宁夏检验检疫中心新增检测项目149项

不久前,中国合格评定国家认可委（CNAS）组织专家,对宁夏检验检疫综合技术中心进行了“三合一”现场评审。经评定,今后,宁夏检验检疫综合技术中心新增检测项目149个,涉及食品添加剂、转基因产品、活性炭等项目,尤其是对食品中转基因成分的检测将使该中心成为全区首家具备转基因产品检测资格的检测机构。     

转基因产品分析方法的研究进展

简要介绍了转基因产品的发展历程、优缺点以及对转基因产品进行检测分析的迫切性,着重综述了近期基于DNA、蛋白质、生物传感器以及联用技术检测转基因产品的分析方法,最后对转基因产品的分析方法进行了展望.     

转基因作物检测新技术研究进展

随着生物技术的发展,转基因作物的种植面积显著增加,公众对转基因产品的安全性也更加关注。因此,加强对转基因作物及其产品的检测尤为重要。现有的常规转基因检测方法已不能满足快速、灵敏、高通量及准确定量的要求。本文就转基因检测技术的研究进展进行了综述,重点介绍了蛋白质组学技术、生物分子互作技术及近红外光谱分析技术等新技术在转基因检测中的应用前景。     

转基因农产品快速测试盒面世

自实施转基因农产品标识制度以来,我国第一次拥有自己的转基因农产品快速检测技术:用一个试剂盒,在50min内就可知道送检农产品内是否含有转基因成分。 上海市农业科学研究院不久前宣布,其属下生物技术中心的一个课题组经过两年研究,成功研制出转基因农产品检     

Taqman-MGB实时荧光PCR定量检测转基因玉米MON863

运用实时荧光聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米MON863进行品种特异性检测和定量分析。通过设计玉米内源基因和外源基因边界序列特异性引物和Taqman-MGB探针,验证了内源基因的物种特异性和外源基因边界序列的品种特异性。利用已知转基因百分含量的MON863玉米作为标准品,进行荧光定量反应,建立定量标准曲线,通过标准曲线对玉米样品MON863玉米成份进行含量分析。结果表明,该方法重复性好,检测特异性强,最低检测限浓度达到0.001 ng/μL,即14个拷贝。由于使用实时荧光PCR技术,检测周期短,操作简便,可广泛运用于转基因玉米MON863的进出口检测和转基因产品的含量分析。     

转基因玉米的多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法研究

采用三重PCR反应, 同时扩增CaMV 35S启动子、 hsp70 intron1和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因, 扩增产物用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光检测, 从而建立了多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法. 对影响多重PCR扩增和毛细管电泳的因素进行了优化. 在优化的条件下, 本方法可以同时检测转基因玉米样品中3种外源基因. 经序列测试证实, 三重PCR 扩增产物的序列与原基因完全一致, 表明扩增结果可靠. 该方法能检出0.05% MON810转基因玉米成分, 远低于欧盟对转基因食品规定标识的质量分数阈值(1％). 该方法对玉米及其制品的检测结果与实时荧光PCR方法的检测结果一致, 与传统的琼脂糖凝胶电泳法相比, 具有特异性高\, 快速及灵敏等优点, 适用于玉米中转基因成分以及转基因玉米MON810品系的快速筛选、 鉴定和检测, 能满足我国实施转基因食品标签法规的要求.     

由卫星互补DNA单体和双体基因构建的抗黄瓜花叶病毒的转基因番茄

本研究是用卫星cDNA单体和双体基因获得抗黄瓜花叶病毒的转基因番茄。将单体和双体基因组建植物基因载体ROK2,通过三菌结合把基因引入根癌脓杆菌并感染转化番茄获得再生转基因植株。接种攻毒试验表明,卫星cDNA转基因番茄能够干扰病毒的复制,减轻症状程度表现出对CMV的显著抗病性,经过三代检测选育也获得单株纯化的转基因植物株系。初步的田间实验证明,转基因植株在自然条件下,也表现出对CMV的抗病性,表现了良好的生产潜力,为解决我国番茄等作物的病毒病开辟了新的途径。     

广东建成转基因食品及食品毒害物质检验站

不久前,广东省转基因食品及食品毒害物质检验站在广东省质检中心顺德基地顺利建成。该站设有食品应急检测技术研究室,具备我国28大类QS市场准入食品的项目检测能力,将重点对食品及相关产品的有效成分、毒害物质、食品真实属性表征与识别进行检测和技术研究。     

转基因食品及其安全性评价

简述转基因食品的发展历史、现状及相关的法律政策,提及了转基因食品可能存在的安全性隐患,同时综述了目前有关转基因食品安全性评价的研究方法及策略。     

龙葵Atrazine抗性基因向大豆叶绿体的转移及在转基因植株中的表达

本文将龙葵Atrazine抗性psbA基因采用合子期子房微注射法,导入对Atrazine敏感的大豆叶绿体基因组中,经直接用Atrazine涂抹叶片及叶片在较强光诱导下荧光动力学研究和间接分子杂交试验等检测方法鉴定,表明本项研究首次获得了转基因大豆植株。     

ApoCⅢ转基因小型猪的分子水平鉴定

分析鉴定ApoCⅢ转基因阳性小型猪.从仔猪尾中提取基因组DNA,通过PCR和Southern blotting等手段进行鉴定;从仔猪肝、小肠、心、肾、肺、脾、胃以及皮肤等冰冻组织以Trizol法提取RNA,以RT-PCR手段进行检测分析.经过对18头仔猪进行PCR分析,显示其中的15头含有人ApoCⅢ基因,随后的测序和Southern blotting亦证实,猪的基因组中已经整合有人ApoCⅢ基因.RT-PCR证实人apoCⅢ基因已经在转基因小型猪的肝脏和小肠中进行了翻译.本研究成功制备了人ApoCⅢ转基因小型猪,可作为高脂血症与动脉粥样硬化疾病之间关系很有价值的研究模型.     

转基因作物pat蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测方法研究

将克隆到的pat基因构建原核表达载体pET30(+)-pat并在大肠杆菌中进行表达,分离纯化得到高纯度pat蛋白。用所得到的pat蛋白制备了兔多克隆抗体和鼠单抗2F6。多抗效价>8000,单抗效价为5×104;单抗为IgG1类,轻链为κ型。基于抗pat蛋白单克隆抗体和兔多克隆抗体建立了双抗夹心酶联免疫分析方法(Sandwich ELISA)。检测范围为1.6~100μg/L,线性回归方程y=0.6914x-2.572,决定系数为0.9951。用所建立的方法测定了5个转基因抗虫棉和2个非转基因棉花品种叶片中pat蛋白的含量,其中转基因抗虫棉中的3个品种检测出pat蛋白,其余均未检出pat蛋白。     

铂纳米颗粒修饰电化学DNA传感器检测大豆中转基因成分

用电沉积方法将铂纳米颗粒修饰在玻碳电极表面,然后将花椰菜花叶病毒35S启动子ssDNA片段直接吸附在铂纳米颗粒上,制成特异的电化学DNA传感器。用扫描电子显微镜和循环伏安法对修饰铂纳米颗粒电极进行了表征。ssDNA探针与互补目的ssDNA杂交,以[Co(phen)3]3 (phen=1,10-Phe-nanthroline)为杂交指示剂,用方波伏安法进行检测,表现出良好的响应信号。与在裸玻碳电极上修饰的探针相比,测定目的基因的灵敏度显著提高。传感器对互补目的ssDNA检测的线性范围为2.14×10-9～2.14×10-7mol/L;检出限为1.0×10-9mol/L,与3个碱基错配的DNA序列杂交,观察不到明显的杂交信号。样品DNA经HindⅢ非限制性内切酶酶切后测定,杂交检测信号增大。用传感器检测含量不同的转基因大豆DNA和非转基因大豆DNA的混合溶液,杂交前后的电流差与转基因DNA的含量呈良好线性关系。连续5次测量含有100%转基因大豆DNA杂交后的电信号,相对标准偏差为5.89%,固定探针的电极再生后可重复使用8次。     

英皇家学会称转基因农作物对环境无危害且可安全食用北大核心CSCD

据《泰晤士报》近期报道,皇家学会出版的宣传册指出,与传统农作物相比,转基因农作物不会对环境造成危害,食用转基因农作物是安全的。在1周之内,皇家学会成为全球第2家摈弃转基因食品可能带来人类健康风险担忧的主要科学机构。     

从对转基因的认识谈高中学生科学素养的培养

高中化学和生物教材有多处介绍核酸、基因、转基因的知识,但通过问卷调查发现：高中学生对基因、转基因技术和转基因食品的认识模糊不清。究其原因可能是由于教学的功利性,仅关注本学科的高考,不注意学科间知识的融会贯通,不重视学科前沿知识和社会热点问题的拓展。高中化学课程中应重视“核酸”等生命化学相关内容的教学,拓展学生对转基因技术的科学认识,引导学生运用所学知识和科学方法去分析、判断转基因食品的安全性问题,着眼于培养学生的科学素养。     

电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定转基因大豆中的无机元素

本文研究建立了用电感耦合等离子体质谱法测定转基因大豆中无机元素含量的方法,实验结果表明,转基因大豆中Ca、Na、K、Mg、Zn、Fe的含量比较丰富。方法灵敏可靠,测量相对标准偏差(RSD,n＝6)均小于3％,方法的回收率在99%~104%,实现结果为探讨转基因大豆对人体的营养保健作用提供了参考数据。     

基于自动磁珠转运的转基因蛋白Cry1Ab检测

基于自动磁珠转运,建立了转基因蛋白Cry1Ab免疫检测的新方法.利用水热法制备了粒径约400 nm的纳米磁球,并进行电镜表征,通过溶胶法对磁球表面进行氨基修饰,采用戊二醛偶联对磁珠实现抗体包被,在核酸提取仪中进行酶联免疫反应,采用分光光度法进行检测.本方法对转基因蛋白Cry1Ab的检出限低于1 μg/L,与商品化酶联免...     

带红系增强子的人βE-珠蛋白基因在转基因小鼠中的表达

本文以我国人中常见的异常血红蛋白E(HbE,β26Glu→Lys,G→A)的β珠蛋白基因为外源基因,用显微注射法制备了人βE-基因的转基因小鼠系。得到的一只整合有16拷贝5′HS2βE重组体的转基因小鼠具有典型的转基因小鼠特征。证实人βE-基因在转基因鼠中的高水平表达需有红系特异性增强子(5′HS2)的存在;说明5′HS2结构对异常珠蛋白基因(βE-)在转基因鼠中的表达也具有明显的增强作用。单一位点整合过多5′HS2βE拷贝平均表达水平(12.1％)明显低于较少拷贝整合的平均表达水平(79.7％),对其发生机制进行了讨论。βE-珠蛋白肽链在转基因鼠中可形成新的血红蛋白四聚体。     

以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆为DNA探针固定平台电化学测定转基因玉米中特定基因序列

草胺膦乙酰转移酶基因(PAT)是一种转基因植物的外源DNA片段。 本文以还原氧化石墨烯和纳米二氧化锆(nanoZrO₂)的复合物作为固定DNA探针的平台,建立了一种灵敏地检测PAT基因的方法。 首先,氧化石墨烯直接在电极表面进行电化学还原,然后将一层nanoZrO₂涂覆于其表面,利用DNA中的磷酸基团与nanoZrO₂中氧的亲和作用固定DNA探针。 通过微分脉冲伏安法检测DNA探针与PAT基因片段的杂交,构建了用于检测PAT基因片段的电化学生物传感器。 该传感器具有稳定性好,重复性好的特点,可灵敏地检测转基因玉米中的PAT基因,检测限达2.0×10^-15 mol/L。     

石墨炉原子吸收光谱法测定转基因棉籽中的铅镉铜铬

本文探讨了干法灰化与湿法消解-石墨炉原子吸收光谱法测定转基因与非转基因棉籽中重金属元素铅、镉、铜和铬的方法,比较了两种预处理方法对测定结果的影响.结果表明:两种方法均能满足分析测定的需要.将分析方法应用于转基因与非转基因棉籽中四种重金属含量的测定,结果显示,转基因棉籽中铅和铜的含量明显低于非转基因棉籽,镉和铬的含量与非转基因棉籽相当.