不同底基隐蔽物、放养密度和饲料对网箱培育拟穴青蟹幼蟹的影响

在网箱内通过设置不同底基隐蔽物、放养密度和投喂不同饲料来进行拟穴青蟹幼蟹的中间培育,以观察其对幼蟹生长、存活率及残肢率的影响,培育时间为20 d。结果表明：在放养密度和投喂饲料相同的情况下,用网片做底基隐蔽物,幼蟹培育的成活率显著高于用泥蚶壳或砂做底基物的试验组（P〈0.05）;而不同底基物对幼蟹的残肢率无显著影响（P〉0.05）。在底基物和所投饲料相同的情况下,放养密度为150只/m^2的试验组比放养密度为250只/m^2的试验组幼蟹成活率要高,而残肢率要低（P〈0.05）。在底基物和放养密度相同而所投饲料不同的情况下,幼蟹成活率和残肢率在组间均无显著差异（P〉0.05）。不同试验组间幼蟹出箱的规格无显著差异（P〉0.05）。     

pH胁迫对拟穴青蟹体内几种免疫因子的影响

采用酶学分析方法研究pH(分别为4.5、6.0、7.5、9.0、10.5)胁迫下拟穴青蟹血清酚氧化酶(phenoloxidase,PO)以及血清、肌肉和肝胰腺超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),溶菌酶(lysozyme,UL)活性和抗菌力(antibacterial activity,Ua)等免疫因子的变化.结果表明,pH胁迫对拟穴青蟹血清PO和总SOD活性及Ua影响显著(p<0.05),而对UL活性影响不显著(p>0.05),对肌肉和肝胰腺总SDO活性影响显著(p<0.05);相同pH下肝胰腺总SOD活性差异显著(p<0.05),肌肉和血清总SOD活性差异不显著(p>0.05).综上所述,pH胁迫对拟穴青蟹的免疫反应影响显著,在pH 7.5～9.0范围内,其免疫力强.     

人工感染呼肠孤病毒对拟穴青蟹部分免疫因子的影响

采用注射和浸泡的方式人工感染拟穴青蟹呼肠孤病毒,研究了其对拟穴青蟹血细胞密度以及血清中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活力的影响.结果表明:注射(第Ⅱ组)和浸泡(第Ⅳ组)方式均能感染健康青蟹,病发死亡时间为7～9 d,死亡率达100%,血细胞平均密度在试验36～72 h间迅速上升并达最高值,其血细胞密度最高值分别为1.4008×107cells/mL与1.8243×107cells/mL;感染病毒的青蟹PO活性均大致呈现下降的趋势,其中,第Ⅳ组感染12 h青蟹PO活性相对对照组显著升高(P<0.05),其值为(6.90±1.54),达实验所测PO活性最高值;各实验组血清SOD活性呈无规律的变化;AKP活性感染组与对照组表现不同.表明测定血细胞密度以及PO和AKP活性可用来辅助诊断青蟹疾病,而SOD活性变化不能很好地表征青蟹受病毒感染的状况.     

拟穴青蟹大眼幼体和第Ⅰ期仔蟹对隐蔽物的选择

采用实验生态方法,以攀附率为指标,研究了青蟹大眼幼体和第Ⅰ期仔蟹对不同材质(棉布、尼龙筛绢、PVC和竹木)、放置方式(水平或垂直)和构型(3种结构×3种规格)隐蔽物的选择性.结果表明:大眼幼体和仔蟹对各种隐蔽物材质选择差异不显著(p＞0.05),对垂直放置隐蔽物的选择性显著高于水平放置者(p＜0.01),对不同结构(草丛型、洞穴型和折角型)和不同规格(5,7和10 mm)隐蔽物选择差异均极显著(p＜0.01).其中,对草丛型、洞穴型和折角型隐蔽物的选择性依次降低,对5,7和10 mm隐蔽物的选择性也依次降低.随着规格增大,大眼幼体和仔蟹对草丛型隐蔽物的选择性下降幅度最大,对5 mm草丛型隐蔽物的攀附率为30.92%和25.9%,对10 mm草丛型的仅为0.46%和1.4%. 综上所述,在研制或使用青蟹大眼幼体和仔蟹的隐蔽物时,材质选择主要应考虑耐腐蚀、对水质无不良影响、不易钩挂幼体和仔蟹附肢等因素. 隐蔽物的结构以草丛型为佳,当其亚结构的最小空隙接近大眼幼体或仔蟹全长时,应可达到最好的使用效果.     

拟穴青蟹视神经节孕酮受体的免疫识别

研究表明,在甲壳类中可能存在类固醇的调控系统,然而核受体在进化的过程中是否依赖配体作用一直存在着争论.应用免疫印迹和免疫组织化学方法对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)视神经节孕酮受体(PR)进行免疫识别.结果发现,拟穴青蟹视神经节中存在PR免疫阳性反应;其分子量约为70 ku,该物质广泛分布于视神经节的神经细胞核内.PR在拟穴青蟹视神经节的发现暗示着其类似于脊椎动物调节机制的存在;PR在神经细胞核中的定位表明其为核受体,很有可能在基因水平上参与拟穴青蟹视神经节的生理活动调节.     

拟穴青蟹HSP70基因的克隆与组织表达

热休克蛋白70(HSP70)是一种重要的功能蛋白.利用RACE和基因克隆等分子生物学技术,获得拟穴青蟹(Scylla paramamosain)HSP70全长cDNA序列,全长共2 189 bp,包括110 bp的5′UTR(untranslated regions)、126 bp的3′UTR和一个1 953 bp的开放阅读框(ORF).ORF可编码650个氨基酸残基,总分子质量约为71.2 ku,pI为5.38.同源蛋白的比较结果显示,拟穴青蟹HSP70序列与其他一些物种具有很高相似性,推测HSP70基因具有很高的遗传保守性,而基于HSP70氨基酸序列比对而绘制的系统树基本能够反映出各物种间的进化关系.以RT-PCR法检测雌性拟穴青蟹一些组织中的HSP70表达,结果显示各待测组织中均能扩增得到HSP70,说明HSP70在拟穴青蟹为组成型表达.其中,HSP70在卵巢中表达量最高,其次为脑神经节,推测这与HSP70作为分子伴侣的功能相关.     

拟穴青蟹GnRH-R的免疫识别

促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体(GnRH-R)对生殖具有重要的调控作用.迄今无脊椎动物GnRH及GnRH-R的研究尚少.本研究采用兔抗人GnRH-R、兔抗果蝇GnRH-R和兔抗海鞘GnRH-R的抗体,应用免疫印迹和免疫共沉淀技术对拟穴青蟹(Scyllaparamamosain)GnRH-R进行了免疫识别,所得结果如下:1)经免疫印迹检测,拟穴青蟹脑、胸神经团、视神经节和精巢中共有的免疫阳性条带分子质量为45~55 ku.脑和胸神经团中另有一条36 ku条带;在精巢中,兔抗人GnRH-R和兔抗果蝇GnRH-R抗体只有一条28 ku条带,而兔抗海鞘GnRH-R抗体显示有28,36和30 ku的条带.2)利用免疫共沉淀技术,分离出与GnRH-R抗体相结合的两种物质,分子质量分别为38.1和54.0 ku,分别与哺乳动物和非哺乳动物GnRH-R的分子质量接近.该发现提示拟穴青蟹体内存在GnRH-R,为深入了解甲壳动物生殖调控机理提供了理论依据.     

拟穴青蟹大眼幼体相残与资源可获得性和饥饿关系的研究

以不同幼体放养密度、饵料(卤虫无节幼体)密度以及饥饿时间条件下拟穴青蟹(Scylla paramamosain)大眼幼体的肢残率和死亡率为指标,探讨了资源可获得性以及饥饿对大眼幼体相残行为的影响,发现空间和食物的可获得性及48 h内的饥饿对大眼幼体相残所致的肢残和死亡率影响均不显著,3种条件下的相残死亡率在2.27%/d～4.68%/d之间.结果显示,在本实验条件下,资源可获得性和饥饿对大眼幼体的相残无显著影响,不具导致高死亡率的确定性.笔者推断大眼幼体之间的相残不一定是育苗生产活动中大眼幼体高死亡率的最直接和最主要的原因,高死亡率可能是第Ⅴ期溞状幼体和大眼幼体之间、大眼幼体和第Ⅰ期仔蟹之间的相残,或恶劣环境下大眼幼体相互抱缠的习性造成机械损伤所致.     

氨氮胁迫对拟穴青蟹腺苷三磷酸酶和磷酸酶比活力的影响

采用实验生态学的方法研究了海水中分别添加氨氮(以NH4Cl作为氨氮源)0(C0组,对照组)、10(C10组)、20(C20组)、30(C30组)、40 mg/L(C40组),胁迫24,48,72,96 h对拟穴青蟹(Scylla paramamosain)组织器官中腺苷三磷酸酶(ATPase)和磷酸酶比活力的影响.结果表明,拟穴青蟹鳃Na+-K+-ATPase比活力,C10组、C20组在胁迫24 h时随氨氮浓度升高而增大,胁迫48,72和96 h时则随氨氮浓度升高而下降(p<0.05),C30组、C40组则随胁迫时间延长一直下降;而C40组拟穴青蟹鳃Ca2+-Mg2+-ATPase比活力却随胁迫时间延长而升高.氨氮胁迫48,72和96 h,拟穴青蟹鳃和肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)比活力显著下降(p<0.05);肌肉ACP比活力则随氨氮浓度升高和胁迫时间延长而显著下降(p<0.05);鳃和肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)比活力随着氨氮浓度升高而下降(p<0.05);肌肉AKP比活力在氨氮胁迫24 h时随氨氮浓度升高而升高(p<0.05).可见,氨氮胁迫显著影响拟穴青蟹生理效应.     

铬胁迫对拟穴青蟹体内磷酸酶活性的影响

采用生态毒理学方法,研究了水体中Cr6+(0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/L)胁迫1,3,5,7,9 d后对拟穴青蟹鳃、肌肉和肝胰腺中磷酸酶活性的影响,以未添加Cr6+的自然海水组为对照组.结果表明,Cr6+胁迫1 d后拟穴青蟹鳃中酸性磷酸酶(ACP)活性显著升高(p0.05),肝胰腺、肌肉中ACP活性升高不显著(p0.05),Cr6+胁迫9 d后,2.0,4.0,8.0mg/L Cr6+浓度组拟穴青蟹肝胰腺中ACP活性显著降低(p0.05).5 d后不同Cr6+浓度组拟穴青蟹鳃中碱性磷酸酶(AKP)活性一直显著升高(p0.05),胁迫9 d后,0.5,1.0,2.0 mg/L Cr6+浓度组与对照组差异不显著(p0.05),4.0,8.0 mg/L Cr6+浓度组鳃中AKP活性仍显著高于对照组(p0.05).2.0,4.0,8.0 mg/L Cr6+浓度组肝胰腺、肌肉中AKP活性在Cr6+胁迫1 d后显著升高(p0.05).Cr6+胁迫显著影响拟穴青蟹生理生化效应.     

锯缘青蟹繁殖生物学及人工育苗和养成技术的研究

简述锯缘青蟹繁殖生物学及人工育苗和养成技术的研究结果,其中包括生殖生物学、卵巢发育过程中的神经内分泌调控、性腺发育过程中的生化组成、胚胎发育、幼体消化生理、个体发育过程中的营养需求与营养生理、能量代谢、以及人工育苗和养成技术。