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本文根据铜与氨基酸组成的1:1不饱和络合物对Luminol-H2O2化学发光体系的催化活性,设计了一种新型氨基酸高效液相色谱化学发光检测器,即在色谱柱后安装一个氢氧化铜柱,从柱后流出的氨基酸通过氢氧化铜柱时,产生配合溶解形成氨基酸-铜(1:1)络合物,进行化学发光检测,14种常见氨基酸的检测限均在pmol级,已用于血清、尿和啤酒中氨基酸的测定。 相似文献
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本文用自制的单一或复合的微生物传感器作检测器,与高效液相色谱结合,对7种氮基酸,5种有机醇,以及同化糖与醇,维生素等7种混合体系进行分离硷测,取得较好的结果。 相似文献
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建立了米根霉胞内代谢物提取方法定量评价体系,用100%甲醇作为提取剂获得对米根霉胞内能荷物质最佳的提取效果.用HPLC法建立了米根霉产富马酸体系胞内18种氨基酸的含量测定方法.采用异硫氰酸苯酯( PITC)作为柱前衍生化试剂,所有氨基酸在28 min内洗脱完毕.以Sepax AA柱(250 nn×4.6 mm,5μm)为分析柱,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,以0.1 mol/L醋酸钠(pH 6.5)-乙腈(93∶7,V/V)为流动相A,乙腈-水( 80∶ 20,V/V)为流动相B,梯度洗脱.18种氨基酸在1.87~45.3 mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.991;加标回收率在96.3%~102.7%之间;相对标准偏差在1.6%~2.9%之间.运用本方法测定不同发酵时间米根霉胞内氨基酸的含量,得到其在发酵过程中的变化趋势,并结合氨基酸代谢途径分析了该发酵条件下富马酸产量偏低的原因. 相似文献
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柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸 总被引:9,自引:1,他引:8
自从Moore等提出色谱法定量分析氨基酸以来,传统的离子交换色谱及柱后茚三酮衍生检测方法始终占着主导地位。三十多年来,人们对该法及仪器做了大量的研究与改进工作,使分析的灵敏度、速度以及自动化程度有很大的进步,而且以此为基础,建立了食品、饲料等有关氨基酸分析的一系列国际和国家标准。然而,随着氨基酸分析应用领域的扩展,氨基酸测定仪用途单一、结构复杂、价格昂贵等缺点日益突出。自七十年代以来,随着高效液相色 相似文献
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应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术,采用等度洗脱。对20种标准DABTH-氨基酸进行了分离与鉴定,灵敏度达到pmol水平;并以溶菌酶为模式蛋白,经手工DABITC/PITC双偶联方法对其N端部分序列进行Edman降解,其降解产物DABTH-氨基酸用RP-HPLC技术进行了鉴定,蛋白质微量序列分析的灵敏度达到nmol水平. 相似文献
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柱前衍生高效液相色谱法测定氨基酸 总被引:8,自引:0,他引:8
本文阐述了以6-氨基酸喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯为衍生剂,用紫外测检测柱前衍生反相高效液相色谱测定氨基酸的方法,并将实验结果和方法性能与经典的离子交换色谱法做了比较,该法不仅具有能与IEC法相媲美的精密度,准确度,还不受样品基质,高盐乃至添加的大量其它电解质,维生素和微量元素的干扰,特别适于天然生物样品,食品及饲料的氨基酸分析。 相似文献
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高效液相色谱法测定味精厂发酵渣中的氨基酸 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了37种标准氨基酸混合液的分离方法,并以此分离条件测定发酵渣和大米中各种氨基酸含量,测定结果表明发酵渣中氨基酸含量是大米的六倍以上,可提纯作为营养品。 本法系离子交换色谱法,使氨基酸混合液通过锂柱,控制不同pH值的流动相进行梯度淋洗,使各种氨基酸分离,柱后依序加入次氯酸钠 相似文献
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2,4-二硝基氯苯衍生化法在反相高效液相色谱测定氨基酸中的应用研究 总被引:5,自引:0,他引:5
研究了采用2,4-二硝基氯苯(CDNB)作衍生化试剂,用于反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定氨基酸的方法。衍生化反应条件为在碱性溶液中80℃1小时,制得17种DNP-氨基酸。采用甲醇-醋酸盐缓冲系统梯度洗脱,50分钟内大多数氨基酸可较好地分离。衍生化产物性质稳定,360nm波长处紫外检测,17种氨基酸的最低检出限为2μg。 相似文献
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高效液相色谱法研究氨基酸测定中鸡蛋样品的微波水解 总被引:4,自引:0,他引:4
利用Pico-Tag高效液相色谱法(HPLC)研究了氨基酸分析中一种新的水解方法——微波水解法,鸡蛋样品以内含1%苯酚的6mol/L盐酸作为水解液水解,仅需7min即可求解完全,平均回收率为95%,相对标准偏差小于2%。方法简便、快速、准确、重现性好,适用于不同样品的水解处理。 相似文献
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高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸、抑制性氨基酸的含量 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了反相高效液相色谱法测定羊水中兴奋性氨基酸天门冬氨酸、谷氨酸,抑制性氨基酸甘氨酸含量的方法,色谱柱为LUNAC18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈水(V/V),按低压梯度洗脱,梯度系统0~4min,乙腈40%;4~20min,乙腈40%~52%;20~30min,乙腈52%~60%;30~40min,乙腈60%~40%。流速0.8mL/min,柱温40℃,紫外检测波长260nm;进样量10μL。结果显示,天门冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸三者的线性范围均为2.5~85mg/L;标准加入的回收率为99.6%~102.6%。本方法灵敏度高、测定结果可靠。用本方法对201例不同孕期的羊水作兴奋性和抑制性氨基酸检测,发现羊水中3种氨基酸随妊娠进展而增加的趋势,胎儿畸形或宫内缺氧时羊水中这3种氨基酸水平明显升高。 相似文献
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异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相法同时测定18种氨基酸 总被引:30,自引:0,他引:30
建立了一种利用反相高效液相同时测定 18种氨基酸的方法。以正亮氨酸为内标物 ,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂 ,用C18柱在柱温 38℃下采用二元梯度洗脱 ,于 2 5 4nm波长处检测。氨基酸质量浓度在 3 5mg/L~ 5 5 6mg/L时 ,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸的质量浓度的线性相关系数 ,除胱氨酸 (0 96 2 )外均大于 0 99;18种氨基酸的加标回收率在 96 0 %~ 10 2 .4 %。信噪比为 2时 ,亮氨酸最低检测限为 0 5mg/L。应用该方法对小牛血去蛋白注射液中的游离氨基酸含量进行了测定 ,取得了满意的结果。 相似文献
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高效液相色谱Pico-Tag法测定野蕨菜氨基酸成分 总被引:2,自引:0,他引:2
高效液相色谱Pico-Tag法测定野蕨菜氨基酸成分陈柏林,郭敏(四川农业大学动物营养研究所四川雅安625014)1前言高效液相色谱(HPLC)Pico-Tag法因采用柱前衍生,反相色谱分离 ̄[1],具有分析时间短、灵敏度高、重现性好等优点,广泛地用于... 相似文献
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反相高效液相色谱法直接测定水蛭中14种未衍生氨基酸的含量 总被引:3,自引:0,他引:3
建立了一种反相高效液相色谱/蒸发光散射检测器方法,同时测定中药水蛭中14种未衍生氨基酸含量。以异亮氨酸等氨基酸为标准品、PrevailTMC18(250mm×4.6mmi.d.,5μm)为色谱柱、梯度洗脱、漂移管温度115℃、气体流量2.5L/min,在25min内即可将水蛭中14种氨基酸分离测定。氨基酸质量浓度0.072~2.29g/L时,其对数值与峰面积对数值线性关系良好;14种氨基酸的加样回收率为94.8%~104.4%;信噪比为3时,异亮氨酸检出限为20mg/L。该法快速、简便、准确,可作为水蛭中氨基酸直接测定方法,亦可为其它中药中氨基酸分析提供参考。 相似文献