疏水作用色谱介质的合成及色谱特性研究

利用国产大孔硅胶作基质合成了疏水填料。按照高效疏水作用色谱法,采用梯度洗脱方式分离了6种标准蛋白及唾液中α-淀粉酶和基因工程生产的γ-干扰素。柱子不可逆吸附小、被试验的α-淀粉酶和溶菌酶活性几乎定量被回收。应用合成的色谱填料研究了洗脱剂中盐浓度和温度对蛋白质保留行为的影响,论证了合成填料的色谱属性。     

新型聚合物单分散温敏色谱固定相的制备及其在生物大分子分离中的应用

以2.5 μm的单分散聚苯乙烯为种子,乙二醇二甲基丙烯酸酯 (EDMA)为交联剂,甲苯和环己醇为致孔剂,采用"一步种子溶胀聚合法"制备了单分散微球; 再以过硫酸钾为引发剂将水溶性温敏单体N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)分子引发聚合到微球表面,制备了粒径为7.0 μm、分散系数为0.02的单分散交联温敏色谱填料,温敏单体NIPAM的接枝率为5.2%.考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、温敏性能、稳定性和重现性以及动态吸附容量对蛋白保留的影响.实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、温敏性能、稳定性及重现性良好,且对溶菌酶的动态吸附容量为32.3 mg/g.在疏水模式下,该填料不但可以同时基线分离5种标准蛋白,而且通过改变温度可以有效地将3种在低温下保留时间重叠的蛋白(细胞色素-C、β-乳球蛋白和核糖核酸酶)完全分离.     

无机基质疏水作用色谱填料的研制及扩试

以无机基质可控孔径玻璃（ＣＰＧ）和大孔硅胶为基质、聚乙二醇（ＰＥＧ１０００）为配基,利用改进的合成方法制备了疏水作用色谱（ＨＩＣ）填料,并进行了１５０ｇ／批的扩大试验,用标准蛋白为样品进行了色谱行为的研究。结果表明,此类填料对蛋白质的分离性能良好,对胰蛋白酶的活性回收率大于９５％。     

一种疏水色谱填料的特性及应用的研究

 以交联壳聚糖为基质 ,正戊醛为配基 ,利用改进的方法制备了疏水作用色谱 (HIC)填料 ,并对该色谱填料的吸附行为和应用作了研究。结果表明 ,此类填料对蛋白质的吸附行为符合疏水相互作用理论 ,对α 淀粉酶的纯化活性回收率大于 80 %。     

新型高效疏水相互作用色谱填料的合成及性能的研究

]本文介绍了在硅胶基质上键合聚乙二醇、聚丙二醇、聚四氢呋喃和改性聚乙二醇等多类疏水色谱填料的合成及其分离蛋白质的色谱特性。其中改性聚乙二醇、聚1,2-丙二醇、聚四氢呋喃型配基的疏水填料为首次合成。文中探讨了硅胶孔径、聚乙二醇链长、改性聚乙二醇配基的端基和不同的聚醚链对蛋白质的保留值、活性回收率、分离度、填料稳定性和键合密度的影响,发现了在聚醚链单元上引入支链改变生物大分子与填料疏水区的接触面积可以改变蛋白质的保留时间和选择性。此外,还介绍了在硅胶上包裹有机胺类化合物再与环氧交联的疏水色谱填料的制备。     

谷胱甘肽键合柱对蛋白的选择性研究

通过将谷胱甘肽键合到硅胶表面合成了同时具有弱阳离子交换(WCX)、疏水(HIC)和氢键作用的多功能色谱填料, 该固定相在HIC和WCX模式下对蛋白都有很好的分离效果. 实验通过计量置换保留模型对蛋白在谷胱甘肽键合柱上的色谱保留行为及机理进行了研究, 结果发现, 在流动相盐浓度较低时蛋白根据自身等电点高低通过静电作用力得以分离, 而在高盐浓度下疏水和氢键作用力共同决定蛋白的保留. 这种多作用力保留模式可有效提高色谱柱的选择性, 尤其为蛋白质、多肽及氨基酸的高效分离提供新的解决思路.     

磷酰胆碱色谱固定相的制备及其在分离生物大分子中的应用

以三氯氧磷、氯化胆碱和甲基丙烯酸-2-羟乙酯(HEMA)为原料合成了含磷酰胆碱的单体2-甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱(MPC). 在硅胶表面嫁接聚合MPC, 得到磷酰胆碱两性离子交换色谱填料. 研究了该填料对标准蛋白的分离性能及pH对蛋白质保留的影响. 结果表明, 该填料对溶菌酶和牛血清白蛋白的动态吸附容量分别为13.8和18.7 mg/g, 其基质磷酰胆碱色谱固定相可同时基线分离两种酸性和两种碱性蛋白.     

单分散大孔亲水弱阳离子交换填料的制备及其对鱼精蛋白的分离纯化

以自制的5.0 μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球为基质,对其表面进行化学改性,合成弱阳离子交换色谱填料(WCX)。详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、表面亲水性能、稳定性和重现性以及流速对蛋白保留的影响。实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、重现性及稳定性良好;在流速为3 mL/min时,采用线性梯度洗脱,6 min内可分离4种标准碱性蛋白质,以溶菌酶测定的该填料的动力学吸附容量为29.86 mg/g。将其用于鱼精蛋白的分离纯化,经反相高效液相色谱测定纯化后鱼精蛋白的纯度为99.2%;与商品Shodex IEC SP-825强阳离子交换色谱柱比较,纯化结果几乎一样。     

新型疏水色谱填料--丁基交联壳聚糖的合成

合成了一种以壳聚糖为载体,以正丁基为配基,并以戊二醛交联提高其机械强度的新型疏水色谱填料－丁基交联壳聚糖,并对其合成条件的控制进行了研究。结果表明：交联剂用量、反应物比例以及反应物浓度决定了合成填料的疏水性能。为保证良好的听任性、实用性及较佳的分离效果,比较合适的合成条件是：戊二醛浓度0．1％（V／V）,正丁醛浓度0．13％－0．26％（V／V）,壳聚糖浓度2g/L-10g/L。不同条件下的合成的色谱填料对枯草杆菌α－淀粉酶粗品的分离提纯效果明显不同,进一步说明合成条件对色谱填料性能的影响。     

疏水膜色谱法对生物大分子的快速纯化

首次采用自制的分别级合了辛基、丁基、苯基及聚乙二醇-4000的4种常用疏水基团的纤维素疏水膜色谱柱,以键合了辛基、苯基的SepharoseCL－4B凝胶柱为对照,考察了疏水膜色谱柱对牛血清白蛋白（BSA）的动态吸附容量及流速对吸附容量的影响。疏水膜色谱柱对蛋白及酶具有较好的疏水吸附及纯化作用,但吸附容量比相应的琼脂糖凝胶柱低得多。增大流速及降低蛋白溶液质量浓度对疏水膜色谱柱的吸附容量影响较小,这些性能使膜色谱柱非常适合于大体积低质量浓度蛋白溶液（如基团工程培养液）的分离纯化。     

Statistical Analysis of Multivariate Multiple Wavelength Liquid Chromatographic Response Data

Abstract

A standard mixture of uracil, phenol, benzaldehyde, and N,N-Diethyl-m-Toluamide was chromatographed under standard conditions at many wavelengths from 210 nm to 280 nm. the area percentage composition of the mixture varies depending on the wavelength chosen. Principal component analysis and factor analysis were done on the percent area composition data.     

Chromatographic behaviour of metal ions on tin(IV) and titanium(IV) antimonate papers

Summary The chromatographic behaviour of 49 metal ions has been studied on papers impregnated with Sn(IV) and Ti(IV) antimonates in aqueous HNO₃ and mixed solvent systems containing dimethyl sulphoxide. Numerous separations have been achieved and the Alberti equation, for Sn(IV) and Ti(IV) antimonate papers, in the modified form: –nloga K⁺=R_M + constant (a K⁺=activity of K⁺), has been verified. The effect of the concentration of impregnating reagents on these papers has been determined and compared with other papers. The effect of pH on R_f, R_i, log R_f and R_M values of metal ions has also been examined in aqueous systems.     

Gas Chromatographic Analysis in the Synthesis of Poly (Ethylene Oxide) Dimethyl Ethers

ABSTRACT

Gas chromatography (GC) was used in the analysis of the synthesized oligomeric mixtures, involving poly(ethylene glycol)s, poly(ethylene oxide) monomethyl ethers, poly(ethylene oxide) dimethyl ethers and crown ethers. It was demonstrated that the samples could be successfully analyzed on the wide bore capillary column with cross-linked polar stationary phase (FFAP) without derivatization. An on-column injection technique is used to avoid possible sample distortion. Identification and quantitative analysis were achieved taking advantage of the GC homologues retention rule and the FID effective carbon number response rule, thus the limitations of some standard availability and purity problems were avoided. Much useful information such as average molecular weight, polydisperse distribution and so on were obtained by the established method, which is very important in the process monitoring and product quality control.     

原子转移自由基聚合法制备新型亲水作用色谱固定相及其性能评价

以自制的6.0μm单分散大孔交联聚氯甲基苯乙烯-二乙烯基苯(Poly(4-vinylbenzylchloride-co-divi-nylbenzene),PCMS/DVB)微球为基质和引发剂,CuCl和自行合成的三[(2-二甲基氨基)乙基]胺(Tris[2-(dimeth-ylamino)ethyl]amine,Me6TREN)组成混合催化体系,使4-乙烯基吡啶(4-Vinyl pyridine,4-VP)在甲苯中进行原子转移自由基聚合,制得4-乙烯基吡啶聚合物,单体4-乙烯基吡啶的接枝率为8.55%。将该聚合物与正溴丁烷反应制得新型亲水色谱固定相。在亲水作用色谱模式下,流速1 mL/min,乙腈-水为流动相可分离5种芳胺化合物和4种酚类化合物。在离子交换色谱模式下,6 mmol/L Na2CO3-5.5 mmol/L NaHCO3为淋洗液可分别分离5种无机阴离子和4种短链有机酸。结果表明,此固定相对极性化合物和无机阴离子具有良好的分离性能,是一种性能优异的亲水作用色谱固定相。     

Polydimethylsiloxane: A General Matrix for High‐Performance Chromatographic NMR Spectroscopy

The detection and structural characterization of the components of a mixture is a challenging task. Therefore, the development of a facile and general method that enables both the separation and the structural characterization of the components is desired. Diffusion‐ordered NMR spectroscopy (DOSY) with the aid of a matrix is a promising tool for this purpose. However, because the currently existing matrices only separate limited components, the application of the DOSY technique is restricted. Herein we introduce a new versatile matrix, poly(dimethylsiloxane), which can fully separate many mixtures of different structural types by liquid‐state NMR spectroscopy. With poly(dimethylsiloxane), liquid‐state chromatographic NMR spectroscopy could become a general approach for the structural elucidation of mixtures of compounds.     

甲基烷烃结构与色谱保留指数相关性的拓扑指数法研究

计算了207个甲基烷烃的127个拓扑指数变量,把变量选择方法GAPLS方法引入到定量结构与气相色谱保留关系研究中,对127个拓扑指数变量进行选择,得到了含7个变量的化合物的定量结构与色谱保留指数关系(QSRR)模型,其复相关系数的平方为0.99998,标准偏差为2.88。交互验证的复相关系数为0.99997,交互验证的预测标准偏差为2.95,表明该模型具有良好的稳定性和可靠性。对获得的7个变量进行了合理的结构解释,表明甲基烷烃色谱保留指数完全能用拓扑指数来精确表征。     

苯砜基环烷酸酯类化合物的分子结构与色谱保留的定量关系

根据线性溶解能理论，导出一种理论线性溶解相关模型，应用该模型及量子化学ＡＭＩ算法计算的分子结构参数，得出苯砜基环烷酸酯类化合物的分子结构与色谱保留定量关系方程，这个方程可以应用于同类化合物在同样色谱条件下保留行为的预测。研究表明，该类化合物的容量因子随着分子平均极化率的增大而增大，随着偶极矩和的分子中与硫原子相键合的氧原子的净电荷的增大而减小。     

相似系统理论用于中药色谱指纹图谱的相似度评价

研究了中药色谱指纹图谱相似度的评价方法,提出了改良的程度相似度的计算方法。以模拟数据和实验数据研究了相关系数、夹角余弦和改良程度相似度的优劣,发现相关系数和夹角余弦对数据的差异不够敏感,经预处理之后仍然不灵敏;采用改良的程度相似度可以反映数据的差异,因此可以将其用于评价中药色谱指纹图谱共有峰的相似度。