基于二硫化钼纳米片类过氧化物酶活性比色法测定尿酸

采用一步水热法制备具有类过氧化物酶活性的MoS₂纳米片,并基于MoS₂纳米片可催化H₂O₂氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)生成蓝色氧化产物(ox-TMB)的原理,建立了测定H₂O₂浓度的分析方法。在pH 3.7、温度35℃、MoS₂浓度1.0μg/mL及孵育时间40 min的条件下, ox-TMB的吸光度随H₂O₂浓度的升高而增大。基于H₂O₂是尿酸氧化酶催化尿酸氧化的产物之一,建立了MoS₂纳米片催化H₂O₂氧化TMB间接测定尿酸的分析方法。在2.5～40μmol/L和40～100μmol/L范围内,检测体系的吸光度与尿酸浓度呈良好的分段线性关系,方法在低浓度区间的检出限为0.093μmol/L,应用于血清和尿样中尿酸的测定,回收率为92.6%～102.0%。     

活化碳布电化学传感器对尿酸的检测研究

使用新型柔性碳布(CC)电极,实现了中性、无酶环境下对人体尿酸(UA)的检测。使用循环伏安法(CV)研究尿酸在碳布上的氧化还原特性并直接测定尿酸的含量;使用差分脉冲伏安法(DPV)研究人体内常见物质对尿酸测定的影响。结果显示,在0.01 mol/L磷酸盐缓冲溶液(PBS,pH=7.4)中,尿酸的浓度在10～400μmol/L范围内与氧化峰电流具有良好的线性关系,相关系数为0.9981,检出限为4.083μmol/L。此传感器具有一定的抗干扰性和良好的重复性、稳定性,可用于实际样品中尿酸的检测,测定的回收率为99.6%～109.2%。     

基于3,3',5,5'-四甲基联苯胺光热法检测维生素C

构建了一种基于3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）的光热效应检测饮料中维生素C含量的方法。TMB在木瓜蛋白酶催化作用下可与过氧化氢反应,生成蓝色的氧化态产物（ox-TMB）。由于ox-TMB具有强烈的光热效应,吸收808 nm近红外光后可将其转换为热能,从而导致溶液温度升高;维生素C存在时可以将一部分ox-TMB还原,导致温度增量下降,且下降的温度增量与维生素C的浓度在5.0～125μmol/L范围内存在线性关系,检出限为2.3μmol/L。该方法仅用笔式数字温度计作为信号读取器,已成功用于市售饮料中维生素C的定量检测。本文所提出的策略为开发低成本的生物和临床诊断方法提供了一种新的思路。     

NaYF4∶Yb,Er纳米粒子作为过氧化物模拟酶用于尿酸检测

聚丙烯酸修饰的NaYF4∶Yb,Er纳米粒子能够有效地催化H2O2氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,表现出良好的过氧化物模拟酶催化活性。本研究以TMB为模型底物,研究了催化条件(温度和pH值)对催化活性的影响。同时,结合尿酸在尿酸氧化酶作用下产生H2O2的原理,建立了比色法测定血样中尿酸含量的简便方法。在最优条件下,本方法的检测范围为1.0×10"5～2.0×10"4mol/L,检出限为5.3×10"6mol/L,并对实际样品进行测定,测定结果与临床结果一致。     

基于纳米金催化的血清尿酸纸芯片的构建及应用

建立了一种以纸芯片为平台,利用纳米金(Au NPs)的过氧化物模拟酶特性对血清中尿酸(UA)含量进行快速检测的方法.在改装的中性笔中灌注疏水性材料溶液,直接在滤纸上绘制所需要的图案,经干燥后形成纸芯片.将纳米金、四甲基联苯胺(TMB)和H_2O_2的混合液依次滴加于纸芯片检测区域,无色的TMB被氧化成蓝色,然后将待测样品滴加于蓝色区域,氧化态TMB被还原为无色,根据手机相机记录的检测区域灰度值计算试样中尿酸的浓度.实验优化了纳米金在纸芯片上的用量、反应时间和反应温度等参数,在最优实验条件下,检测尿酸的线性范围为10.6~125 mg/L,检出限为4.64 mg/L,加样回收率为94.8%~108.5%.该方法选择性良好,可用于测定血清样品中尿酸的含量.     

食品中残留过氧化氢的测定

利用猪血红蛋白(pHb)的催化特性,以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了一种催化光度终止法测定食品中残留过氧化氢(H2O2)的方法。实验考察了终止剂的类型和浓度、反应时间、pH、温度、TMB浓度对H2O2检测的影响。在选定的反应条件下,体系吸光值与H2O2浓度在1.46×10-6～2.91×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9958,方法对H2O2的检出限为5×10-7mol/L,测定标准偏差为4.9%,样品的加标回收率为92.9%～103%,利用该方法进行了实际样品中的H2O2分析,结果与国标法无显著性差异。     

以碳量子点为过氧化物模拟酶的葡萄糖测定方法

以烟炱为原料制备水溶性碳量子点(CQDs),此碳量子点具有过氧化物模拟酶活性,可催化H_2O_2氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,而葡萄糖氧化酶(GOx)可催化葡萄糖氧化产生H_2O_2,基于上述原理,建立了一种以CQDs为过氧化物模拟酶的葡萄糖测定方法。以TMB为底物,研究了温度、p H值等条件对催化性能的影响。结果表明,pH 3.5、35℃、0.5 mmol/L TMB、1μg/mL CQDs时,此方法检测葡萄糖的线性范围为0.025~0.40 mmol/L,检出限为5.10μmol/L(S/N=3),尿液中的常见干扰物不干扰测定。实际尿液中的加标回收率为95.0%~105.1%。     

TMB目视比色法检测水中余氯的改进

为解决GB/T 5750.11-2006生活饮用水标准检验方法中的3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)目视比色法检测余氯时出现的评价方法准确性欠佳、TMB显色剂发黄、显色体系偏绿等问题,对TMB目视比色法的评价方法、TMB显色剂的配制条件和水样的检测条件进行了研究。结果表明,次氯酸钠不宜作为余氯标准物质来评价TMB目视比色法的改进效果,而通过检测显色体系的A450和目视比色值相结合的方法来判断方法改进效果更为准确。采用优级纯浓盐酸和无氯纯水室温搅拌溶解,可使显色剂无色透明,从而解决TMB显色剂发黄的问题,符合国标要求。将显色剂配制用酸(盐酸)的浓度由国标中0.1mol/L变更为0.6 mol/L,可解决余氯显色体系偏绿的问题。显色体系pH变化后,显色时间、显色温度、显色剂用量可仍按照国标方法的要求进行操作。通过以上改进措施,进一步提高了余氯检测结果的准确度。     

基于谷胱甘肽抑制纳米金催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺与过氧化氢反应比色检测谷胱甘肽

采用具有类似过氧化物酶活性的金纳米粒子(AuNPs)催化四甲基联苯胺(TMB)-H2O2反应,氧化产物(oxTMB)被谷胱甘肽(GSH)还原成TMB,导致吸光度下降,颜色由蓝色变为无色。利用上述现象,设计了一种超灵敏检测谷胱甘肽的比色传感器。在10 pmol/L~10μmol/L范围内,吸光度随GSH浓度呈良好的线性降低关系,检出限为7.5 pmol/L。该方法可以定量检测人血清中的谷胱甘肽。     

锰掺杂硫化锌量子点室温磷光检测铅离子

采用锰掺杂硫化锌量子点室温磷光（RTP）探针,基于Pb^{2 1}对其磷光的猝灭现象进行选择性测定,考察了量子点溶液浓度、缓冲液体系及浓度、反应时间、干扰物质等多种因素影响,在最优条件下,即25μmol/L量子点溶液在Tris-HCl（10 mmol/L,pH 7.4）缓冲液中,反应时间为2 min时,检测Pb^2--的线性范围为0 25～1000μmol/L,检出限为0.04μmol/L,方法的精密度和准确度良好。本方法简单、快速、灵敏度和选择性较好,线性范围较宽,可用于96孔板进行高通量检测,并成功应用于生物样品中Pb^2-的选择性检测,在稀释5倍人血浆中检测Pb^2-的线性范围为5～1000μmol/L,检出限为0.48μmol/L。     

TMB–PA–DMA目视比色法测定水中余氯

建立TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)–PA(磷酸)–DMA(N,N-二甲基乙酰胺)目视比色法现场测定水中余氯的方法。在国标法TMB目视比色法基础上,将TMB显色剂中盐酸浓度由0.10 mol/L提高至0.50 mol/L;加入DMA加速溶解TMB并防止TMB析出;加入PA消除铁的干扰并缓冲溶液的pH值。在0.50 mol/L盐酸溶液下,通过正交试验,确定TMB、PA、DMA最优组合:TMB为0.30 g/L,PA为1.00 mol/L,DMA为0.50%(体积分数)。结果表明:加入DMA后TMB溶解时间由约5 h缩短至30 s;加入PA消除铁干扰效果明显;水样无需事先用酸调节pH值,直接加入显色剂即可比色定量。用TMB–PA–DMA法测定水样中余氯,测定结果的相对标准偏差不大于3.7%(n=7)。分别用TMB–PA–DMA目视比色法和DPD分光法测定水样中余氯,二者的测定结果无显著差异。该方法简便高效,快速、准确,更适宜现场测定水中余氯。     

以城市污泥基氧化石墨烯为模拟酶比色传感检测H2O2

本研究构建了以城市污泥基氧化石墨烯(GO)为模拟酶的比色传感器用于定量检测H₂O₂。以城市污泥为基质利用改进Hummers法制备氧化石墨烯(GO),利用GO具有过氧化物模拟酶的特性，能够催化H₂O₂与3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)的显色反应定量检测H₂O₂。结果显示，在最佳检测条件HAc-NaAc缓冲溶液pH 4.8、TMB溶液浓度30 mmol·L^-1和城市污泥基GO浓度460μg·mL^-1时，H₂O₂浓度在0.1～2μmol·L^-1和10～150μmol·L^-1范围内，与体系吸光度呈良好的线性关系，最低检测限为0.01μmol·L^-1。此方法对实际水样中H₂O₂含量进行检测，回收率在99%～103.77%之间。研究表明，城市污泥基GO具有与传统G...     

一种基于钝顶螺旋藻藻蓝蛋白荧光猝灭法的汞离子传感新方法

采用反复冻融细胞破裂法、硫酸铵分级盐析以及羟基磷灰石柱层析,从钝顶螺旋藻中提取出高纯度的藻蓝蛋白样品,纯度(A62a/A280)达4.1.该蛋白的紫外-可见吸收光谱表明其特征吸收峰为280、360、620nm,荧光光谱表明其最大发射波长为650 nm.以该藻蓝蛋白为荧光探针,发展了一种基于荧光猝灭法的Hg2检测新方法.并考察了缓冲体系、缓冲液pH值、反应时间、温度以及藻蓝蛋白的浓度等因素对汞离子检测的影响,在0.05 mol/L、pH7.5的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲液中,当藻蓝蛋白浓度为3 mg/L、反应时间为30 min、反应温度为30℃时,该方法的线性范围为0.1～10μmol/L,检出限为0.056 μmol/L.该方法表现出良好的汞离子传感选择性,而且当干扰离子与汞离子的浓度比为40∶1时,多种共存离子对汞离子的检测影响较小.该方法荧光探针提取容易,价格低且环境友好,具有较高的灵敏度和较好的重现性.     

微囊藻毒素的2-甲基-3-甲氧基-4-苯基丁酸检测方法的研究

2甲-基-3-甲氧基-4-苯基丁酸(MMPB)法是检测微囊藻毒素(Microcystins,MC)的重要方法之一。本文研究了温度、pH值、反应时间和氧化剂浓度等实验参数的影响,并在优化条件下采用气相色谱法对水中的微囊藻毒素进行检测。实验得到的最佳反应条件为:pH=9,初始反应温度2℃反应1 h,再升温至25℃反应2 h;KMnO4的初始浓度为0.0156 mol/L。本法对水溶液中的微囊藻的检出限为0.0225μg,回收率为93.5%。     

核壳Au@MnO2纳米粒子比色法检测硫离子

核壳Au@MnO_2纳米粒子催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢(H_2O_2)反应,生成黄色的氧化产物oxTMB,S~(2-)的引入使得S~(2-)和oxTMB反应生成TMB,导致黄色变浅。基于此原理,建立了比色法检测S~(2-)的传感器。在最佳实验条件下,溶液吸光度与S~(2-)浓度分别在0.1～10μmol/L和0.05～10 mmol/L范围内具有良好的线性关系,检出限为58 nmol/L。该方法用于自来水中S~(2-)的检测,回收率为95.1%～102.7%,相对标准偏差(RSD)小于3.1%。     

毛细管电泳分离检测中草药叶下珠中铜钴锌

以甲基百里酚蓝(MTB)为柱前配位剂,建立了毛细管电泳分离检测Cu、Co、Zn的方法。探讨检测波长、缓冲体系、缓冲液浓度、pH值及配位方式等对分离的影响。最佳实验条件为20 mmol/L Na2HPO4-NaOH 2.5×10-4mol/L MTB 60 mmol/L SDS(pH9.50)。线性范围为5.0×10-6mol/L~1.0×10-4mol/L,Cu、Co、Zn的检出限分别为2.0μmol/L、2.0μmol/L和1.0μmol/L。方法应用于经湿法消化处理的叶下珠样品中Cu、Co、Zn的测定,结果满意。     

基于金属有机多面体的可视化检测方法的构建及应用

结合金属有机多面体的高催化活性和抗坏血酸的还原性建立了一种简单、高灵敏的抗坏血酸(AA)可视化检测方法。采用铜离子-有机多面体纳米棒(Copper metal-organic polyhedra nanorods,Cu-MOP)作为类辣根过氧化物酶,在H₂O₂存在下,Cu-MOP催化氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB),检测液中存在的AA使Cu-MOP中的Cu²⁺还原,类辣根过氧化物酶催化活性大大降低,抑制Cu-MOP对TMB的催化氧化,因此,可以利用检测液颜色及其吸光度实现对AA的特异性检测。AA的浓度在1.0～30.0μmol/L及40.0～200μmol/L范围内与体系452 nm的吸光度(A_{452 nm})呈线性关系,检出限(S/N=3)为0.68μmol/L。本方法简单、快速、无需复杂仪器,将其应用于药品中AA的测定,结果令人满意。     

新型便携式RGB色度传感器定量检测水中路易氏剂

基于路易氏剂及其水解产物在碱性条件下与亚铜离子反应,溶液呈红色的原理,构建了定量检测水中路易氏剂的新型便携式RGB色度传感器。对增溶剂、还原剂的种类、还原剂浓度、CuCl₂浓度、NaOH浓度、乙酸用量、反应温度、反应时间等因素进行优化,得到最优反应条件:增溶剂为明胶,还原剂为盐酸羟胺,盐酸羟胺浓度为0.32 mol/L, CuCl₂浓度为0.15 mol/L, NaOH浓度为30%(m/m), 36%(m/m)乙酸用量为30μL,反应温度为室温,反应时间为5 min。在检测中采用源于归一化RGB系统的RGB(红绿蓝)色度法,克服了基于RGB模型的由于光强变化会导致3个刺激值的变化的问题。在最优条件下,色度值与路易氏剂浓度的标准曲线的线性范围为0.40～10.05 mg/L。本方法对R值和B值的理论检出限为0.389 mg/L和0.391 mg/L,实际检出限为0.40 mg/L。将本方法应用于人工水样中路易氏剂的测定,回收率为96.9%～106.9%。本方法具有较高的选择性、灵敏度和较好的重复性。     

基于氧化石墨烯修饰玻碳电极的多巴胺和尿酸的电化学检测

将超声分散的氧化石墨烯(GO)悬浮液滴涂于玻碳电极(GCE)表面,制备成GO/GCE,并用扫描电子显微镜(SEM)和电化学阻抗谱(EIS)对GO/GCE进行表征,利用差分脉冲伏安法(DPV)、循环伏安法(CV)对多巴胺(DA)和尿酸(UA)进行了电化学测定。研究了pH对DA和UA电化学行为的影响并计算相关的动力学参数。结果表明:该修饰电极对DA和UA的氧化还原反应具有良好的电化学催化作用,在1.0~98.0μmol/L和0.5~90.0μmol/L范围内峰电流与DA和UA浓度呈良好的线性关系,检出限分别为0.50μmol/L和0.25μmol/L。而且可以在抗坏血酸(AA)共存下同时测定DA和UA。该传感器具有良好的选择性与稳定性,有望应用于DA和UA的同时测定。     

聚苯胺修饰玻炭电极差示脉冲伏安法测定人体尿酸

研究了聚苯胺修饰玻炭电极的电化学性质和在抗坏血酸等物质存在下测定人体尿酸的分析方法。在0.025mol/L磷酸盐缓冲液(pH=6.6)介质中,聚苯胺修饰玻炭电极对尿酸具有强烈的吸附活性。在2.0×10-6~8.0×10-6mol/L内,尿酸浓度c与峰电流Ip成线性关系,相关系数r=0.9922。浓度为3.0×10-3mol/L的抗坏血酸不干扰尿酸的测定。用该方法测定了人体尿样中的尿酸含量,测定结果的相对标准偏差为3.21%,回收率为94.1%~101.6%。