头发中甲状腺激素和类固醇激素的高效液相色谱串联质谱检测

基于高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）,开发了一种灵敏、可靠的方法,用于同时测定人类头发中的甲状腺和类固醇激素,包括甲状腺素（T4）、3,3′,5-三碘甲状腺原氨酸（T3）、3,3′,5′-三碘甲状腺原氨酸（rT3）、3,3′-二碘甲状腺原氨酸（3,3′-T2）、L-甲状腺原氨酸（T0）、皮质醇（F）和可的松（E）。头发用量20 mg,使用甲醇/氨水（体积比95∶5）在40℃下孵育24 h。采用电喷雾离子源,在多反应监测模式和正离子模式下进行定量分析。在甲醇/纯水（体积比80∶20,含0.2 mmol/L乙酸铵）的等度洗脱条件下,7种待测物分离良好。该方法检测上述7种激素的检测限在0.3～1.9 pg/mg,定量限在1.1～6.5 pg/mg;日内、日间变异系数均小于10%,回收率在89.4%～109.1%之间;稳定性、残留效应均符合检测标准要求。运用该方法检测140名被试的头发样本,所有被试的T0、F和E均可定量检测,而T4、T3、rT3和3,3′-T2的含量非常低,均在定量限附近,仅在少量被试中可被检出。     

液相色谱/质谱法分离鉴定碘化酪蛋白水解产物中的碘化氨基酸

用Waters Symmetrys Shield^TM RP18柱，乙腈(B，含0．1％甲酸)和水(A，含0．1％甲酸)为流动相，0．8mL／min，线性洗脱(B从10％到50％)40min，液质联用(LC／MS)，电喷雾电离源(ESI^ ，SIR方式)，对碘化酪蛋白水解物中的一碘酪氨酸(MTT)、二碘酪氨酸(DIT)、二碘甲腺原氨酸(T2)、三碘甲腺原氨酸(L3,rT3)和四碘甲腺原氨酸(T4)进行了分离确证。同时测定了T3、rT3和T4的含量。     

反相离子对高效液相色谱分析~(125)Ⅰ-甲状腺激素

甲状腺激素3,5,3′,5′-四碘甲腺原氨酸(T_4),3,5,3′-三碘甲腺原氨酸(T_3)及3,3′,5′-三碘甲腺原氨酸(γT_3)为甲状腺碘代氨基酸。它们的~(125)I标记化合物分别为T_3、T_4、γT_3的碘-125标记药盒的主要组成。这些药盒分别用于测定血清中T_3,T_4,γT_3的浓度,以判断甲状腺对组织的成熟、生长、代谢活动和功能,诊断甲状腺疾病。     

化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸

以辣根过氧化物酶为三碘甲腺原氨酸类似物的标记物,鲁米诺为化学发光反应底物,建立了一种高灵敏度化学发光免疫检测游离三碘甲腺原氨酸的方法。该法线性范围为0.90~80 ng/L,批内变异小于12.1%,批间相对标准偏差均小于15%,其余各项指标均良好。利用本法对血清样品进行了测定,关于甲状腺机能亢进组病人的临床诊断符合率达到83.3%。与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为0.9005。在方法条件选择上,以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则,提高游离三碘甲腺原氨酸浓度测定的准确性。     

天然产物Angustifolin D中间体的合成

以3,4,5-三甲氧基苯甲酸为原料,经6步反应以23％总收率完成了Angustifolin D关键中间体--6,6′-2［(Z)-2-碘代-1-丙烯基］-2,2′,3,3′,4,4′-六甲氧基-1,1′-联苯(7)的合成,其结构经¹H NMR, ¹³C NMR, IR和MS确证。其中关键步骤联苯偶连反应采用了廉价易得的铜试剂(CuBr·SMe₂)作为催化剂。     

新荧光试剂双(2-苯并噻唑重氮氨基)-3,3′,5,5′-四甲基联苯的合成及其分析应用

将3,3′,5,5′-四甲基联苯胺和苯并噻唑类试剂结合, 并引入杂环三氮烯结构, 合成了新荧光试剂双(2-苯并噻唑重氮氨基) 3,3′,5,5′-四甲基联苯(BBTDTMB), 其结构经红外光谱、 核磁共振谱和元素分析证实. 研究结果表明, 在碱性介质中, 该试剂在λex/λem=342 nm/420 nm处产生强荧光, 并且Ag(Ⅰ)对其荧光有很好的猝灭作用, 因而建立了BBTDTMB测定Ag(Ⅰ) 的新荧光分析方法. 该方法的线性范围为1.0～240 μg/L, 检测限为 0.5 μg/L, 应用于人发、 茶叶中的Ag(Ⅰ) 的测定, 结果令人满意.     

连茚四酮类有机磁性化合物的合成及性能

分别以邻苯二甲酸酐、4-甲基邻苯二甲酸酐和四氯邻苯二甲酸酐为原料, 采用Gabriel & Leupold法合成了3个连茚四酮类化合物, 即2,2′-二茚满-1,1′,3,3′-四酮(1)、5,5′-二甲基-2,2′-二茚满-1,1′,3,3′-四酮(2)和4,4′,5,5′,6,6′,7,7′-八氯-2,2′-二茚满-1,1′,3,3′-四酮(3). 元素分析、¹H NMR、FTIR 和MS测定分析表明, 此3个分子主要以烯醇式存在, 同时存在分子内氢键; 通过电子自旋共振(ESR)谱测定, 给出了各化合物的ESR谱参数值. 结果表明, 化合物1~3均有良好的ESR图谱, 是只含有C, H, O及Cl的纯有机磁性化合物, 分子内都含有稳定的自由基. 通过量子化学计算, 推测出了自由基可能形成的位置及此类化合物最可能的存在形式(烯醇式), 且证明分子内存在1个氢键.     

柱前手性荧光衍生反相高效液相色谱法分离甲状腺素对映体

以R(-)-4-N,N-二甲基磺酰胺-7-(3-异氰酸吡咯烷)-2,1,3-苯并氧杂咪唑（R(-)-DBD-PyNCS）为手性荧光衍生化试剂,成功地拆分了甲状腺素对映体D,L-四碘甲状腺原氨酸（T4）和L-三碘甲状腺原氨酸(T3)。在反应温度为40 ℃、反应时间为20 min时,R(-)-DBD-PyNCS在碱性介质中可与甲状腺素对映体生成稳定的非对映体衍生物。该衍生物在以乙腈-水-醋酸(体积比为60∶40∶1)为流动相,流速为1.0 mL/min,色谱柱为Intersil-ODS-3 C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)的色谱条件下得到了充分的分离。采用荧光检测器在激发波长460 nm、发射波长550 nm下检测。D,L-T4和L-T3分别在0.016～0.30 μg/μL和0.0067～0.22 μg/μL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(r＞0.999)。D,L-T4和L-T3的最低检出限分别为0.02 μg/mL和0.85 μg/mL(S/N=3)。在D-T4、L-T4、L-T3质量浓度分别为0.10 μg/μL下测得峰面积的相对标准偏差分别为3.40%,1.63%,3.30%(n=7)。该方法成功地应用于甲状腺片中T4和T3的含量测定。     

引入三氟甲基侧基对对苯醚型聚酰亚胺薄膜吸水性及水蒸汽透过性的影响

合成了3种含三氟甲基的芳香二胺,进而与3,3′,4,4′-联苯四甲酸二酐(BPDA)缩聚,得到3种对苯醚型含氟聚酰亚胺薄膜,并由4,4′-二氨基二苯醚（4,4′-ODA）与BPDA缩聚得到聚酰亚胺薄膜。 对4种聚酰亚胺薄膜的水蒸汽透过率、吸水性和热学性能的测试结果表明,其中聚合物PI-1（2,2′-BTF-4,4′-BADE+BPDA;BTF：双三氟甲基;BADE：二氨基二苯醚）的水蒸汽透过率为7.70 g/（h·m2）,吸水率为0.67%,玻璃化转变温度为259.74 ℃,质量损失5%的温度为521.40 ℃,具有良好的水蒸汽透过性和低吸水性。     

不同比例的s-BPDA/i-BPDA型聚酰亚胺共聚结构与性能关系

由不同比例的二酐单体3,3′,4,4′-联苯四酸二酐(s-BPDA)/2,2′,3,3′-联苯四酸二酐(i-BPDA)与二胺单体4,4′-二氨基二苯醚(4,4′-ODA)制得了一系列共聚可溶聚酰亚胺. 采用DSC 、TGA和拉伸等测试方法对所得共聚聚酰亚胺进行了表征, 实验结果表明, 所得聚酰亚胺具有优异的力学性能和热稳定性, 并且随着i-BPDA含量的增加, 聚酰亚胺的溶解性提高, 玻璃化转变温度(Tg)升高, 中间体聚酰胺酸的固有黏度降低.     

Measurement of aflatoxin M1 in milk by ultra-high-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry

A sensitive method was developed using ultra-high-performance liquid chromatography (UHPLC)/MS/MS with positive electrospray ionization for determining aflatoxin M1 (AFM1) in milk and milk powder. A 50 mL quantity of low-fat liquid milk containing 100 ng/L AFM1, was prepared using immunoaffinity columns with a mean recovery rate of 79% (n = 3). UHPLC columns (BEH C18, BEH HILIC, and HSS T3) greatly reduced the chromatographic time and lowered the instrumental detection limits (IDLs) 16 to 58 times compared to an HPLC column (Betabasic C18). The HSS T3 column was chosen because it provided a low IDL (0.11 pg) and the lowest ion suppression of signal intensity (63.4%) among the tested columns. Matrix-fortified calibration curves were used for quantification and showed good linearity (r > 0.997) at 0.05-500 ng/mL. The LOD was 0.18 ng/kg for milk and 2.08 nglkg for milk powder, based on the signal intensity of the confirmatory product ion (m/z 259.1), which was less abundant than the quantitative product ion (m/z 273.1). Certified reference materials of milk powder at three levels (<0.05, 0.111 +/- 0.018, and 0.44 +/- 0.06 microg/kg) were measured within a day and between days; the results were all close to the certified levels with low variations (RSDs < 15%), showing good precision and accuracy.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛奶和奶粉中的二氰二胺、三聚氰胺和三聚氰酸

建立了一种超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶和奶粉中二氰二胺(DCD)、三聚氰胺(MEL)和三聚氰酸(CY)的分析方法。样品用5%(质量分数)三氯乙酸水溶液提取,无需净化和浓缩,用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.8 μm)分离,以乙腈和乙酸铵作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正、负离子(ESI^±)模式同时电离,多反应监测模式进行检测。结果表明:在5.0～200.0 μg/L范围内线性关系良好(r≥0.995)。牛奶中3种化合物在0.02、0.10、0.20 mg/kg的添加回收率为60.0%～105.8%,相对标准偏差(RSD, n=6)为4.2%～13.6%;奶粉中3种化合物在0.05、0.10、0.20 mg/kg的添加回收率为78.0%～115.0%, RSD (n=6)为2.7%～7.5%。牛奶中方法的定量限(信噪比为10)为0.02 mg/kg,奶粉中方法的定量限为0.05 mg/kg。该方法简单、快速、灵敏、准确,适合于牛奶、奶粉等乳及乳制品中DCD、MEL和CY的快速、高灵敏的分析检测。     

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法测定海洋沉积物中的苯系物

利用顶空固相微萃取（HS-SPME）与气相色谱-质谱（GC-MS）联用建立了测定海洋沉积物中的苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯以及苯乙烯等7种常见苯系物的检测分析方法。对无机盐的加入、平衡时间、萃取温度、萃取时间、解吸温度和时间等多个固相微萃取条件以及色谱条件进行了优化,内标法定量。结果表明：在0.500~20.0 ng/g范围内7种苯系物的线性关系良好,相关系数在0.995~0.999之间;方法检出限为0.0818~0.175 ng/g（干重）;日内和日间重现性较好,相对标准偏差分别为1.2%~3.6%（n=5）和0.4%~6.3%（n=3）;在每1.00 g海洋沉积物样品中2.0和15.0 ng加标水平下,平均加标回收率分别为61.7%~79.5%和77.1%~85.6%,相对标准偏差分别为5.4%~9.6%和3.9%~7.6%（n=5）。该方法快速、灵敏、简便,准确度高,重现性好,适合海洋沉积物样品中苯系物的痕量分析。     

中性解吸电喷雾萃取电离质谱法直接检测蜂蜜中的敌敌畏

采用中性解吸电喷雾萃取电离质谱( ND-EESI-MS)技术,在无需样品预处理的条件下,建立了对蜂蜜中敌敌畏直接快速检测的方法。在正离子模式下,敌敌畏质子化离子峰位于 m/z 223,二级特征离子为m/z 109和127。在优化的条件下,以m/z 127的信号强度为定量指标,建立了蜂蜜中敌敌畏残留的定量检测方法。结果表明,在蜂蜜基质中,敌敌畏在5~1000 ng/mL浓度范围内与m/z 127的信号强度线性关系良好,相关系数为0.998,检出限为1.0 ng/mL(S/N=3);蜂蜜中3个加标水平(10,30和400 ng/mL)的敌敌畏的回收率为93.0％~103.0％,精密度(RSDs)小于4.4％。同时采用气相色谱(火焰光度检测器)方法作为对照方法,检测敌敌畏加标蜂蜜样品,结果表明,加标蜂蜜在5~1000 ng/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好,相关系数为0.999,检出限为1.6 ng/mL;10,30和400 ng/mL 3个水平加标蜂蜜的回收率为94.9％~110.3％,精密度小于7.6％。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中6种头孢菌素类抗生素残留

建立了QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）同时测定牛奶中6种头孢菌素类抗生素的分析方法。牛奶样品加入含1%（v/v）醋酸的乙腈溶液提取,于45℃氮吹浓缩,经100 mg C18吸附剂净化后,采用HSS T3柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）分离,以0.1%（v/v）甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源、正离子模式（ESI⁺）下电离,多反应监测（MRM）模式下检测,外标法定量。结果表明,6种头孢菌素类抗生素在2~200 μg/L质量浓度范围内均呈良好的线性关系,相关系数（r）均大于0.999,方法的检出限为0.2~0.6 μg/kg、定量限为0.8~2.0 μg/kg。在8、16和80 μg/kg的加标水平下,6种头孢菌素类抗生素的回收率为75.1%~94.4%,相对标准偏差为0.63%~8.3%。该方法简单快捷,准确可靠,适用于牛奶中头孢菌素类抗生素残留的同时测定。     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时检测人尿中12种单羟基多环芳烃代谢物

建立了高效、准确的同时测定人体尿样中多种多环芳烃代谢物的方法。取10.0 mL尿液,酶解,经固相萃取净化浓缩、0.2 μm滤膜过滤后,以Acquity UPLC^®HSS T3（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）为分析柱,甲醇和水为流动相,采用负离子电喷雾多反应监测模式检测样品中多环芳烃代谢物的含量。12种多环芳烃代谢物在0.04~20.0 μg/L范围内线性关系良好,相关系数>0.99,方法检出限为0.01~0.41 μg/L,平均回收率为80.0%~105%,批内RSD为1.21%~9.12%,批间RSD为4.43%~19.7%。应用该方法对淮河流域某区域的100份人体尿样进行了检测,多环芳烃代谢物的检出率为98%。该方法操作简单,灵敏度高,选择性好,可同时检测尿中12种羟基多环芳烃代谢物。     

气相色谱-串联质谱法测定得克隆及其相关化台物在土壤样品中的含量

建立了得克隆(DP)及其脱氯产物和结构类似物等共11种化合物的气相色谱-串联质谱联用分析方法,并用于环境土壤中目标物的分析和污染特征研究.土壤样品抽提液经多段硅胶-氧化铝柱净化后,采用如下仪器条件分析:电子轰击电离源;选择反应离子对监测模式;DB-5HT毛细管柱(15 m×0.25 mm i.d.,0.1μm);进样口温度260℃,传输线温度280℃,离子源温度250℃;无分流进样1μL,载气为氦气(1.5 mL/min).实验结果表明,测定DP及其相关化合物的标准曲线线性范围为4~5个数量级,线性相关系数在0.9977~0.9999之间,仪器检出限在0.005~0.100 pg之间,方法检出限为0.25~5.00 fg/g,50 pg/μL标准样品平行5次进样的相对标准偏差(RSD)为1.1%~19.8%.对某典型污染区及其周边地区土壤进行分析,其中DP及相关化合物的总浓度在0.275~681 ng/g dw之间,检出率100%;单个目标物浓度在n.d.~537 ng/g dw之间,其中anti-DP和syn-DP为优势污染物,样品及质控样品中两种回收率指示物的加标回收率分别为55.0%~103.0%和83.4%~107.0%,空白/基质加标样品中目标物的平均回收率和RSD分别为53.9%~117.0%和6.0%~19.1%.     

Simultaneous quantification of T4, T3, rT3, 3,5‐T2 and 3,3′‐T2 in larval zebrafish (Danio rerio) as a model to study exposure to polychlorinated biphenyls

Environmental toxicants that interfere with thyroid hormone (TH) signaling can impact growth and development in animals and humans. Zebrafish represent a model to study chemically induced TH disruption, prompting the need for sensitive detection of THs. Simultaneous quantification of 3,3′,5‐triiodo‐l ‐thyronine (T3), thyroxine (T4), 3,3′,5′‐triiodo‐l ‐thyronine (rT3), 3,5‐diiodo‐l ‐thyronine (3,5‐T2) and 3,3′‐diiodo‐l ‐thyronine (3,3′‐T2) in zebrafish larvae was achieved by ultra‐performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry in positive ion mode. Solid‐phase extraction with SampliQ cartridges and derivatization with 3 m hydrochloric acid in n‐butanol reduced matrix effects. Derivatized compounds were separated on an Acquity UPLC BEH C₁₈ column with mobile phases consisting of 0.1% acetic acid in deionized water and 0.1% acetic acid in methanol. The limits of detection ranged from 0.5 to 0.6 pg injected on column. The method was validated by evaluating recovery (77.1–117.2%), accuracy (87.3–123.9%) and precision (0.5–12.4%) using diluted homogenized zebrafish embryos spiked with all target compounds. This method was then applied to zebrafish larvae collected after 114 h of exposure to polychlorinated biphenyls (PCBs), including PCB 28, PCB 66 and PCB 95, or the technical mixture Aroclor 1254. Exposure to PCB 28 and PCB 95 increased the T4:T3 ratio and decreased the T3:rT3 ratio, demonstrating that this method can effectively detect PCB‐induced alterations in THs.     

高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定奶粉中的低聚果糖

建立了高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法测定奶粉中低聚果糖的方法。奶粉样品用水溶解,加乙酸锌沉淀蛋白,经离心、0.22 μm粒径的微孔膜过滤后,采用Carbohydrate色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.6 μm)进行分离,以乙腈与0.1%乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。质谱采用正离子Target-MS/MS模式,在分离窗口为m/z 4.0和碰撞能为30 eV的条件下,提取响应值较高且在待测样品中无干扰的目标子离子的精确质量数,此方法能够很好地排除样品中的基质干扰。在所建立的色谱-质谱条件下,蔗果三糖(GF₂)、蔗果四糖(GF₃)和蔗果五糖(GF₄)能够得到较好的分离,高分辨质谱提取的质量准确度小于5×10^-6(5 ppm),整个分析时间只需10 min。该方法对GF₂和GF₃的检出限可达100 μg/kg,对GF₄的检出限可达55 μg/kg。待测物质采用外标法定量,线性关系良好,相关系数均大于0.998。通过加标验证,在5、10和20 mg/kg 3个加标水平下,奶粉中GF₂、GF₃和GF₄的平均回收率在75.8%~107.3%范围内,相对标准偏差(RSD)在1.6%~8.3%范围内。该方法样品前处理过程简单,只需沉淀蛋白质,通过二级子离子的选择即可排除基质干扰,分析时间短,测定结果准确、可靠,适用于任何奶粉的高通量测定。