毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离DNA片段

本文报道了毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离较短的 p GEM7Zf(+) Hae DNA片段 (DNA长度为 1 8～ 675bp)。研究表明 ,在 1 %的羟乙基纤维素无胶筛分介质中 ,加入 2 %的聚乙烯吡咯烷酮能显著提高 DNA片段的分辨率和分离效率。在混配无胶筛分介质中 ,聚乙烯吡咯烷酮有两种作用 ,一是动态涂渍 ,降低毛细管内壁对 DNA片段与 DNA荧光插入试剂的吸附 ,改善分离效率 ;二是两种不同长度、性质的线性高分子能形成更为致密的“缠绕网络”,有利于较短的 DNA片段电泳分离。     

用未涂敷毛细管电泳分离DNA片段

用内壁未涂敷毛细管，以羟乙基纤维素的无胶筛分介质，在６ｍｉｎ内分离了λＤＮＡ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ片段，探讨了ＤＮＡ片段在未涂敷毛细管中的分离机理，讨论了羟乙基纤维素和缓冲溶液浓度及电压对分离的影响，考察了ＤＮＡ片段迁移时间的重现性。     

羟乙基纤维素及蔗糖无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段

提出以羟乙基纤维素、蔗糖和硼酸形成“互穿网络”无胶筛分介质，显著地提高了分离效率，分离了φＸ１７４／ＨａｅⅢＤＮＡ的所有１１个ＤＮＡ片段，探讨了“互穿网络”无胶筛分机理。将该方法应有和于决定鳝鱼性别基因ＰＣＲ扩增产物的分离与鉴定，结果较好。     

无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段

 由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。     

样品稀释对毛细管电泳分离检测DNA片段的影响

通过理论推导和实验验证表明;适当稀释DNA样品溶液,采用流体力学进样或电动进样都不会较大地减低峰高,而DNA片段毛细管电泳的分离效率和分离度还能有所提高。采用稀释样品的方法可提高DNA样品的使用效率。采用羟乙基纤维素无胶筛分介质分离了DNA片段。用激光诱导荧光（氩离子激光器,488nm）电荷耦合器件检测。用低浓度的筛分介质（0．4％）分离了分子质量较大的ADNA－HindⅢ全部8个片段（12bp～23130bP）。用高浓度的筛分介质（1．6％）分离分子质量较小的pBR322－HaeⅢ22个片段（18bp～587bp）。     

毛细管电泳—激光诱导荧光法分离检测DNA片段与基因扩增产物

以羟丙甲基纤维素和非交联聚丙烯酰胺溶液为筛分介质，将毛细管电泳－激光诱导荧光法用于ＤＮＡ片段及基因扩增产物的分离检测。探讨了非胶筛分介质中高分子化合物的浓度、电解质的浓度、内插试剂用量等对ＤＮＡ片段分析检测的影响；考察了ＤＮＡ片段迁移时间和峰面积的重现性及ＤＮＡ片段定量检测的关系，建立了一种快速、灵敏的ＤＮＡ片段及基因扩增物分离检测方法。     

添加剂在毛细管电泳分离DNA中的作用研究进展

使用无胶筛分介质的毛细管电泳（包括毛细管阵列电泳和微芯片电泳）是最重要的DNA分离技术之一。在低粘度的无胶筛分介质中加入某种添加剂是一种有效且简单的克服填充困难和提高DNA分离性能的方法。本文就各种添加剂（如多羟基化合物、粘土、金纳米粒子、乳胶粒等）对提高无胶筛分介质中DNA的分离性能的作用进行了综述。     

基于纤维素衍生物的毛细管无胶筛分电泳及其应用

毛细管无胶筛分电泳近年来取得了很大进展。本文综述了以纤维素衍生物作为筛分介质的毛细管无胶筛分电泳的研究进展,包括筛分理论,筛分体系模式,以及它在DNA、蛋白质分离方面的应用。     

变性无胶毛细管筛分电泳分析聚合酶链式反应产物

在分离Ｙ染色体性别决定区,人１１号染色体短β－珠蛋白基因部分序列扩增产物和ＰＢＲ３２２／ＨａｅⅢ标准片段的混合样品时,ＳＲＹ和１０８／Ｂ的迁移时间均产生较大的偏差,在尿素变性存在的无胶筛分体系中迁移时,这种迁移时间的偏差得以消除,这意味着尿素性剂的存在消除了ＤＮＡ空间结构对迁移的影响,ＤＮＡ在此筛分介质中的迁移只与其片段长度有关。     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质（缠结溶液和稀溶液）中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。     

线性聚丙烯酰胺和聚乙烯吡咯烷酮准互穿网络聚合物溶液用于毛细管电泳紫外检测条件下分离DNA片段的深入研究

线性聚丙烯酰胺(PAA)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)准互穿网络(quasi-IPN)聚合物溶液被成功用于毛细管电泳紫外检测条件下分离双链DNA片段 (对123bp/124bp片段的分离度为0.76)和单链DNA片段(对123b/124b片段的分离度为0.97). 该quasi-IPN筛分介质粘度小（在25^oC 时的粘度为23.5mPa·s）且温度升高粘度下降. 该筛分介质具有动态涂敷能力可直接用于非涂层毛细管柱。根据实验结果，柱温和电场强度会明显影响DNA片段在该介质中的迁移行为。在变性条件下，最长片段为1353碱基的单链DNA样品可以在40分钟内获得分离，其中309/310b 片段的分离度为0.88。     

微流控芯片-激光诱导荧光检测器的研制及核酸片段分离检测中应用

采用自行设计的共焦式激光诱导荧光检测器（激发波长635nm，发射波长670nm），以cy5染料对检测器的空间分辨能力和灵敏度进行了测试，检出限达到10^-9mol／L。建立了一种微流控芯片快速分离检测DNA片段的方法。以0．8％羟丙基甲基纤维素（HPMC）为筛分介质，以（噻唑橙单体）To-pro-3为荧光标记染料，在玻璃微流控芯片中实现了dsDNA片段的无胶筛分和激光诱导荧光检测，12条DNA片段在75s内得到分离。     

豚草聚合酶链反应产物的高效毛细管电泳检测

利用PE270A－HT型高效毛细管电泳仪,采用无胶筛分电泳,以羟丙基甲基纤维素（HPMC）为筛分介质,对三裂叶豚草（Ambrosia trifida L.)的聚合酶链反应（PCR）产物进行了分离分析,显示了高效、快速、无污染的毛细管电泳技术在植物DNA片段多态性分析方面的巨大的潜力。     

羟乙基纤维素中毛细管电泳DNA分离特性研究

本实验以羟乙基纤维素(HEC)为筛分介质,以100～1500 bp DNA ladder为分离对象,系统地研究了直流电场下毛细管电泳时DNA分离特性.论文考察了DNA迁移淌度及分离度随HEC溶液浓度和分子量、毛细管两端电场强度(E)、毛细管有效长度(le)及其内径形状、背景电解液(BGE)温度等因素变化规律.研究发现:(1)当筛分介质HEC浓度高于其阈值浓度c*时,HEC分子量越大,相邻DNA片段之间淌度差越大,HEC浓度越高,其迁移淌度越低;(2)对于相邻的DNA片段,le在一定范围内,其分离度随le增大而线性升高;(3)毛细管有效长度一定时,DNA淌度随毛细管侧面积与截面积之比R增大而升高,分离效率提高;(4)BGE温度升高,DNA在筛分介质中扩散效应增强,迁移淌度变大,相邻DNA片段间分离度减小.根据以上结论,在直流电场下毛细管电泳φ×174-Hirc II限制性酶切片段,并实现了其高分离度、快速分离.     

毛细管电泳快速分离脱氧核糖核酸的新方法

在非离子表面活性剂胶束和0．075％羟乙基纤维素和一定量的甘露醇体系中，完成了脱氧核糖核酸（DNA）片段的快速分离。研究了DNA片段在不同胶束体系中的分离特点，指出在非离子表面活性剂胶束体系中，DNA片段的分离依据应该是胶束分配理论，而且胶束分子量的大小决定DNA片段的分离选择性。     

脉冲毛细管电泳分离蛋白质的研究

蛋白质是机体细胞的重要组成成分,通过分析蛋白质可获得机体的受损或病变情况,因此毛细管电泳（CE）分析蛋白质分子在临床医学中具有重要的应用价值。该文以溶菌酶、生长激素、碳酸酐酶、肌动蛋白、牛血清白蛋白和磷酸化酶B为样本,采用有效长度为6 cm和总长度为8 cm的毛细管,以羟乙基纤维素（HEC）为分离介质,首次采用脉冲电场毛细管电泳（PFCE）,研究了脉冲频率及调制深度对不同蛋白质（分子量14.4～97.4 kDa）分离效率的影响。结果表明,相对于电场强度为100 V/cm的直流电场毛细管电泳（DCCE）,在1.4% HEC筛分介质中采用平均电场强度为100 V/cm,脉冲频率为10 Hz,调制深度为250%的脉冲电场时,相同蛋白质分子的分离时间缩短6.6%～9.6%;脉冲电场与蛋白质分子的共振频率为10 Hz,当脉冲频率低于共振频率时,分离时间随脉冲频率的增高而延长,反之则随脉冲频率的增高而减少;当脉冲频率与共振频率相同时,其分离度提高34.1%～88.1%,理论塔板数最高为4.03 × 104;在相同平均电场下,当调制深度由0提至250%时,筛分介质内的焦耳热比直流电场时提高了2.64倍;焦耳热的提高使得筛分介质的粘度降低,导致蛋白质分子在筛分介质内的迁移时间随电场脉冲调制深度的增加而减少,且蛋白质的分子量越大,其迁移时间越小,其中磷酸化酶B的迁移时间减少约9.6%,但相邻蛋白质分子间的分离度无明显降低。该研究为提高CE对蛋白质分子的分离效率提供了新方法。     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的.使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质.本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等.     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。     

毛细管电泳中聚合物溶液筛分脱氧核糖核酸

围绕着毛细管电泳中聚合物溶液筛分脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）的机理和分离介质、条件,综述了近年来该技术的发展,及其在ＤＮＡ测序、聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物分析方面的应用及其发展前景。     

聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围DNA片段

在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱（31.2 cm×75 μm有效长度21.0 cm）分离DL5000 DNA Marker（DNA长度为100~5000 bp）,研究筛分介质浓度、缓冲液pH、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链DNA片段的影响,优化出分离100~5000 bp DNA片段的最佳条件。毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度0.5%、缓冲液pH值8.0、电压12 kV、溴化乙锭浓度3.0 μg/mL。此条件下,对山梨醇脱氢酶基因（SDH）和乙烯受体基因（ETR1）的聚合酶链式反应（PCR）扩增产物同时检测,分离、鉴定效果良好。