共查询到18条相似文献,搜索用时 93 毫秒
1.
2.
复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提。“鸟枪法”(Shotgun)蛋白质组学研究策略通常采用蛋白酶切、二维液相色谱-串联质谱分析肽段混合物从而鉴定蛋白质,其中高效率地分离肽段混合物是关键步骤之一。本文通过pH梯度结合有机溶剂梯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行一维液相色谱分离,按等时间间隔收集馏分并将一个梯度的前段的一个馏分与后段一个馏分混合,然后进行纳升级液相色谱-质谱联用(nanoRPLC-MS/MS)分析。将该方法应用于酵母蛋白质的分离和鉴定,实验结果为: 与常规的强阳离子色谱-反相液相色谱-质谱分离鉴定方法相比,采用pH梯度结合有机相梯度的RP-HPLC-RPLC-MS分离鉴定方法多鉴定到567个酵母蛋白质(簇,含有3035个唯一肽段);其中鉴定到肽段的pI分布范围为3.42~12.01,相对分子质量范围为587.67~3499.79;蛋白质的pI分布范围为3.82~12.19,相对分子质量范围为3446.55~432905。该结果表明这种方法在复杂体系蛋白质组分离鉴定中具有明显的优势,在蛋白质组学研究中有较好的应用前景。 相似文献
3.
以铁丝为磁芯,盐酸小檗碱为目标分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂聚合成分子印迹搅拌棒,并对搅拌棒的制备条件和测定条件进行了选择。用该搅拌棒提取黄柏中的盐酸小檗碱,并用高效液相色谱法进行测定。盐酸小檗碱质量浓度在10~125 mg/L之间与峰面积A呈良好的线性关系,线性回归方程为:A=3.07×103ρ+1.27×106,相关系数r为0.9993,检出限为2.7 mg/L。加样回收率在94.5%~103.5%之间,RSD为3.3%。 相似文献
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
A model for prediding retention time of solutes undeir linear gradient elulioa conditions has been established. In this model,the theorelkal expressions under different eluflon modes were derived and tested with the retention behaviors of p-hydroxy-benzaldehyde, vanilUn, biphenyl, phenanthrene in gradient elution. With halting into account the dwell time of the instrumeatal system, the theoretically predicted retention times agreewell with those experimentally determined. 相似文献
12.
梯度洗脱 总被引:4,自引:0,他引:4
朱彭龄 《分析测试技术与仪器》2000,6(4):193-199
当前国内分析测试实验室已普遍配置高效液相色谱仪.为了充分发挥该仪器的作用,简要介绍了梯度洗脱的特点、基础理论、方法的建立、问题的排除和仪器性能测试,着重于梯度洗脱的实际运用,供色谱工作者参考. 相似文献
13.
14.
反相高效液相色谱中流动相线性梯度洗脱条件下溶质保留时间预测的新方法 总被引:4,自引:2,他引:2
在计算溶质的梯度保留时间时 ,根据流动相在色谱柱内的分布规律 ,对溶质在色谱柱内的迁移距离和流动相梯度同时进行校正 ,从而建立了一种预测溶质线性梯度洗脱条件下保留时间的新方法。该方法在不同的仪器系统中 ,对于弱保留和强保留溶质在不同线性梯度洗脱条件下保留时间的预测 ,都具有良好的准确度。以 15种氨基酸和 8种苯的同系物为例 ,该方法对于弱保留溶质保留时间的预测 ,相对平均误差分别为 3 70 %和 4 90 % ,远小于文献方法得到的结果 (2 3 6 1%和 31 16 % ) ;对于强保留溶质保留时间的预测 ,相对平均误差分别为 0 2 1%和6 0 1% ,略小于文献 。 相似文献
15.
高效液相色谱梯度洗脱中弱溶剂的在线净化 总被引:1,自引:0,他引:1
利用一个在线净化预柱减少了高压梯度洗脱中由于试剂纯度不够造成的基线噪音。预柱的位置在溶剂泵A和流动相混合器之间,由一个六通阀来控制。在线净化结果良好,有效地除去了空白梯度色谱图中的杂质峰,提高了梯度洗脱的分离重现性。该方法对开展梯度洗脱有实用价值。 相似文献
16.
17.
18.
反相高效液相色谱法测定肾复康胶囊中的野黄芩苷和芦丁 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了肾复康胶囊中野黄芩苷和芦丁的反相高效液相色谱测定方法。以甲醇-水为提取溶剂,采用超声提取法对样品进行前处理。以0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液(含1.0%(体积分数)冰醋酸)-甲醇(体积比为63∶37)为流动相,于330 nm波长下检测,肾复康提取液中野黄芩苷和芦丁可达基线分离,分析时间在20 min内。野黄芩苷和芦丁在10 ~300 mg/L内,其峰面积与浓度之间线性关系良好,目标物的加标回收率大于98%。该方法适用于肾复康胶囊及相关药材中野黄芩苷和芦丁黄酮类化合物的测定和质量控制。 相似文献