双歧杆菌添加剂的用效果观察及保存实验

双歧杆菌添加剂具有改善胃功能，促进消化的作用，其保存的较佳条件为不添加剂含水２％以下，４℃，厌氧在２５℃，干燥条件保存，双歧杆菌添加主     

微生态制剂中双歧杆菌的选择性检测

综述了微生态制剂中双歧杆菌选择性检测的方法及基本原理,并对各种检测方法的特点进行了评述。     

不同培养方式对双歧杆菌进行选择性检出

通过对微生态制剂中几种常见菌在不同培养条件下计数结果的分析，提出了一种简易的双歧杆菌检测的方法，即利用不同培养方式对双歧杆菌进行选择性检出。     

双歧酸奶的保健机理及生产工艺

从微生态学及临床医学的角度综合论述了双歧酸奶对人体保健功能的机理，并对双歧酸奶生产工艺中诸如双歧因子的选择等几个关键问题进行了探讨。     

饲料中添加复合芽孢杆菌对三疣梭子蟹生长性能和消化酶活性的影响

通过室内和室外养殖试验,探讨饲料中添加复合芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌)对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus Miers)生长性能、消化酶活性及养殖效益的影响.试验结果表明:添加1‰(T1)和21‰(T2)的复合芽孢杆菌饲料组幼蟹的蜕壳率、成活率和增重率均高于对照组(T0);摄食率随着芽孢杆菌浓度上升而呈现下降趋势;T1和T2组分别降低幼蟹饲料系数为15.38%和18.80%.芽孢杆菌添加显著影响胃、胰蛋白酶以及肝胰腺脂肪酶活性,但淀粉酶活性没有明显变化.室外池塘养殖结果表明:商品饲料中添加2‰复合芽孢杆菌的饲料组(D2)平均产量最高,比只投喂商品饲料组(D1)增产14.4%;D2组起捕时蟹平均壳宽比D1组大3.4%.饲料系数方面,D1组和D2组差异不大.认为三疣梭子蟹养殖饲料中添加2‰的芽孢杆菌具有较好的效果.     

苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定及高毒力菌株的筛选

从湖北、湖南等省的土壤中分离得到14株苏云金芽胞杆菌菌株.血清型分析表明,苏云金芽胞杆菌分离株分别属于30个血清型中的3个血清型,另有两个与所用标准菌株的抗血清无凝集反应的菌株.观察和测定了苏云金芽胞杆菌分离株的形态和毒力,并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析了菌株的晶体蛋白成分,筛选到2株高效杀鳞翅目害虫的苏云金芽胞杆菌;并用特异性引物PCR检测了这些菌株的杀虫基因.     

副猪嗜血杆菌的MLST分析及数据库建立

对副猪嗜血杆菌86个分离株的7个看家基因,包括ATP合成酶β链(atpD)、翻译起始因子IF-2(in-fB)、核糖体蛋白β亚基(rpoB)、苹果酸脱氢酶(mdh)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(6pgd)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(g3pd)和延胡索酸还原酶B(frdB)进行了PCR扩增;对扩增产物进行了测序;对序列编辑、队列     

海洋紫色杆菌β-琼胶酶的分离纯化及性质

从青岛近海海水中分离得到一株高产琼胶酶的海洋紫色杆菌SY12.紫色杆菌SY12的发酵液上清经硫酸铵沉淀,凝胶过滤层析,离子交换层析和凝胶过滤层析等蛋白纯化步骤,得到纯化的野生琼胶酶AgaY.琼胶酶纯化了133.63倍,酶比活力为320.7 U/mg;纯化的琼胶酶经SDS-PAGE检测,显示为单一条带,其相对分子质量约为50 ×103.研究结果表明琼胶酶AgaY降解琼脂糖的β-1,4-糖苷键,其主要产物为新琼四糖和新琼二糖.对AgaY进行酶学性质研究,发现其最适反应pH为7.0,最适反应温度为40 ℃;Hg2 ,Ag ,Zn2 ,Cu2 和Pb2 等金属离子可以显著的抑制琼胶酶AgaY的活力.研究发现,AgaY的催化活性不依赖于离子的存在,AgaY对EDTA不敏感.     

鸡源凝结芽孢杆菌的筛选鉴定及益生性能评价

凝结芽孢杆菌作为产芽孢的乳酸菌,其抗逆性和益生作用备受关注。为获得优良凝结芽孢杆菌菌种,本研究通过热处理从芦花鸡粪便中分离鉴定出22株潜在优良的凝结芽孢杆菌,并对其抗逆性及益生性能进行评价,结果表明：在高温(90℃)、酸(pH=2.0)和胆盐(0.5%)条件下,菌株NCUBCG003、NCUBCG004和NCUBCG014存活率达85.0%以上。通过主成分分析法可知,这三株凝结芽孢杆菌在高温和胃肠道环境下的综合耐受性强于其他凝结芽孢杆菌;其次,菌株NCUBCG003、NCUBCG004和NCUBCG014有较高的乳酸产量和胆固醇降解能力,乳酸产量达5.0 g·L-1以上,胆固醇去除率可达50.0%;最后,凝结芽孢杆菌有一定的抗氧化活力,特别是菌株NCUBCG003的羟自由基清除能力可达64.03 U·mL-1,DPPH自由基清除率可达76.57%,而菌株NCUBCG014总抗氧化能力最突出,相当于3.52mM的FeSO4溶液。综上可知,菌株NCUBCG003、NCUBCG004、NCUBCG014综合益生性能强于其他凝结芽孢杆菌,且安全可靠,具备在人和动物体内发挥益生作用的潜力,可作为优良微生物菌种资源,为凝结芽孢杆菌的工业化生产和应用奠定基础。     

一株海杆菌的溶藻活性及基于基因组的溶藻机理分析

为了解新型海杆菌Marinobacter)菌株YWL01溶藻活性及其可能的溶藻机理YWL01与常见的赤潮藻中肋骨条藻Skeletonema costatum)混合培养, 通过肉眼、光电镜观察及藻叶绿素a浓度测定来评估溶藻活性采用Illumina Miseq测序技术测定YWL01基因组将预测基因的蛋白序列分别进行BLASTP比对注释信息分析其可能的溶藻机理结果表明YWL01可直接溶藻藻液颜色由黄褐色逐渐变淡藻细胞裂解藻叶绿素a浓度明显降 低YWL01基因组中许多与溶藻相关的基因     

根癌农杆菌的高效电激转化

利用电激法将双元载体质粒ＰＢＩ１２１导入根癌农杆菌ＡＧＬ－１并获得较高转化效率．探讨了不同电激条件对转化效率的影响，并检测了ＣａＭＶ３５Ｓ启动子启动ＧＵＳ基因在根癌农杆菌中的表达．结果表明：根癌农杆菌电激转化的最适电激条件为１１ｋＶ／ｃｍ，２１．５μＦ，电场强度是影响转化效率的关键因素．当质粒ＤＮＡ浓度从０．２ｍｇ／Ｌ增加至０．６ｍｇ／Ｌ时，转化效率呈线性增加．细菌密度对转化效率也有一定影响．最高转化效率为每μｇ质粒ＤＮＡ１．７×１０５转化子．组织化学反应证实ＣａＭＶ３５Ｓ能启动ＧＵＳ基因在根癌农杆菌中表达．     

盐生盐杆菌灭活原生质体融合的研究

通过双亲灭活方法将二株具不同遗传学特性的盐生盐杆菌Ｊ７（含质粒，不产紫膜）和Ｒ１（产紫膜，不含质粒）进行原生质体融合试验．结果表明，在以３０％ＰＥＧ６００为助融剂，加２５ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＥＤＴＡ条件下，４０℃保温１ｍｉｎ，获得融合率为０．７６×１０－５的融合子．这些融合子具有双亲菌株的某些特征，其中２２％的融合子既含有质粒又产紫膜，这些融合子对于进一步研究质粒与紫膜的关系，以及筛选高产紫膜的优良菌株，均有十分重要的价值．     

嗜碱芽孢杆菌NTT89启动子的克隆及其表达

报导了以启动子探测质粒pKK232-8为载体克隆嗜碱芽孢杆菌NTT89启动子的研究.用限制性内切酶Hindl分别消化嗜碱芽孢杆菌NTT89染色体DNA和质粒pKK232-8,在体外重组,转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,在含氨苄青霉素和氯霉素的选择性平板上筛选转化子,结果从NTT89染色体DNA中克隆到一系列带有启动子活性的DNA片段,并在大肠杆菌中得到表达,这些转化子抗氯霉素水平在34～500mg/L不等,随机挑选10个转化子,提取其重组质粒进行限制性酶切,表明转化子中的重组质粒外源片段插入的效率很高,插入片段大小在500～5500bp之间,通过地高辛标记的点杂交和Southern杂交均证明重组质粒上插入的具启动子功能的DNA片段来自于嗜碱芽孢杆菌的染色体DNA.     

芽饱杆菌活菌制剂对动物肠道菌群及免疫功能的影响

用芽饱杆菌活菌制剂（又名“强饲特”）作添加剂饲喂昆明种小鼠２１ｄ，发现小鼠平均日增重较对照组提高２２．５％；取新鲜粪便检测主要肠道菌群，结果表明乳酸杆菌明显增加，而大肠杆菌受到抑制；取其血液及脾细胞检测免疫功能，发现白细胞吞噬功能和抗体形成细胞活性显著增强     

基于神经网络模型及遗传算法的贝莱斯芽孢杆菌发酵沙丁鱼下脚料抗氧化活性的条件优化

微生物发酵技术是提升海洋鱼产品加工副产物价值的一种重要而有效的途径,而作为沙丁鱼加工副产物的鱼头是一种优质蛋白质和生物活性物质的绝佳来源.本文拟利用从传统鱼露中分离筛选的具有多种蛋白酶活性的贝莱斯芽孢杆菌SW5发酵沙丁鱼下脚料鱼头制备抗氧化活性物质,采用人工神经网络与遗传算法(ANN-GA)相结合方法,以DPPH自由基清除率和蛋白水解度(DH)为考察指标,确定最佳发酵条件.结果表明,沙丁鱼下脚料抗氧化物质最佳发酵条件为发酵时间42 h,发酵温度37℃,接种量3%,并在此条件下通过实验验证DPPH自由基清除率为91.26%.研究结果可为SW5菌株在海洋蛋白质资源的有效利用及功能性海洋食品生产应用上提供数据参考.     

黄杆菌(Flavobacteriumsp.)ATCC27551 opd基因在E.coli中的克隆及表达

研究了黄杆菌 ATCC2 75 5 1的 opd基因在大肠杆菌中的表达 ,并对于表达产物进行了胞内定位和酶活测定 .通过 PCR扩增和 PCR产物直接克隆 ,将黄杆菌质粒上的一段长达 1137bp的 opd基因进行扩增及克隆 ,然后按正确的读码框亚克隆于表达载体 p ET2 8b( )上 ,转化宿主菌 E.coli BL 2 1(DE3) ,经 IPTG诱导 ,获得了较高量的基因表达产物 .该表达产物以包涵体的形式存在于细胞内 ,通过分离包涵体可以得到电泳较纯的条带 .工程菌的细胞活性达到原始菌株黄杆菌的水平     

培养条件对嗜酸乳杆菌发酵产亚油酸异构酶的影响

以1株经自然分离的嗜酸乳杆菌经化学诱变筛选得到的产亚油酸异构酶高产突变株(Lac.Nb1)为出发菌株,以亚油酸底物为诱导剂,考察了培养条件对其产亚油酸异构酶的影响,得到最佳发酵培养条件:菌龄15 h,接种量2%,温度37℃,初始pH 5.5,装液量80 mL(250 mL三角瓶),摇床转速100 r·min-1,经发酵培养条件优化后其产量比优化前提高了38.8%.     

从作物根际分离的多粘芽孢杆菌固氮作用的研究

用乙炔还原法，研究了从作物根际分离的５１株多粘芽孢杆菌的固氮作用，结果表明：２８株在有氧条件下培养能合成固氮酶并固氮，其中ＨＷ－１菌株固氮酶活性达７８．３×１０－６ｍｏｌＬ－１ｈ－１．该菌株固氮活性在对数生长后期（３６ｈ）最高，最适固氮培养条件是３５℃和ｐＨ８．０．该菌株在有５％氧气的条件下培养时，固氮活性最高，在初始培养和乙炔还原体系中分别注入５０％氧气仍能检测到乙炔还原活性．培养基中ＮＨ＋４阻遏该菌株固氮酶合成，但对已合成的固氮酶活性无影响．     

苏云金杆菌H3-7对蔬菜害虫的防效及对其天敌的影响

苏云金杆菌BtH3- 7菌株对蔬菜主要害虫菜青虫、小菜蛾有较好的防效 ,大田应用稀释 10 0 0倍 ,72h防效 >76 % ,好于辛硫磷效果 ;同时BtH3- 7制剂对菜青虫、小菜蛾的天敌蝶蛹金小蜂和小菜蛾绒茧蜂的影响很小 ,在菜青虫、小菜蛾的寄生率分别达 5 4%和 86 % ,与不用药的对照区几乎没有区别 ,大大高于化学农药辛硫磷防治区的 4 %和 4 6 % .     

农杆菌介导转化新疆棉花体系的优化

以新疆主栽棉花品种新陆早19号和新陆早23号下胚轴为外植体,以GUS基因为报告基因,通过检测GUS基因在转化后的棉花下胚轴中瞬时表达情况,分析了菌液浓度、浸染时间、乙酰丁香酮浓度、超声波辅助处理、共培养温度和共培养时间等因素对GUS瞬时表达的影响.实验结果表明:菌液浓度OD600=0.5,浸染时间15 min,乙酰丁香酮浓度100μmol/L,24 C共培养72 h的转化条件下GUS基因瞬时表达率最高.