了腺嘌呤和质子化腺嘌呤的低能稳定异构体的结构和振动光谱. 结果发现, 对于中性腺嘌呤分子, 腺嘌呤的异构体N9H比N7H的能量低32.76 kJ·mol-1(在极化连续模型下为6.28 kJ·mol-1). 基于标度量子力场方法所得到的势能分布, 对异构体N9H的部分振动基频重新进行了归属. 在极化连续模型下, 质子化腺嘌呤分子有5种低能稳定构型, 其中N1位质子化的9-位氢腺嘌呤最为稳定. 基于振动模式分析, 对这种最稳定构型的振动基频进行了归属, 并对腺嘌呤在pH=1的高氯酸溶液中的实验拉曼光谱进行了指认.     

超高效液相色谱-质谱联用法同时快速测定细胞中的4种吡啶核苷酸辅酶

建立了超高效液相色谱-质谱联用法同时测定细胞内4种吡啶核苷酸辅酶(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)以及它们的还原态(NADH和NADPH))的方法.样品经甲醇低温快速提取后,在新型混合模式Atlantis PREMIER BEH C18 AX色谱柱上分离,10 mmol/L甲酸铵...     

分散液-液微萃取结合HPLC测定富马酸替诺福韦酯中9-丙烯基腺嘌呤

将分散液-液微萃取与HPLC结合,建立了测定富马酸替诺福韦酯中的基因毒性杂质9-丙烯基腺嘌呤的分析方法。同时对影响萃取效率的各项参数如萃取剂的种类及用量、分散剂的种类及用量、溶液体系pH、离子强度及萃取时间等进行了优化。将样品用水溶解,调节溶液至pH 9. 0,NaCl浓度为3 g/L,以300μL正庚醇为萃取剂,萃取时间为3 min,3000 r/min离心3 min,取上层进行液相分析。结果表明,9-丙烯基腺嘌呤在1. 22～366 ng/mL范围内线性关系良好,检测限为0. 41 ng/mL,平均回收率为96. 2%～97. 8%,RSD 1. 0%。方法满足富马酸替诺福韦酯中基因毒性杂质9-丙烯基腺嘌呤的测定要求。     

腺嘌呤核苷一磷酸纯度标准物质的研制

以市售腺嘌呤核苷一磷酸为原料经纯化后研制脱氧核糖核苷酸标准物质.用红外光谱法和质谱法对纯化后的腺嘌呤核苷一磷酸样品进行定性鉴定,采用高效液相色谱法对腺嘌呤核苷一磷酸样品进行定量分析.探讨了高效液相色谱法分析腺嘌呤核苷一磷酸的分离和检测条件.实验发现,有机溶剂可以显著改善腺嘌呤核苷一磷酸的出峰时间,酸度和盐离子浓度可以显著改善色谱的分离度.采用多家实验室联合分析的方法对标准物质进行定值,研制的腺嘌呤核苷一磷酸标准物质的纯度为99.61%,定值结果不确定度为0.13%(k=2).     

水中汞量的酶法测定

提出用酶催化动力学光度法测定汞，是基于乳酸脱氢酶催化丙酮酸和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的反应，汞离子对于酶催化的抑制作用原理，通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸吸光度的变化率得出其酶促反应速度，对应于汞而制得标准曲线。检出限为0、18μg／L。讨论了pH值和共存离子对测定的影响。     

酶法测定乙醛

乙醛作为化工原料 ,其工业废水若处理不当 ,将造成天然水系的污染 ,因此 ,乙醛是环境监测的一项重要指标 .测定方法主要有碘量法 ,色谱法 ,光度法 ,及化学发光法等 [1 ,2 ] ,近年来酶法在分析测定方面得到广泛应用 ,以酶法测定食品中乙醛含量已有报道 [3] .本文基于乙醛 NADH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 ) 乙醇 NAD (氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 )在2 5℃时 ,反应平衡常数为 1 .0× 1 0 1 1 ,反应平衡偏向生成乙醇的方向 ,因此有利于痕量乙醛的测定 .通过在醇脱氢酶存在下 ,NADH→NAD 的转化 ,测定 NADH吸光度的变化率 ,得出其…     

核酸的极谱研究—Ⅰ.DNA碱基腺嘌呤的极谱吸附波

脱氧核糖核酸(DNA)碱基的测定在分子遗传学上有着十分重要的意义。近年来武者宗一郎、邓家祺等报导了核酸碱基的阳极溶出伏安法,检测下限为1×10~(-7)M。Temerk~ε用脉冲极谱法直接测定腺嘌呤,检测下限为1.5×10~(-6)～4.5×10~(-6)M。我们发现在0.5M抗坏血酸介质中,腺嘌呤在单扫描示波极谱仪上能产生灵敏的吸附还原波,检测下限为5×10~(-8)M。根据所拟方法测定了DNA样品中腺嘌呤,结果较好。本文还     

分子动力学模拟研究A1408G突变对核糖体16S rRNA片段的影响

利用分子动力学模拟方法, 研究了原核生物核糖体小亚基中的16S rRNA片段与氨基糖苷类抗生素巴龙霉素复合物结构的柔性. 结果表明, 16S rRNA片段中的1408位点的腺嘌呤(A)突变为鸟嘌呤(G), 改变了与tRNA中反密码子环识别相关的2个腺嘌呤A1492和A1493的空间构象, 阻碍了氨基糖苷类抗生素与核糖体的结合, 从而影响原核生物蛋白转录过程. 模拟结果与实验测定的晶体结构相吻合, 可为基于核糖体16S rRNA的药物分子设计提供较可靠的结构信息.     

高效液相色谱法测定红细胞保存液中腺嘌呤含量

1　引　　言腺嘌呤 ,即 6 氨基嘌呤 ,医学上一直被作为粒性白细胞增生药物 ,近年来 ,随着医药工业的发展 ,人们发现其在临床医学上有着更广泛的用途 ,因此在很多医药品配方中常需添加腺嘌呤 ,故对于其含量的分析受到越来越多人的重视。传统测定腺嘌呤的方法是利用其在 2 60ｎｍ附近有最大吸收这一性质 ,用紫外分光光度法定量 ,但此方法易受其它物质干扰 ,不易准确测定 ,近年来 ,有文献报道用联机卡尔曼滤波极谱法测定其含量 ,但其样品处理过程复杂 ,而且所需费用较高 ,很难普及。本文提出以磷酸缓冲溶液为流动相 ;以十八烷基硅烷键合硅胶为…     

高效液相色谱法测定Mg~(2+)与腺嘌呤核苷三磷酸和腺嘌呤核苷二磷酸的表观稳定常数

用高效液相色谱法测定配合物的表观稳定常数,Horvath等曾有报道。只要待测物与其配合物的保留时间有差异即可用本法测定。如样品中含有杂质,可通过色谱柱分离,不需事先纯化,这对于腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)和腺嘌呤核苷二磷酸(ADP)这些易降解的生化物质表观稳定常数的测定尤为有利。 实验部分 (一) 仪器与试剂 1.仪器 岛津LC-4A色谱仪;色谱柱:Nucleosil-ODS,4×250mm,7μm(大连化学物理研究所仪器厂装)。 2.试剂 ATP,上海生化试制商店;ADP,上海生     

9-(2-溴乙基)腺嘌呤合成工艺研究

研究了用腺嘌呤和1,2-二溴乙烷合成9-(2-溴乙基)腺嘌呤的方法.讨论了物料配比、反应时间、碳酸钾用量等因素对反应的影响.确定了合成9-(2-溴乙基)腺嘌呤的最佳反应条件,在选择的试验条件下产率为81.0%.     

槲皮素与腺嘌呤氢键作用的最佳位点

本文优化得到了16个由槲皮素与腺嘌呤形成的氢键复合物的稳定结构,并计算了它们的结合能.研究发现,在气相和水相中,槲皮素均通过qu1位点与腺嘌呤作用形成稳定的氢键复合物.比较了腺嘌呤与槲皮素形成的氢键复合物、腺嘌呤与胸腺嘧啶形成的Watson-Crick碱基对的相对稳定性.在气相条件下Watson-Crick碱基对更稳定,在水相条件下腺嘌呤与槲皮素形成的氢键复合物更稳定,说明水相条件下腺嘌呤与槲皮素之间的相互作用强于与胸腺嘧啶之间的相互作用.基于标准反应Gibbs自由能变的计算结果估算了水相条件下腺嘌呤与槲皮素形成的氢键复合物和Watson-Crick碱基对的相对平衡浓度.     

酶催化动力学荧光法测定乙醇

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理,通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)荧光强度的变化率得出其酶促反应速度,对应乙醇浓度而制得标准曲线,试样中乙醇含量由标准曲线求得,检出限为4.0×10-6mol/L。考察了试剂用量、pH、共存组分对测定的影响。该方法简便、快速、准确。     

酶催化动力学光度法测定镉(Ⅱ)

基于醇脱氢酶(ADH)催化乙醇生成乙醛的反应中镉离子对于酶的抑制作用原理,通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)吸光度的变化率得出其酶促反应速度,对应于镉离子浓度而制得标准曲线.检出限为0.02μmol/L.讨论了pH、温度和共存离子对测定的影响.本方法具有快速、灵敏、干扰少的优点.