尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼性腺的RAPD分析

奥利亚罗非鱼（Ｔ．ａｕｒｅａ）和尼罗罗非鱼（Ｔ．ｎｉｌｏｔｉｃａ）属于鲈形目（Ｐｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ）鲡鱼科（Ｃｉｃｈｉｄａｅ）罗非鱼属（Ｔｉｌａｐｉａ）内的两种鱼类［１］,它们繁殖周期短,生长速度快,抗逆性能强,是热带和亚热带地区重要的淡水经济鱼种,在淡水养殖业中占有重要的地位．但是由于罗非鱼种类繁多,种间杂交容易发生,致使罗非鱼养殖群体之间,或者野生种群和养殖种群之间多有程度不同的混杂,因而出现诸如群体种系不纯,优良经济性状衰减退化（性成熟提早,生长缓慢,个体趋小）等不良后果,直接影响了养殖…     

尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)性腺发育过程的研究

本文研究尼罗罗非鱼性腺发育从孵出至精卵成熟,经过五期(Ⅰ—Ⅴ)。在水温27—30℃下需时110余日始排卵、排精。排卵、排精后的卵巢和精巢为Ⅲ期。卵巢内含空滤泡、2时相和3时相的卵母细胞。     

尼罗罗非鱼IgT重链的蛋白表达及表达分析

IgT（Immunoglobulin T）作为新型免疫球蛋白在粘膜免疫中具有重要作用. 文中根据尼罗罗非鱼IgT基因序列构建原核表达载体获得IgT重组蛋白,相对分子量约75 kDa,并制备出效价较高的小鼠抗罗非鱼IgT的多克隆抗体. 荧光定量PCR检测证明：健康尼罗罗非鱼中IgT在多种组织中都有表达,其中脾脏、皮肤、肠和鳃中表达量相对较高. 无乳链球菌感染后,皮肤和头肾中IgT mRNA的相对表达量分别在12 h和4 d显著上调. 免疫组化结果显示：IgT蛋白在头肾和皮肤中均有少量分布,在无乳链球菌刺激后,在皮肤中出现大量分布. 以上结果表明:IgT在尼罗罗非鱼皮肤粘膜免疫中具有重要作用.     

尼罗罗非鱼Hepcidin基因结构与序列分析

Hepcidins是一类具有调节铁代谢功能的抗菌肽.利用RT-PCR、RACE和LA等技术,以尼罗罗非鱼[Oreochro-mis niloticus(Linnaens)]肝脏中分离和克隆到Hepcidin基因.其全长cDNA为505 bp(不包括polyA),5′端非翻译区有85 bp,3′非编码区为156 bp,阅读框为264 bp.其编码的氨基酸包括信号肽和前体肽等,前体肽进一步酶解产生22个氨基酸的活性肽,该活性肽具有Hepcidin基因家族特有8个半胱氨酸的保守序列.罗非鱼的Hepcidin基因结构包含3个外显子和2个内含子.本研究为今后阐明Hepcidin基因表达特性、表达产物理化性质、抗菌活性及其相关功能等奠定基础.     

尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体IA基因克隆与多态分析

采用touchdownPCR和RACE技术,获得了两条尼罗罗非鱼MHCIA基因3’端的新序列,其长度均为957bp,分别命名为orni—DAA$0101和orni—DAA 0102,其分别编码了两种新发现的等位基因亚型。两条新序列均包含666bp的CDS区和291bp的3’-UTR区,CDS区包含了部分多肽结合区、全部的IGC区以及跨膜区和胞质区同源性比对显示,cDNA序列分别在388bp和426bp处发生了碱基转换,而其编码的氨基酸序列在第130位点存在谷氨酸与赖氨酸的差异．首次发现相对保守的IGC区也存在变异．研究结果对于揭示尼罗罗非鱼MHCIA基因的多态性及其与高抗病性的相关性有重要价值。     

尼罗罗非鱼Oreochromis niloticus (Linn)肠的形态学和组织学研究

尼罗罗非鱼肠甚长,回旋十分复杂,可分为十二指肠、前肠、后肠和直肠,这4部分的组织结构均由粘膜,肌层和浆膜组成.粘膜肌层缺如,使固有膜与粘膜下层不分.肌层由内环和外纵肌层组成,薄的浆膜覆于肌层.     

温度调控诱导尼罗罗非鱼仔鱼雄性化的研究

  罗非鱼Oreochromis spp.是我国重要的水产养殖品种。我国是世界最大的罗非鱼生产国和出口国。但罗非鱼性成熟早、繁殖过度,致使商品鱼品质偏低、资源浪费严重,解决途径为采用单雄性养殖。本文进行了温度调控诱导尼罗罗非鱼仔鱼雄性化的研究。较之前常采用的雄激素投喂方式更环保、安全、高效。控温处理开始时期为出膜后第7天（DPH, Days Post Hactching）,进行正交试验：设置3个温度20、28、36 ℃（±0.5 ℃）,3个控温时段7-14 DPH、7-21 DPH、7-28 DPH。主要结果如下：处理组合（温度+控温时段）为36 ℃+7-14 DPH、36 ℃+7-21 DPH、36 ℃+7-28 DPH时雄性率较对照组显著增高、与其它各组有显著差异（P<0.05）,分别高达93.85%、96.00%和96.92%,这3组间无显著差异（P>0.05）。为了解控温对仔鱼的影响,还同步研究了相应的增质量率和存活率。由控温时段结束至60 DPH的绝对增质量率来看：处理组合36 ℃+7-14 DPH、28 ℃+7-14 DPH与对照组无显著差异（P>0.05）;从存活率来看：只有处理组合20 ℃+7-21 DPH、20 ℃+7-28 DPH与对照组有显著差异（P<0.05）。综合来看,最佳处理组合为36 ℃+7-14 DPH,平均雄性率 93.85%、最高达96.96%,且高温（36 ℃）处理后生长和存活不受影响。     

尼罗罗非鱼对汞富集的研究

本文以尼罗罗非鱼（Ｔ·ｎｉｌｏｔｃａＬ）为材料，应用冷原子吸收测汞法，进行了汞（Ｈｇ＋＋）在鱼体内的积累的实验性研究；还对鱼体不同部位汞的蓄积量作了比较；此外，对鱼体汞中毒的死亡过程作了观察。     

尼罗罗非鱼〔Oreochromis nitoticuscus(Linn)〕胃的形态学和组织学的研究

尼罗罗非鱼的胃分为贲门部、盲囊和幽门部。这三部分的组织结构均由粘膜、粘膜下层肌层和浆膜组成。     

饥饿对尼罗罗非鱼幼鱼粗化学成分的影响 (动物科学)

为讨论尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)幼鱼的鱼体化学成分和能量密度随饥饿时间延长的变化规律,2010年1月采集初始体质量为(3.61±0.13)g的尼罗罗非鱼幼鱼40尾,以饥饿处理0 d为对照,将饥饿处理8、15、22和45 d分为4个组,分别测定所有材料的鱼体化学成分,估算了能量密度。结果表明,随饥饿时间(t)天数的延长,尼罗罗非鱼幼鱼的蛋白质含量(PRO)、脂肪含量(FAT)和能量密度(E)降低,可以分别描述为方程PRO=14.727e-0.006 5 t(r2=0.707,n=37,p<0.05)、FAT=2.295 5e-0.036 6 t(r2=0.552,n=37,p<0.05)和E=4.478 1e-0.011 3 t(r2=0.694,n=37,p<0.05);随饥饿时间(t)天数的延长,含水量(WAT)和灰分含量(ASH)升高,可以分别描述为方程WAT=76.1969 e0.001 3 t(r2=0.566,n=37,p<0.05)和ASH=4.467 8 e0.008 3 t(r2=0.729,n=37,p<0.01);PRO、FAT和E均分别与WAT呈显著的负线性关系,可以分别描述为方程PRO=61.969 9-0.625 1WAT(r2=0.740,n=37,p<0.05)、FAT=47.908 8-0.593 8 WAT(r2=0.899,n=37,p<0.05)和E=33.548 9-0.382 1 WAT(r2=0.955,n=37,p<0.05)。研究认为该种鱼在饥饿初期大量消耗脂肪,并随着饥饿时间的延长,净耗量逐渐减少,同时在整个饥饿过程消耗蛋白质。     

茶渣蛋白提取物对吉富罗非鱼生长性能和生化指标的影响

为评价茶渣蛋白提取物(tea residue protein extract, TRPE)作为新型植物源蛋白在水产饲料中的可应用性,以TRPE替代基础饲料中的鱼粉或豆粕,分析其对吉富罗非鱼的生长性能、代谢状态和非特异性免疫的影响.研究结果表明：当TRPE替代的鱼粉质量分数为15%时,吉富罗非鱼可正常生长;当TRPE替代的鱼粉质量分数超过30%时,吉富罗非鱼的生长性能下降20%以上,转氨酶活力升高10%以上,溶菌酶活力提升约2倍;当TRPE替代的豆粕质量分数为50%时,吉富罗非鱼生长性能和生化指标均无明显变化,但其溶菌酶活力提升约1.5倍. TRPE可提升鱼体的非特异性免疫能力,但过量取代鱼粉会导致基础饲料中必需氨基酸水平下降,对鱼体生长不利;TRPE可取代基础饲料中50%的豆粕,且能保证鱼体在正常生长代谢下免疫能力增强.     

尼罗罗非鱼IgM单抗的制备及IgM+B淋巴细胞吞噬能力的研究

采用免疫亲和层析方法纯化尼罗罗非鱼抗TNP特异性IgM,并以此为抗原免疫Babl/c小鼠进行单克隆抗体制备. 免疫的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合成杂交瘤细胞,利用酶联免疫吸附法、蛋白质印迹法(Western blot)和流式细胞术筛选获得两株抗IgM重链的单克隆抗体,分别命名为3B3和9D12. 纯化后的单克隆抗体3B3和9D12在1 mg/mL浓度下其抗体效价分别为740,741和359,712 units/mL. 利用制备的单抗结合激光共聚焦显微镜检测发现,膜结合型IgM位于B细胞膜表面(IgM+ B细胞). 流式细胞术检测尼罗罗非鱼IgM+ B细胞的免疫组织分布,发现IgM+ B细胞分布存在组织差异性,其中在外周血(PBL)所占比例最大,约为37.6%,其次是脾脏(SPL),占百分比33.7%,头肾(AK)占比例约为23.9%,而后肾(PK)占比例约为20%. IgM+ B细胞荧光微球的吞噬能力分析发现,IgM+ B细胞对0.5 m的荧光微球吞噬能力强于1 m. 另外,IgM+ B细胞的吞噬能力存在免疫组织差异性,其中对于0.5 m荧光微球的吞噬,PBL明显高于其他组织,而AK IgM+ B细胞对1 m荧光微球的吞噬能力最强. 以上结果表明,本研究成功制备了鼠抗尼罗罗非鱼IgM单抗工具,并利用其IgM单抗发现IgM+ B细胞具有吞噬能力且其吞噬能力存在组织差异性,表明IgM+ B细胞在先天性免疫中可能发挥重要作用.     

雌雄构树过氧化物同工酶的比较研究

通过对成林及未知性别的幼株过氧化物同工酶谱的分析表明，酶谱从阴极到阳极均可分为３个区．成株雌雄株间的性别差异明显而稳定地反映在Ｂ区和Ｃ区；未知性别的幼株分为Ｃ区具有谱带和不具谱带两种酶谱类型，且与成株的酶谱有密切的相关性．可以认为，过氧化物同工酶可以作为构树早期性别鉴定的指标，用于幼株的早期性别鉴定．酶活性在性别间也有不同，表现为雌株高于雄株，与酶带数量及强度基本一致．     

Shewanella haliotis BP-1海藻酸裂解酶基因的克隆表达

【目的】了解海洋细菌Shewanella haliotis BP-1中海藻酸裂解酶降解海藻酸钠的生物活性。【方法】应用基因克隆和大肠杆菌异源表达技术,过量表达海藻酸裂解酶,将粗酶液通过DEAE Sepharose FF柱分离纯化后检测其酶活性。【结果】从S.haliotis BP-1菌株的基因组DNA中克隆得到一个大小为2 157bp的海藻酸裂解酶基因Alg17S,该基因编码的海藻酸裂解酶Alg17S属于PL17家族的蛋白,大小为79 726Da,其中包括N端26个氨基酸的信号肽,与Saccharophagus degradans 2-40菌株产生的海藻酸裂解酶Alg17C具有高度同源性,相似性为52%。经纯化后获得的重组酶Alg17S和△snAlg17S(N端不含26个氨基酸的信号肽)均具有降解海藻酸钠的活性,但△snAlg17S对海藻酸钠的催化活性比Alg17S高,其酶比活力高达9 635U/mg。【结论】重组海藻酸裂解酶△snAlg17S兼具高表达水平及高酶活性,是进一步研究海藻酸盐糖化和生物燃料生产的潜在的优势酶。     

Identification of a novel tillering dwarf mutant and fine mapping of the TDDL（T） gene in rice （Oryza sativa L.）

Rice plant architecture is an important agronomic trait that affects the grain yield. To understand the molecular mechanism that controls plant architecture, a tillering dwarf mutant with darker-green leaves derived from an indica cultivar IR64 treated with EMS is characterized. The mutant, designated as tddl（t）, is nonallelic to the known tiilering dwarf mutants. It is controlled by one recessive nuclear gene, TDDL（T）, and grouped into the dn-type dwarfism according to Takeda＇s definition. The dwarfism of the mutant is independent of gibberellic acid based on the analyses of two GA-mediated processes. The independence of brassinosteroid （BR） and naphthal-3-acetic acid （NAA） of the tddl（t） mutant, together with the decreased size of parenchyma cells in the vascular bundle, indicates that the TDDL（7） gene might participate in another hormone pathway. TDDL（T） is fine mapped within an 85.51 kb region on the long arm of rice chromosome 4, where 20 ORFs are predicted by RiceGAAS （http：//ricegaas.dna.affrc. go.jp/rgadb/）. Further cloning of TDDL（T） will benefit both marker assisted selection （MAS） of plant architecture and dissection of the molecular mechanism underlying tillering dwarf in rice.     

Repetitive DNA sequences from the X chromosome of the spiny eel (Mastacembelus aculeatus)

To investigate the characters of repetitive DNA sequence in the sex chromosomes of the spiny eel (Mastacembelus aculeatus), the X chromosomal library was screened and a family of repetitive sequence, consisting of Ma 1-Ma 6, was isolated. The fluorescence in situ hybridization (FISH) result confirmed that Ma 1 - Ma 5 dispersed over sex chromosomes and all autosomes, whereas, Ma 6 is sex chromosome-specific and distributed only on the C-band positive regions of X chromosome, and Ma 6 maybe the main components of the heterochromatic regions of X chromosome. This study provides additional information about the evolution of sex chromosomes in lower vertebrates such as fish.      

松材线虫性别决定基因Bx-sex-1表达特征和生物学功能分析

【目的】揭示松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)性别决定基因Bx-sex-1的表达特征和生物学功能。【方法】通过Mega 6中的Jones-Taylor-Thornton (JTT)模型,采用邻接法(neighbor joining,NJ)对Bx-sex-1和其他线虫的氨基酸序列进行系统发育构建。采用同步培养的方法分别收集不同龄期的松材线虫并提取总RNA,反转录获得cDNA并采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 的方法,研究Bx-sex-1在松材线虫不同发育阶段的相对表达量。同时采用qRT-PCR并通过绝对定量法分析Bx-sex-1基因在雌虫和雄虫基因组的拷贝数。采用dsRNA浸泡法对目的基因进行干扰,观察松材线虫后代卵的孵化率和雌雄比的变化。【结果】系统进化树显示松材线虫Bx-sex-1和其他两个植物寄生线虫成为一支,与自由生线虫和寄生动物线虫分别进化为不同的分支。松材线虫Bx-sex-1在不同发育阶段相对表达量有差异,在卵期相对表达量最高,而在2龄幼虫时期最低,从2龄幼虫时期到成虫时期相对表达量逐渐升高。qRT-PCR结果显示Bx-sex-1基因在雌虫和雄虫基因组中均为单拷贝。Bx-sex-1被干扰后,卵的孵化率下降,雌雄比降低。【结论】松材线虫Bx-sex-1基因在卵的发育过程和性别决定中可能具有重要作用。     

短背台蚱雌性的首次发现

记述了首次发现的短背台蚱ＦｏｒｍｏｓａｔｅｔｔｉｘｂｒａｃｈｙｎｏｔｕｓＺｈｅｎｇ雌性．短背台蚱雄性，郑哲民已于１９９２年发表．