免疫相关EST-SSRs标记筛选及其在大菱鲆异源雌核发育子代遗传分析中的应用

本研究对大菱鲆EST数据库中12 434条序列进行微卫星搜索,共搜索出831条EST-SSR序列,其中l6条为明确标注免疫相关功能的基因序列.根据此l6条EST-SSR序列设计引物,经过PCR扩增检测和反应条件的优化,最终筛选出9对扩增效果理想的EST-SSR标记对大菱鲆减数分裂雌核发育二倍体子代进行遗传变异检测,结果表明:在Scoph-2-1、Scoph-7-1、Scoph-10-1微卫星位点上大菱鲆亲本和雌核发育二倍体子代均为纯合基因型,其余6个微卫星位点(Psetta-1-1、Psetta-1-2、Psetta-3-1、Psetta-3-2、Scoph-4-1、Scoph-6-1)在大菱鲆雌核发育二倍体仔鱼群体中的观测杂合度≥0.700,期望杂合度0.460,平均期望杂合度为0.503.大菱鲆减数分裂雌核发育二倍体还显示出较高的重组率,平均重组率为89%;综合上述结果推断,9个免疫相关EST-SSRs标记可有效地用于分析大菱鲆减数分裂雌核发育二倍体子代的遗传变异;6个位点的重组率计算结果能够为今后对大菱鲆的着丝粒进行精确定位提供依据.     

紫外线照射对大黄鱼精子遗传失活和受精能力的影响

用不同剂量的紫外线照射处理大黄鱼精子,然后与正常的大黄鱼卵子受精．紫外线照射时间为1～8min,实验结果表明：紫外线照射对大黄鱼的受精率、早期胚胎成活率、孵化率和幼体畸形率均影响显著;受精率、早期胚胎成活率和孵化率随着紫外线照射时间增加而下降,1min、2min、4min、6min和8min紫外线照射下受精率和早期胚胎成活率分别为45．8％、36、6％、37．2％、29．3％、26．7％及56．1％、45、9％、40．1％、31．1％、27．1％;对照组的受精率和早期胚胎成活率分别为44．3％和55．4％,精子遗传失活的Hertwig效应不明显;幼体孵化率最高为1min组（44．9％）,最低为8min组（26．2％）;幼体畸形率随紫外线照射时间增加而增加,1min和2min处理组幼体畸形率较低,说明此时精子没有完全遗传失活;6min和8min组幼体畸形率为100％,说明该剂量紫外线可使大黄鱼精子完全遗传失活。