猕猴桃基因组DNA的提取及其RAPD扩增研究

采用5种不同的方法提取猕猴桃基因组DNA,并将5种方法所得DNA用于RAPD扩增,结果表明,改进的CTAB法和氯化苄法提取DNA的得率最高,分别达30.6μg/mg干样和32.7μg/mg干样,是经典CTAB法和高盐低pH法得率的3倍,SDS法得率的9倍。改进的CTAB法和氯化苄法提取的DNA扩增效果最好。DNA提取物中所存在的RNA对扩增无影响。     

向量集值优化问题的最优性条件

提出了集值映射的三种切上导数的概念,利用这些概念,给出了向量集值优化问题的弱有效解,强有效解和各种有效解的充分必要条件.     

集值映射的切导数与向量优化问题的最优性条件

利用集值映射切导数与半可微概念，给出了无约束与具约束的集值向量优化问题局部真有效解与局部强有效解的最优性条件。     

弱有效意义下向量集值优化的Kuhn-Tucker条件与对偶

借助于由广义Contingent切锥并用上图而引入有关集值映射的Contingent切导数，对约束集值优化问题的弱有效解建立了Kuhn—Tucker必要及充分性条件，由此建立了向量集值优化弱有效解的Wolfe型和Mond—Weir型对偶的弱定理、正定理及逆定理。     

海洋来源产淀粉酶放线菌的分离鉴定、诱变选育及培养条件优化

采用鉴定培养基初步筛选产淀粉酶的菌株,利用YOO改良法测定其酶活力,复筛产酶能力强的菌株作为研究对象.通过热、超声波及紫外线等多种物理诱变选育高产淀粉酶菌株;采用单因子及正交试验优化菌株产酶培养条件.通过形态鉴定、生理生化鉴定以及分子生物学手段对其16S rDNA进行测序,建立系统发育树,进行系统学分析.结果从浙江舟山沿海海泥、海藻中分离到产淀粉酶的放线菌菌株43株,其中产淀粉酶能力较高的3株.放线菌A24产淀粉酶能力经选育后有较大提高:从初始酶活力111.5 U.mL-1经紫外诱变增至282.7 U.mL-1,再经培养优化后提高到353.67 U.mL-1.经形态、生理生化鉴定及16S rDNA的系统发育学分析结果表明A24菌株为Streptomycessp.A24,GenBank登录号GU184337.     

用RAPD技术对鲶和褐首鲶遗传多样性的研究

用RAPD技术对鲶天然群体和褐首鲶养体进行了遗传多样性分析,结果表明,鲶的遗传相似度S＝0.6192,褐首鲶S＝0．9269。作为天然群体的鲶在RAPD图谱具有比作为养殖群体的褐首鲶更为丰富的DNA多态,同时也表明,长期的人工养殖导致遗传多样性的下降,自然种群个体间基因的随机交流会使遗传多样性增加。     

马氏珠母贝遗传多样性的RAPD分析

采用 OPM组 2 0个碱基随机引物对海南三亚 (SY) ,海南洋浦港 (YP) ,广西涠洲岛 (WZ)的 3个天然群体和广东雷州人工养殖群体 (L Z)的马氏珠母贝进行了 RAPD分析 .其群体内的平均遗传相似度 (similarity,S)分别是 0 .5 86 6 ,0 .6 5 14,0 .6 6 6 6 ,0 .715 8,由低到高依次为 SYYP>WZ>L Z.结果表示 :天然群体的遗传多样性大于养殖群体的遗传多样性 .     

浙江省桃花水母遗传多样性的RAPD分析

应用RAPD技术对浙江省杭州、宁波、温州和金华4个地区桃花水母群体的遗传多样性进行了分析,从80个随机引物中筛选出10个引物对4个群体28个个体的基因纽DNA进行扩增,共检测到230个位点,分子片段在200-2000bp之间,其中多态位点124个,占53．91％;群体间最大的遗传距离为0．6506,最小的遗传距离为0．2451,平均遗传距离为0．4825;各群体的多态位点比例俨）为27．78％-76．47％,平均杂合度（H）为0．0998-0．2977,shannon多样性指数（I）为0．1500-0．4390．整个群体的H,I和遗传分化指数（Gst）分别为0．2610、0．3931和0．2249．研究结果表明：桃花水母的遗传多样性较丰富,其中宁波象山和杭州玉泉群体遗传多样性水平低于整体水平,温州平阳和金华永康群体的遗传多样性水平高于整体水平,且群体内存在较大的遗传分化．     

利用RAPD标记对桃不同类群的遗传差异比较

运用RAPD(random amplified polymorphic DNA)技术对桃属中203份试材进行了研究，并对其中的砧木类、寿星桃类、碧桃类、垂枝桃类、红叶桃类、硬肉桃类、蜜桃类、水蜜桃类、蟠桃类、油桃类和黄肉桃类采用多态标记、标记频率、扩增位点变异系数、各位点的相关性的比较，结果如下：寿星桃、垂枝桃、红叶桃和碧桃为较原始类，而硬肉桃、蜜桃、水蜜桃、蟠桃、油桃和黄肉桃为较进化类，且它们相关联程度大．在遗传多样性方面，砧木类最高；红叶桃、蜜桃、蟠桃和黄肉桃次之；寿星桃、碧桃、垂枝桃、硬肉桃和水蜜桃较低．     

浙贝母4品种及5种贝母遗传多样性的RAPD分析

通过RAPD技术对浙贝母的多子、宽叶、狭叶（浙贝1号）和岭下4个品种和贝母属的浙贝母、川贝母、皖贝母、东贝母、伊贝母5个种的遗传多样性进行了分析,并对预筛选得到的9种多态性丰富的引物进行了RAPD扩增,得到了57条清晰可辨的扩增片段,其中48条多态性谱带,占总谱带数的84．21％．研究结果表明：4个品种之间,多子贝母与其他3个品种间遗传分化较大;5个贝母种之间的相似性系数为0．2105～0．8492,其中东贝母与浙贝母亲缘关系最近,伊贝母与其他贝母亲缘关系最远;筛选到的分子标记对于浙贝母不同品种和贝母不同种的鉴别具有重要的意义．     

罗氏沼虾遗传多样性的RAPD研究

采用RAPD技术,对20世纪70年代从马来西亚引进的7对罗氏沼虾后代的养殖群体(简称NY)和90年代从新加坡引进的天然群体的F1与养殖群体交配繁殖的后代(简称NX)的遗传多样性进行了研究.用OPM组随机引物对两个群体的基因组DNA进行分析的结果表明,扩增的DNA片段大小在0.1～1.5kb之间.NY群体内的平均遗传相似度(simiIarity,S)为0.8819,NX群体内的平均遗传相似度(5)为0.5857.他们的遗传变异度(variability,V)分别是0.1181和0.4143.NY群体的变异度明显小于NX群体.这可能与NY群体长时期的近亲间或在小群体内繁殖导致种群退化有关.     

普通鲫鱼的RAPD标记及其遗传多样性

采用了387个引物对普通鲫鱼进行了RAPD(random amplified polymorphic DNA)分析,筛选出了31个重复性好、可用于普通鲫鱼RAPD标记的引物．另用8个引物对普通鲫鱼(20尾)进行了遗传多样性分析：这8个引物共检出45个位点,其中多态性位点数24个,占总位点数的53．33％;据个体间共有带数和Nei′s遗传相似率计算公式,计算出普通鲫鱼平均遗传相似率为88．68％．上述两项指标的初步分析表明,普通鲫鱼具有较为丰富的遗传多样性．     

以RAPD方法分析岩原鲤分类地位

采用opaopoopq等系列44个随机引物对鲤亚科与亚科的几个种类进行随机扩增多态DNA(RAPD)扩增,通过对电泳结果进行系统分析,得出各种间遗传距离分支图.按节点的遗传距离最大数值0.232可以分出亲缘关系最远的两个群体,即由两种普通鲤为一群体,以及由岩原鲤、倒刺和白甲鱼组成的另一群体.从节点间遗传距离数值叠加计算可以得出岩原鲤与其他各种鱼类亲缘关系,遗传距离由近到远分别是:岩原鲤与倒刺(0.344)<岩原鲤与白甲鱼(0.388)<岩原鲤与普通鲤(0.443),岩原鲤与倒刺的遗传距离最小,这一结果表明岩原鲤更偏向于亚科,而不是鲤亚科.     

南美白对虾两养殖群体遗传多样性的比较分析

采用同工酶电泳技术和随机扩增DNA多态技术对浙江省养殖的普通南美白对虾（简称P群体,下同）和SPF南美白对虾子一代（简称S群体,下同）两个群体的遗传多样性进行比较分析．结果表明,编码南美白对虾肌肉7种同工酶的18个基因位点中,EST-1、EST-2、EST-3和MDH-1位点具有多态现象;P群体和S群体的多态位点比例均为22．22％,平均杂合度分别为0．0666和0．0542;两群体间的遗传相似系数为0．9968,Nei遗传距离为0．0032．而利用随机扩增多态DNA（RAPD）技术,共检测出110个RAPD位点,其中P群体的多态位点数56个,多态位点比例为50．91％,S群体的多态位点数52个,多态位点比例为47．27％;P群体和S群体内个体间平均遗传相似度分别为0．8623和0．8742;两群体间的遗传相似度为0．9815,遗传距离为0．0185．无论是同工酶电泳结果还是RAPD分析结果都表明浙江省养殖的SPF南美白对虾子一代的遗传多样性水平比普通南关白对虾要低．     

彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究

选用彩色棉优良品种(棕色)：新彩1号、新彩2号，以下胚轴和子叶作为外植体，确立了5～6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体，不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用，2，4—D是愈伤组织诱导中重要的激素，在附加有0．1mol／L2，4—D 0．1mol／LKT的MSB培养基上，诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛，有利于分化为胚性愈伤，比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应，在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中，愈伤组织诱导率均为100％，但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长，蔗糖的诱导效果次之；麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖；甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长，在胚性愈伤组织的诱导培养中，KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生，在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP—1转化过程中。外植体经农杆菌浸染10min，共培养48h较为合适，在添加头孢霉素500mg／L、卡那霉素50mg／L的培养基中筛选抗性愈伤组织。