利用微生物混合培养物生产甜菜渣单细胞蛋白

利用半连续培养的方法组建了一个由７种微生物组成的能以甜菜渣作原料生产单细胞蛋白的混合培养物．在最佳条件下，甜菜渣被转化为含粗蛋白为４５％的单细胞蛋白，其氨基酸组成基本符合联合国粮农组织推荐的最佳蛋白质的组成．此种微生物的混合培养物在营养方面是自我满足的，外来的微生物不能作为污染物存在于发酵系统中．因此，发酵过程可以在不灭菌的条件下进行．本研究还对混合培养物中各种微生物在降解甜菜渣过程中的作用进行了初步地探讨．     

石油污染海水中细菌群落的动态变化

利用PCR-DGGE和构建16S rDNA克隆文库等技术比较分析了石油污染海水中石油降解菌的数量、菌群组成以及石油降解率的动态变化.实验结果表明：在宁波港口海域天然海水外源石油降解的21d过程中,海水中原有的石油降解菌数量很少,但污染石油后,其数量快速增加,在第14d达到最大值,为2.40×10^7cells·mL^-1,该时期所含菌体种类也最多.石油降解过程中主要细菌类群不断发生演替,第7d时Alcanivorax与Thalassospira取代水样中原有细菌成为优势菌,第14d时的优势菌中又增加了Pseudomonas,第21d时前两时期的主要细菌减少,Acinetobacter和Parvibaculum等属的细菌成为这一时期的优势菌.14 d后,石油降解率最高,达171（mg·d^-1）·L^-1,21 d后石油降解率为28.74%.     

酵母细胞壁主要结构蛋白CWP33的纯化与研究

在酵母Ｃａｎｄｉｄａｕｔｉｌｉｓ细胞壁上发现一种细胞壁主要结构蛋白（ＣＷＰ３３），其分子量为３３×１０３，与其它细胞壁蛋白不同，该蛋白在细胞壁上对胰蛋白酶作用不敏感，而其它细胞壁蛋白组分几乎完全被胰蛋白酶降解．利用这一性质将该蛋白从细胞壁上抽提后，经ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱层析和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ凝胶层析得到纯化．经研究ＣＷＰ３３蛋白具有葡聚糖内切酶活性，可以水解地衣糖，但不能水解对硝基苯葡萄糖苷．该蛋白可能具有重要的结构功能．     

忍冬花内蜜腺的解剖学研究

忍冬的花内蜜腺分布在花冠简内侧的基部。蜜腺由分泌表皮和产蜜组织组成,属于花被蜜腺。分泌表皮的大部分细胞特化为单细胞的蜜腺毛,其顶端的角质层厚薄不均匀,在蜜腺组织的发育过程中,蜜腺毛中的液泡变化较为明显,产蜜组织细胞中的淀粉粒也呈现出一定的消长规律。泌蜜期间,密腺毛的角质层与细胞壁分离,其间充满蜜汁,蜜汁通过薄的角质层处泌出。     

高效纤维素分解菌混合培养及其降解能力

从某垃圾填埋场的垃圾堆腐物及四川农业大学农场的畜粪和土样中分离到3株降解纤维素能力较高的菌株B1、F1和F2，经初步鉴定，其分别为纤维单孢菌属（Cellulomonas）、木霉属（Trichoderma）和青霉属（Penicillium）。其中混合菌株B1F1、B1F1、F1F2摇床培养8d时滤纸纤维素失重率分别达到49．76％，52．30％，46．02％，均高于单一菌种的滤纸失重率。且CMC酶活也明显提高，比其单一菌株的酶活提高了1．5倍。试验结果表明，由两种不同菌株组成的混合菌分解纤维素能力明显强于其中任何单一菌种，其中两真菌F1F2组合效果最好，且将其制成高纤维素酶活的固体曲，为今后纤维素的固态发酵生产和混合发酵降解纤维素废弃物提供了依据。     

通过原生质体融合改建酵母细胞的研究IV.原生质体融合技术在酵母育种上的应用

HU-KDF-lay菌株是通过原生质体融合并经筛选而获得的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae var, ellipsoideus H UK-1> aa, his一)与糖化酵一母(Saccharomyces dia-staticus, a, arg')的种间三倍体融合杂种.作者在实验室条件下刘一其发酵生物学进行比较研究后，在仙居酒厂对该融合杂种发酵不同淀粉质原料的适应性及其酒精产量作了生产规模的比较试验结采表明，种间融合杂种HU-KDF-185对番薯渣原料的酒精产量平均为30.77男，这比我国目前广为应用的酒精生产菌株K氏酵母(29.71 0o)和新市一号(29.54落)分别增产3.56%和4.16劣。在大米原料的发酵中，其酒精产量平均为35.38不，比大米酒精生产菌株M-85(32.87男)相对增产酒精7.64形，而番薯丝原料的酒精产量平均为30.20男，比生产菌株新市一号(28.70男)相对增产酒精5.23男.由此可见，种间融合杂种HU-KDF-ls5在不同类型的淀粉质原料的发酵中，其酒精增产效果显著而稳定，这也证明了我们通过原生质体融合技术所获得的种间融合杂种将是一株较优良的酒精高产菌株.同时也表明原生质体融台技术对酒精酵母的选育，特别是对那些在其生活周期中缺乏或失去有性过程的工业酵母更为有用.     

干旱胁迫对长雄野生稻根际微生物群落结构的影响

干旱胁迫是影响水稻生产的主要障碍。本研究以6种长雄野生稻(Oryza longistaminata)为材料,采用盆栽控水模拟干旱胁迫,通过16SrDNA高通量测序技术,研究干旱胁迫对长雄野生稻根际微生物群落结构的影响。结果表明:细菌的优势门是变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteria),相对丰度分别为24.3%～36.49%、11.94%～20.39%和8.9%～17.83%。古菌的优势门是泉古菌门(Crenarchaeota)和广古菌门(Euryarchaeota),相对丰度分别为0.50%～1.05%,0.17%～0.64%。与空白土壤比较,干旱胁迫后的根际土壤微生物菌群多样性未发生明显变化,但群落组成结构发生显著改变(P<0.05)。在干旱胁迫处理下,酸杆菌门(Acidobacteria)、α-变形菌(Alphaproteobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、放线杆菌门(Actinobacteria)、TM7和泉古菌门(Crenarchaeota)的相对丰度显著升高,而δ-变形菌(Deltaproteobacteria)、硝化螺旋菌门(Nitrospirae)、OD1、绿菌门(Chlorobi)、螺旋菌门(Spirochaetes)、OP11和NC10的相对丰度显著降低。这些结果表明,长雄野生稻根际微生物能对干旱环境进行响应,发生群落结构改变达到新的平衡,保持同样高的群落结构多样性,来应对干旱环境的变化。     

酱油多菌种液态前发酵条件及其酶动力学研究

采用米曲霉、黑曲霉、香菇菌等多菌种液态发酵酱油研究了液态条件下三种菌的酶系组成、产酶条件及特点以及蛋白酶动力学。研究结果表明三种菌在酶系组成上有取长补短的效果，可以明显促进氨基酸的生成，改善酱油风味。酶动力学结果表明，在液态中酸性蛋白酶量适pH为2．6；中性蛋白酶pH6.9；碱性蛋白酶pH9.8，酶作用温度在35～45℃范围内，酶活随温度的升高而升高．     

不同贮藏温度下葛氏长臂虾磷脂成分的变化

对在30℃、4℃、-10℃、-20℃ 4种温度下贮藏的葛氏长臂虾的磷脂成分变化进行了分析．结果表明：随着贮藏温度的上升,葛氏长臂虾中磷脂的损失率增加;在不同温度下贮藏3d,磷脂各组分的相对百分比都发生了变化,随贮藏温度的升高PC的降解速度大大加快,所占的百分比快速下降,而LPC的比例有不同程度的增加。     

通过原生质体融合改建酵母细胞的研究——Ⅳ.原生质体融合技术在酵母育种上的应用

HU-KDF-185菌株是通过原生质体融合并经筛选而获得的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae var. ellipsoideus HUK-1,(1a,his~-)与糖化酵母(Saccharomyces diastaticus, a, arg~-)的种间三倍体融合杂种.作者在实验室条件下对其发酵生物学进行比较研究后,在仙居酒厂对该融合杂种发酵不同淀粉质原料的适应性及其酒精产量作了生产规模的比较试验。结果表明,种间融合杂种HU-KDF-185对番薯渣原料的酒精产量平均为30.77％,这比我国目前广为应用的酒精生产菌株K氏酵母(29.71％)和新市一号(29.54％)分别增产3.56％和4.16％;在大米原料的发酵中,其酒精产量平均为35.38％,比大米酒精生产菌株M-85(32.87％)相对增产酒精7.64％,而番薯丝原料的酒精产量平均为30.20％,比生产菌株新市一号(28.70％)相对增产酒精5.23％.由此可见,种间融合杂种HU-KDF-185在不同类型的淀粉质原料的发酵中,其酒精增产效果显著而稳定,这也证明了我们通过原生质体融合技术所获得的种间融合杂种将是一株较优良的酒精高产菌株.同时也表明原生质体融合技术对酒精酵母的选育,特别是对那些在其生活周期中缺乏或失去有性过程的工业酵母更为有用.     

水稻原生质体细胞学状态与原生质体复壁分裂相关性初探

通过对水稻胚性和非胚性悬浮细胞培养物分别制备的原生质体进行细胞学观察和培养研究,得到如下结果:由酶解制备的胚性原生质体具有较完整的细胞膜、细胞膜上小球状突起较小、细胞质含有丰富的颗粒状内含物,经培养,胚性原生质体多能进行第1次分裂,并能持续分裂,最终分化出再生植株.而由酶解制备的非胚性原生质体的细胞膜上有裂隙产生、细胞膜上小球状突起较大、细胞质中颗粒状内含物较少、具有明显的大液泡,经培养,仅个别原生质体能以"酵母出芽"式进行不均等分裂,随后细胞自行解体.结果表明,由酶解制备的原生质体细胞膜是否完整,膜上突起的大小以及细胞质颗粒状内含物的多少与原生质体能否正常复壁分裂密切相关.     

假丝酵母和白地霉的原生质体融合研究

对影响假丝酵母和白地霉原生质体制备与再生的因素:菌龄、破壁酶的种类和浓度、酶解时间、脱壁促进剂、渗透压稳定剂进行了研究。在综合比较原生质体制备率和再生率基础上,确定了制备原生质体的优化条件为:选用对数生长中期的菌体,用0.05%EDTA进行预处理,以0.7 mol/L NaCl为渗     

海带浆对马铃薯淀粉糊化及油炸膨化特性的影响

研究了海带浆体对马铃薯淀粉的糊化特性和油炸膨化特性的影响。研究表明，海带浆体对淀粉糊化的影响有利于膨化工艺操作，桨体含量５０％，糊化淀粉比例８～１０％，控制切片干燥后水份含量９％，可得到一种含碘≥５０μｇ／１００ｇ，且综合感官评定效果最好的海带马铃薯油炸膨化食品。     

微波消解-塞曼石墨炉原子吸收光谱法检测贝类中的铬

建立了分析贝类样品中铬含量的微波消解-塞曼石墨炉原子吸收光谱法,并对样品前处理方法和检测条件进行探讨.实验结果表明,利用微波消解进行前处理的样品溶样均匀,样品消解完全.石墨炉铬工作曲线浓度范围设定在0.00~15.00μg·L-1之间时,铬浓度与其吸光值呈良好的曲线关系,得出的新合理一元二次方程相关系数r=1.0000.同时对3种贝类样品进行平行测定和加标回收率测定,平行性好,加标回收率保持在82%~95%.并利用国家标准物质海带和贻贝成份分析标准物质进行质量控制,得到的测定值在标准证书的允许误差范围内,相对标准偏差分别为2.93%和2.54%.表明该方法具有操作简便、灵敏度高、准确可靠等优点,适合贝类等水产品中铬含量的检测.     

预处理改变稻草亚细胞结构的化学基础

以氢氧化钠、碳酸氢铵和尿素处理的稻草为研究对象,采用糖腈乙酰酯法和碱性硝基苯氧化法,分别测定了化学预处理前后稻草用80％乙醇浸提残渣中结构性多糖和木质素组分的变化．试验结果显示,化学预处理后稻草结构性多糖水解产物下降7．9％～17．7％;木质素组分中愈伤木基木质素下降31．9％～37．7％,对羟基苯基木质素下降16．6％～28．5％,紫丁香基木质素下降11．5％～16．8％,对香豆酸下降16．6％～26．3％,阿魏酸下降5．5％～11．1％．各组分下降幅度均以氢氧化钠处理最高．上述结果表明,化学预处理通过破坏木质素与结构性多糖、木质素单体之间的连接,导致细胞壁各层的木质素组分不同程度的下降是化学预处理后稻草亚细胞结构变化的化学基础所在．     

饲料蛋白质水平对日本无针乌贼生长性能和肌肉营养成分的影响

为研究饲料中不同蛋白质水平对日本无针乌贼生长性能及肌肉营养成分的影响, 试验配制了蛋白质水平为35%、40%、45%、50%、55%共5组试验饲料, 对初始体重为(37.86±5.63)g的(P>0.05). 当饲料蛋白质水平为50%时, 肌肉中粗蛋白(82.09%)、氨基酸总量(80.45%)达最大值, 而肌肉粗脂肪在饲料蛋白质55%组达到最大(6.33%), 均显著高于其他4组(P<0.05). 对肌肉氨基酸和脂肪酸的分析结果表明: 肌肉中必需氨基酸量(28.29%)和鲜味氨基酸量(33.03%)在45%和50%两组间无显著性差异(P>0.05),但显著高于其他3组(P<0.05); 总不饱和脂肪酸(EPA+DHA)呈先降后升的趋势, 在45%组和50%组显著低于其他组(P<0.05). 根据SGR折线模型拟合回归方程分析得出, 日本无针乌贼对饲料蛋白质的需求量为44.73%     

宁波陆源入海排污口优势菌群的数量、组成分析与研究

研究了宁波地区海域2011年3月、5月、8月、10月的排污口污水水体中可培养细菌的数量、组成及其分布, 探讨了优势菌群与当地环境的相关关系. 结果表明: 各地区细菌分布各月份性差异明显, 5月份、8月份细菌数量明显高于3月与10月, 其均值数量级能达到106 cfu?mL-1; 象山、余姚地区排污口细菌数量高于奉化、宁海、北仑地区, 细菌数量最高均值为8月份象山地区排污口(4.7×106cfu?mL-1). 优势菌群分布具有季节性分布特征: 3月份特有优势菌群为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)与海单胞菌属(Marinomonas sp.); 5月份为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、海单胞菌属(Marinomonas sp.)与弧菌属(Vibrio sp.); 8月份为泛菌属(Pantoea sp.)、弧菌属(Vibrio sp.)、肠杆菌属(Enterobacter sp.); 10月份为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、弧菌属(Vibrio sp.)、希瓦氏菌属(Shewanella sp.). 多维尺度分析表明: 临近海域类型与排污口类型为排污口细菌群落变化的两个关键因素.     

原生质体诱变选育去甲基金霉素高产菌

采用紫外线、同平板梯度浓度亚硝基肌，纯铜蒸气激光诱变去甲基金霉素生产菌金霉素链霉菌的原生质体，结果表明原生质体对各种诱变剂的敏感性较高.正变幅度较大.原生质体经紫外线、同平板梯度浓度亚硝墓肌复合诱变后，筛选到一菌株，重新制备原生体，经激光诱变，选育出高产菌株S. A. HU02，去甲基金霉素效价从2831u/ml提高到4337u/ml，提高了53. 2，经多次传代产量性状非常稳定.     

太湖水华过程中微生物群落的动态变化

通过对水华过程的原位观测,运用分子生物学手段对太湖藻类水华过程中微生物的动态变化进行了跟踪测定,PCR-DGGE分析结果显示,水华过程中,水体中细菌的种群结构发生了较大变化,细菌的种类和数量都有明显改变;荧光直接计数水华过程中细菌数量变化表明:在5~10月份水华发生过程中,水体中细菌总量呈逐渐上升趋势(R2=0.836);运用MPN法,对磷分解细菌分析表明,水华发生前期水体中磷分解细菌的数量变化不明显,而在水华后期数量有显著增加趋势.