高速逆流色谱法分离茶叶中的生物碱

以氯仿－甲醇－磷酸二氢钠缓冲液（２３ｍｍｏｌ／Ｌ,ｐＨ５．６）（体积比４∶３∶２）为溶剂系统,上相为固定相,下相为移动相,从茶叶的总生物碱中分离出三个成分,其中一个是咖啡碱,一个是茶碱,另一个待定。将分离结果与ＴＬＣ分离结果相比较,证实了高速逆流色谱法的有效及实用性。     

高速逆流色谱法从秦艽地上部分制备分离龙胆苦苷

采用高速逆流色谱法分离纯化秦艽地上部分中的龙胆苦苷。溶剂系统为V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=4∶4∶2,上相为固定相,下相为流动相,转速为800r/min,流速为2mL/min。所得产物经LC-MS分析为龙胆苦苷,纯度经高效液相色谱分析为94.0%(峰面积归一化法)。在保证分离效果的前提下,增大进样量,摸索制备分离龙胆苦苷的高速逆流色谱条件,为用高速逆流色谱法大量制备龙胆苦苷提供了一个可行方法。     

高速逆流色谱分离同分异构体

应用高速逆流色谱法对同分异构体的分离纯化进行研究。实验结果表明,以正己烷-乙酸乙酯-水(体积比为1∶10∶10)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,进行二次高速逆流色谱分离,可从茶多酚中分离出g级的儿茶素同分异构体——(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和(-)-没食子儿茶素没食子酸酯(GCG),其高效液相色谱纯度均在98%以上。选择四氯化碳-氯仿-甲醇-水(体积比为7∶3∶7∶3)为溶剂系统,下相为固定相,上相为流动相,经一次高速逆流色谱即可将药物中间体溴代苯胺同分异构体进行有效的分离。     

高速逆流色谱法分离制备中药诃子中的没食子酸

利用高速逆流色谱法从100 mg诃子醇提物中一次性分离制备得到8.6 mg没食子酸。通过分析型高速逆流色谱对5种溶剂系统进行筛选,确定以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为1:5:1:5)为两相溶剂体系并放大到制备型上,以上相为固定相,下相为流动相,在主机转速850 r/min、流动相流速2 mL/min、检测波长254 nm的条件下进行分离制备,获得4个分离峰(组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。经高效液相色谱检测,按照面积归一法计算,其中组分Ⅲ的纯度达96.40%。经电喷雾电离质谱分析,并结合与没食子酸标准品的高效液相色谱测定结果的对比,确定组分Ⅲ为没食子酸。该方法简便、快速、重复性好,适合于诃子中没食子酸的分离制备。     

高速逆流色谱法分离纯化续随子种子中的七叶内酯

建立了高速逆流色谱(HSCCC)技术分离纯化续随子种子中七叶内酯的方法。将续随子种子的乙酸乙酯萃取物直接进行高速逆流色谱分离,考察了不同溶剂系统的分离效果。结果表明,最佳的溶剂系统为氯仿-甲醇-水(体积比为4:3:2),以其上相为固定相,下相为流动相。从200 mg续随子种子乙酸乙酯萃取物中分离得到80 mg七叶内酯,纯度为99.04%。HSCCC技术可高效分离纯化续随子种子中的七叶内酯,为得到高纯度的七叶内酯提供了制备技术。     

高速逆流色谱分离金果榄中巴马亭

用高速逆流色谱分离金果榄中巴马亭,以氯仿∶甲醇∶0.2mol·L-1盐酸(2∶1∶1)溶剂体系,上相为固定相,下相为移动相,流速2ml·min-1,仪器转速800r·min-1,进样量100mg,2h后分离出了16.8mg巴马亭(组分Ⅱ),并经HPLC测定,组分纯度>99.6%,并由UV、IR、MS和1H NMR确定结构。     

高速逆流色谱法分离制备乌药叶中的黄酮类成分

应用高速逆流色谱法分离制备了乌药叶中的黄酮类成分。以正己烷-乙酸乙酯-正丁醇-冰醋酸-水(体积比为2∶4∶2∶1.5∶6)为两相溶剂系统,在主机转速800 r/min、流速2.0 mL/min、检测波长280 nm条件下进行分离制备。所得流分经高效液相色谱法检测,并经电喷雾电离质谱、核磁共振氢谱、碳谱鉴定化合物的结构。结果表明,从乌药叶总黄酮粗提物中分离得到了5个化合物,分别为槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(1)、槲皮素-5-O-β-D-葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-呋喃阿拉伯糖苷(3)、槲皮素-3-O-吡喃鼠李糖苷(4)、山奈酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(5),其中化合物1,2,3和5 为首次从该植物中分离得到。该法具有简便、快速的优点。     

夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化

采用pH-区带精制逆流色谱与常规高速逆流色谱相结合的方法快速分离纯化夏天无总生物碱.利用pH-区带精制逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶ 5∶ 2∶ 8, V/V, 上相加5 mmol/L三乙胺,下相加5 mmol/L HCl)为溶剂系统,上样量3.0 g,分离得到1个混合物和3个高纯度的生物碱单体:原阿片碱(375 mg)、苏元胡碱甲(362 mg)和比枯枯灵(246 mg), 其纯度分别为97.5%,95.6%和97.1%.所得混合物850 mg经常规高速逆流色谱二次分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶ 0.8∶1.1∶ 1, V/V)为溶剂系统,得到比枯枯灵(105 mg)和四氢巴马亭(470 mg)单体,纯度分别为99.1%和99.7%.从该药材分得苏元胡碱甲,两种制备分离模式相结合,提高了夏天无生物碱的分离效率.     

高效液相色谱法测定氢化可的松发酵液中的氢化可的松及其有关物质

建立了用高效液相色谱法对氢化可的松发酵液中的主要组分氢化可的松(HC)、表氢化可的松(EHC)、17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(RSA)和17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二酮(RS)进行测定的方法。采用硅胶吸附色谱柱,以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水(体积比为385∶60∶30∶2)为流动相,流速0.8 mL/min ,在242 nm波长下检测。发酵液各组分分离良好,HC,EHC,RSA和RS的线性范围分别为25～375 mg/L ,5～75 mg/L ,5～75 mg/L     

高速逆流色谱法分离制备华山参中东莨菪内酯

采用高速逆流色谱法从华山参乙醇提取液的氯仿萃取物中分离得到了一种高纯度的香豆素类化合物,东莨菪内酯．所用体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水（体积比3：5：3：5）,上相做固定相,下相做流动相．分离所得东莨菪内酯的纯度经高效液相色谱检测达到97％．该方法操作简单、方便、快捷,可用于华山参中香豆素类化合物——东莨菪内酯的分离制备．     

HPLC法测定氯霉素氢化可的松滴耳液中两组分的含量

采用反相高效液相色谱法,以醋酸泼尼松为内标,ＵＶ检测波长为２４４ｎｍ,以ＹＷＧ－Ｃ１８为固定相,以甲醇－水（６０∶４０）为流动相,同时测定了氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松的含量,并进行了线性范围和回收率测定,平均回收率（ｎ＝６）和相对标准偏差分别为：９９．９１％和０．８６％（氯霉素）,９９．５８％和１．３４％（氢化可的松）。     

逆流色谱分离镅(Ⅲ)和铕(Ⅲ)的研究

选择0.1 mol/L NaC lO4为流动相,以二氯苯基二硫代膦酸的二甲苯溶液为固定相,研究了萃取剂浓度、流动相pH及流动相流率对逆流色谱(CCC)分离Am3 和Eu3 效果的影响。结果表明,在实验条件下,两者的分离系数随着固定相中的萃取剂浓度增加、流动相的pH升高而增大;降低流动相流率后可明显改善分离效果。通过改变分离条件,Am3 和Eu3 可基本上实现相互分离,两者间的分离系数和分离效率分别达到2.87和0.74。     

逆流色谱分离感应耦合等离子质谱在线测量超痕量钚

将逆流色谱（CCC）与感应耦合等离子质谱（ICP-MS）相联,研究了几种两相体系在CCC中的固定相保留率,从中选择1％TNOA-正庚烷作固定相,通过CCC富集分离钚并去除基体及干扰元素,通过研究在线分离条件及定量方法等,建成了CCC分离ICP—MS在线测量超痕量钚的方法。采用该方法分析得到实际土壤样品中^239Pu的含量与由传统的分离方法给出的结果相吻合。     

荧光光谱分析法测定针剂中的丙酸睾酮

系统研究了以荧光光谱法测定丙酸睾酮的条件,包括浓硫酸的用量、加热温度及时间、pH值、溶剂等的影响,利用浓硫酸的氧化作用及甲醇溶剂的溶剂作用增敏荧光,建立了测定丙酸睾酮的高灵敏的荧光光谱分析新方法,其线性范围为0～5.80×10-6mol/L,检出限为2.01×10-8mol/L。将本方法用于丙酸睾酮实际针剂样品分析,结果令人满意。     

逆流色谱技术分离蛋白质和多肽的研究进展

逆流色谱是一种连续高效的液-液分配色谱技术,具有进样量大、无不可逆吸附、回收率高和能有效保护样品生物活性等优点,在蛋白质和多肽的分离中具有独特的优势。本文综述了近年来几种新型的逆流色谱技术在蛋白质和多肽分离中的研究进展,并对该领域的未来发展进行了展望。     

高速逆流色谱研究进展

综述了近年来高速逆流色谱（HSCCC）在分析、半制备和制备分离天然产物、蛋白质、抗生素、无机物等领域的研究和应用进展,总结了适用于HSCCC的溶剂体系,并展望了HSCCC与质谱联用、pH区带逆流色谱和离子对逆流色谱新技术的应用前景。     

Countercurrent Chromatography for the Measurement of the Hydrophobicity of Sulfonamide Amphoteric Compounds

Octanol-water partition coefficients (P _o/w ) of 17 sulfonamides (SAs) were determined by countercurrent chromatography (CCC). The measured P _o/w values were in the 0.002–46 range (–2.65 < log P _o/w < 1.7). The lipophility of these compounds depends on the pH showing a maximum for intermediate values. The apparent P _o/w coefficients of SAs were obtained at 5 pH values: 2, 3, 5, 7 and 11, using 0.01 M ammonium phosphate octanol saturated buffers. A theoretical model linking these values with pH for amphoteric compounds was checked and verified. Often the P _o/w coefficients of the molecular forms obtained with the CCC method differ significantly from literature values obtained using softwares and/or from experimental values calculated with extrapolation. The CCC method allows also the determination of the P _o/w coefficients of the ionic forms of the SAs, cationic forms at low pH values and anionic forms at elevated pHs. The acidity constants were also estimated using the theoretical model. Relationships between SA retention factors obtained by RPLC and hydrophobicity were also discussed.     

High Performance Liquid Chromatographic Determination of Testosterone Propionate,Progesterone and Estradiol Benzoate in Bovine Implants

Abstract

A Method for the determination of testosterone propionate, progesterone, and estradiol benzoate in bovine implants is presented. The method utilizes a Dupont, zorbax DDS analytical column with a mobile phase consisting of methanol, deionized water, and tetrahydrofuran (65:30:15 v/v). Sample preparation consists of of dissolution of the implant, followed by dilution and injection onto the HPLC system. The procedure is accurate, precise, linear, and specific for the implant steroids with quantitation by peak height, using dipenty 1 phthalate as the internal standard.     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血清中皮质酮与皮质醇

建立了同时测定人血清中皮质酮和皮质醇的液相色谱-串联质谱法。血清经正己烷除脂净化、叔丁基甲醚提取后,以乙腈-0.1%甲酸溶液(含0.01 mol/L甲酸铵)为流动相,流速为0.3 mL/min。用Agilent E-clipse Plus-C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm)分离,正离子模式下进行串联质谱检测。皮质酮和皮质醇浓度在0.5～200 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(r2)分别为0.999 7、0.999 4。皮质酮和皮质醇分别在5.0、25.0、75.0 ng/mL和0.5、2.5、10.0 ng/mL 3个加标水平下的平均回收率为86.6%～102.7%,相对标准偏差不大于7.1%,检出限分别为0.1 ng/mL和0.05 ng/mL。该方法操作简便、灵敏度高、重现性好、定性定量准确,适用于同时测定血清中的内皮质酮和皮质醇。