高效液相色谱-二极管阵列检测法测定L-丙氨酸与L-氨基丙醇

建立了柱前衍生同时测定L丙-氨酸、L氨-基丙醇的高效液相色谱方法。色谱条件为:Shim-pack VP-ODS柱(150 mm×4.6 mm.ID.,5μm);二极管阵列检测器;流动相为甲醇-磷酸盐缓冲溶液(NaH2PO4浓度为0.02 mol/L,pH 4.00 H3PO4调节)(体积比为30∶70),流速为0.5 mL/m in,检测波长为222 nm,柱温为30℃。L丙-氨酸与L氨-基丙醇的线性范围分别为2.30~178 mg/L和9.3~8690 mg/L;检出限分别为1.1 mg/L和1.6 mg/L;日内、日间测定的相对标准偏差(RSD)分别为0.22%、0.46%和0.02%、0.03%。     

阴离子交换色谱-荧光检测法测定人体血清中酪氨酸及其代谢产物

建立了阴离子交换色谱-荧光检测法(AEC-FLD)同时测定人体血清中的酪氨酸(Tyr)、对羟苯基乳酸(PHPLA)和对羟苯基丙酸(PHPA)的分析新方法。样品经乙腈处理沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样检测。采用IonPac AG21保护柱(50×2mm)、IonPac AS21分析柱(250×2mm),流动相为4mmol/L NaOH溶液,流速为0.45mL/min,荧光检测器的激发波长和发射波长分别为277nm和340nm。优化条件下三种物质能得到良好的分离和检测。Tyr、PHPLA和PHPA的线性范围分别为0.30~25mg/L、0.025~2mg/L和0.025~2mg/L,相关系数在0.9998~0.9999之间,检出限(S/N=3)分别为0.024mg/L、0.020mg/L和0.019mg/L。三个水平的加标回收率在72.6%~99.1%之间,其相对标准偏差均小于6.62%。该方法简单、快速、准确,可用于实际样品的测定。     

高效液相色谱法测定饮料中的呋喃-2,5-二甲酸

建立了饮料中呋喃-2,5-二甲酸含量的高效液相色谱(HPLC)分析方法,采用Venusil HILIC(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;柱温40℃;流动相为0.02 mol/L乙酸铵(冰乙酸调至p H 3.5)-乙腈(50∶50);流速1.0 m L/min;检测波长265 nm。呋喃-2,5-二甲酸在0.5~100 mg/L浓度范围内线性良好,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.15 mg/kg和0.5 mg/kg,回收率为93.2%~109.0%,相对标准偏差(RSD,n=6)为0.9%~4.2%。该方法快速、操作简便、灵敏度高,适用于饮料中呋喃-2,5-二甲酸含量的测定。     

柱前衍生高效液相色谱法测定二乙醇胺脱氢产物亚氨基二乙酸和甘氨酸

以对甲苯磺酰氯(PTSC)为衍生剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定二乙醇胺脱氢产物中亚氨基二乙酸(IDA)和甘氨酸(Gly)含量的分析方法。IDA和Gly与衍生剂在碱性(pH 11)条件下于45℃反应15 min,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析。衍生化产物采用VP-ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以0.03 mol/L醋酸铵溶液(pH 5.5)为流动相A、乙腈为流动相B(体积比为87∶13),进行等度洗脱,流速为1 mL/min,并采用配有紫外检测器的高效液相色谱仪测定,检测波长为235 nm。该法在IDA质量浓度为900~2 100 mg/L、Gly质量浓度为20~100 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.999。IDA和Gly的检出限(LOD)分别为0.089 7 mg/L和0.026 2 mg/L,加标回收率分别为98.7%~99.3%和98.0%~99.5%,相对标准偏差(RSD)分别为0.89%~1.23%和0.95%~1.11%(n=3)。该法具有反应条件温和、准确性高的特点,可用于工艺生产中IDA和Gly含量的测定。     

高效液相色谱法测定水性涂料中的酚类防霉剂

建立了简便、准确的高效液相色谱法检测涂料样品中五氯苯酚(PCP)、四氯苯酚(TeCP)和邻苯基苯酚(OPP)。选用C18柱为分离柱,以甲醇-10 mmol/LNH4Ac为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器检测,检测波长为220 nm。在该色谱条件下,PCP、TeCP、OPP分析线性范围分别为0.02~200 mg/L,0.02~200 mg/L,0.04~200 mg/L;最低检测浓度分别为0.01、0.01、0.02 mg/L,分别相当于涂料中的质量分数为5.0×10-4%,5.0×10-4%,1.0×10-3%;方法加标回收率为96.6%~103.6%,相对标准偏差为0.98~4.3%(n=7)。本法能满足涂料中PCP、TeCP、OPP的分析测定。     

高效液相色谱法同时测定食品中丙酸钙(钠)和双乙酸钠

建立高效液相色谱法同时测定食品中的丙酸钙(钠)和双乙酸钠。采用Acclaim120 C_(18)色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),以1.5 g/L磷酸氢二铵溶液(用1 mol/L磷酸溶液调pH至2.7~3.5)–甲醇混合液(体积比为95∶5)作为流动相,流量为1.0 mL/min,在214 nm波长下检测。丙酸与双乙酸钠的质量浓度在0.05~0.5 mg/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。丙酸和双乙酸钠的加标回收率分别为95.58%~98.95%,96.12%~99.25%,测定结果的相对标准偏差分别为1.50%,1.41%(n=6)。该法适用于糕点及调味品中丙酸钙(钠)和双乙酸钠含量的检测。     

反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的尿囊素和泛醇

采用反相高效液相色谱法同时分离测定化妆品中的尿囊素和泛醇。用YWG C 18 柱(250 mm×4.6 mm i.d., 10 μm)分离,以0.02 mol/L 磷酸二氢钾-甲醇(体积比为90∶10)为流动相,检测波长210 nm。尿囊素的最低检测量为8 ng,最低检测浓度为0.4 mg/L ;泛醇的最低检测量为32 ng,最低检测浓度为1.6 mg/L 。尿囊素和泛醇的回收率分别为82.03%～103.80%和95.50%～109.12%;选择唇膏等4个不同样品作了精密度实验,样品中目标组分含     

毛细管电泳-场强放大堆积技术对制剂中磺胺嘧啶和磺胺甲噁唑的测定研究

利用高效毛细管电泳-场强放大柱内堆积技术分离测定磺胺嘧啶(SD)和磺胺甲噁唑(SMZ)。采用未涂层熔融石英毛细管柱(60.2 cm×75μm,有效长度50 cm),以50 mmol/L NaH2PO4(pH6.0)为运行缓冲液,分离电压27.5 kV,柱温25℃,检测波长214 nm进行测定。进样前压力进水3.42 kPa×12 s;电动进样-10kV×9 s。SD和SMZ的线性范围分别是0.05~10.00 mg/L(r=0.999 9),0.025~5.00 mg/L(r=0.999 4),检出限分别为1.74、1.39μg/L;将此方法应用于实际样品测定,SD回收率为98%~103%,SMZ回收率为97%~103%。     

高效液相色谱/荧光法测定血浆、红细胞与尿液中的硫胺素及其磷酸酯

建立了同时测定血浆、红细胞、尿液中硫胺素(T)、一磷酸硫胺素(TMP)、二磷酸硫胺素(TDP)的柱前衍生/反相高效液相色谱-荧光检测法。样品经高氯酸除蛋白,铁氰化钾衍生后,采用反相色谱柱分离,荧光检测器测定,外标法定量。色谱柱为C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm i.d.),流动相为0.2 mol/L KH2PO4溶液(pH 7.0,含0.000 3 mol/L四丁基氢氧化铵)-甲醇和甲醇-水,采用梯度程序进行洗脱,流速为0.8mL/min。荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为435 nm。结果表明:T,TMP在0.5~20.0μg/L,TDP在5.0~200.0μg/L质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数分别为0.99,0.98,0.99。T,TMP,TDP的平均回收率为86.8%~110.2%,相对标准偏差(RSDs)为2.5%~10.9%。3种化合物在血浆及红细胞中的检出限(LODs)为0.03~0.35μg/L,定量下限(LOQs)为0.09~1.18μg/L。T在尿液中的检出限(LODs)为1.58μg/L,定量下限(LOQs)为5.26μg/L。该方法的准确度和精密度均较高,能够满足临床检测和科研需要。     

高效液相色谱法测定化妆品中4种禁用醛酮化合物

建立了同时测定化妆品中4种禁用醛酮化合物(巴豆醛、苯乙酮、2,4-二羟基-3-甲基苯甲醛和2-亚戊基环己酮)的高效液相色谱(HPLC)分析方法。样品使用50%乙腈(体积比)溶液提取,经AQ-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离后,高效液相色谱/二极管阵列检测器检测,以保留时间和紫外吸收光谱定性,外标法定量,高效液相色谱-质谱/质谱法确证。结果表明,4种醛酮化合物在0.05~2.0 mg/L质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数均不小于0.999 9;方法检出限和定量下限分别为0.5~1.0 mg/kg和1.5~3.0 mg/kg。样品加标回收率为89.0%~106.7%,相对标准偏差(RSDs,n=6)为2.0%~6.9%。该方法准确可靠,适用于化妆品中4种禁用醛酮化合物的测定。     

离子液体[BMIM]BF_4对甘草酸及其衍生物色谱行为的影响

将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([BMIM]BF4)加入到高效液相色谱流动相中,研究其对甘草酸(GL)及其衍生物甘草次酸(GA)和单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)色谱行为的影响。结果显示,加入离子液体后的流动相能够明显改善色谱峰形、减少峰拖尾、增大峰面积和峰高、提高检测灵敏度,并缩短GL,GA及GAMG 3种化合物的同时检测时间,提高检测效率。优化色谱条件为:InertSustain C18(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)反相色谱柱为分离柱,柱温40℃;甲醇-1.0 mmol/L[BMIM]BF4(体积比81∶19,乙酸调至pH 3.0)为流动相,流速0.7 mL/min,进样体积20μL,检测波长251 nm。GL,GA及GAMG在5.00~100 mg/L范围内线性关系良好(r≥0.999 8),检出限分别为0.02,0.04,0.09 mg/L;加标回收率分别为100.1%,98.0%,98.2%,RSD为0.18%~0.43%。同时测定GL生物转化体系中3种组分,结果满意。     

HPLC法同时测定石蒜中加兰他敏和石蒜碱

建立了高效液相色谱同时测定石蒜中加兰他敏和石蒜碱含量的方法。 采用phenomenex-C18色谱柱,以乙腈(A)-0.1%TFA水溶液(B)为流动相梯度洗脱,检测波长289 nm。 结果表明,加兰他敏和石蒜碱均在0.5～10 mg/L(r=0.9999)呈现良好的线性关系,最低检测限(S/N=3)分别为0.09和0.15 mg/L,平均加样回收率分别为99.53%和96.82%。 该方法简单、快速、准确,适合于石蒜中加兰他敏和石蒜碱的测定。     

HPLC法同时测定白花蛇舌草中对香豆酸和熊果酸的含量

建立高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸含量的方法。采用Eclipse SB–C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇–0.05%甲酸梯度洗脱,流量1 m L/min,对香豆酸和熊果酸的检测波长分别为310 nm和210 nm,柱温30℃。对香豆酸和熊果酸含量分别在0.001 79~0.028 64 mg/m L和0.021 3~0.340 8 mg/m L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数r分别为0.999 8,0.999 6。对香豆酸和熊果酸的平均加标回收率分别为98.59%,98.23%,测定结果的相对标准偏差分别为0.81%,0.94%(n=6)。样品溶液在24 h内稳定。该方法适用于白花蛇舌草药材中对香豆酸和熊果酸的含量测定。     

以咪唑离子液体为紫外吸收试剂的高效液相色谱/间接紫外检测法分离测定烷基磺酸盐

建立了以咪唑离子液体为背景紫外吸收试剂间接检测无紫外光吸收的烷基磺酸盐的高效液相色谱法。该方法采用反相C18色谱柱,以咪唑离子液体-有机溶剂为流动相,实现了2种烷基磺酸盐的分离和检测。研究了检测波长、有机溶剂和咪唑离子液体种类、浓度、pH值等因素对分离和测定的影响,探讨了保留规律,优化了色谱条件。结果表明,在柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,以0.7 mmol/L 1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐水溶液(2 mmol/L磷酸二氢钠-磷酸调至pH 3.0)-甲醇(55∶45)作为流动相,戊烷磺酸钠和庚烷磺酸钠可在10 min内完全分离,线性范围分别为0.8~200 mg/L和2.5~200 mg/L,线性系数均达到0.999以上,检出限分别为0.24,0.75 mg/L。将方法应用于环境水样的测定,加标回收率为98.3%~99.1%,相对标准偏差小于1.5%。该方法准确、可靠,可以满足定量分析的要求。     

高效液相色谱-质谱法同时测定辛夷提取物中4种木脂素成分

建立了高效液相色谱-质谱-电雾式检测器( HPLC-MS-CAD)联用技术同时测定辛夷中4种木脂素类成分的定量分析方法。采用 YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水梯度洗脱,柱温25℃,流速1 mL/min,检测波长278 nm,紫外检测器后3：7分流,分别进入质谱和电雾式检测器进行检测。以木兰脂素为内参物,建立松脂素二甲醚、里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A与内参物的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评。同时采用外标法测定辛夷提取物中4种木脂素成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证所建立方法的准确定。本方法对松脂素二甲醚、木兰脂素、里立脂素B二甲醚和表木兰脂素A 4种木脂素类成分的检出限分别为0.34,0.55,0.50和0.58 mg/L,线性范围分别为6.8~270 mg/L,11~546 mg/L,2.0~100 mg/L 和2.3~116 mg/L,相关系数为0.9995~0.9998,加样回收率( n=9)为98.2％~99.5％,采用校正因子计算的含量值与外标法计算的含量值之间无显著差异,所建立的方法准确、可行,可用于中药辛夷的质量评价。     

非抑制电导检测离子色谱法测定硅藻培养液中硅酸根

采用戴安阴离子AS23(4 mm×250 mm)分析柱和AG23(4 mm×50 mm)保护柱、恒温电导检测器,建立了测定硅藻培养液中硅酸根(SiO2-3)含量的非抑制电导检测离子色谱法。以4 mmol/L碳酸钠为淋洗液,淋洗液流速1.0 mL/min,进样体积100 μL,采用峰高定量。该法测定SiO2-3的线性范围为0~40 mg/L,检出限为0.017 mg/L,重复测定同一标样的相对标准偏差( RSD,n=7 ) 小于5%,峰面积和峰高的RSD分别为10.9%、4.8%。测定不同生长时期硅藻培养液中的SiO2-3,样品的加标回收率为102%~120%。该法灵敏、准确、简便易行,适用于硅藻培养液中SiO2-3的检测。     

高效液相色谱紫外检测法同时测定小鼠红细胞中S-腺苷甲硫氨酸和S-腺苷同型半胱氨酸

建立了高效液相色谱紫外检测同时测定红细胞中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)和S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)的方法。采用ZORBA×Eclipse×DB-C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以含3 mmol/L庚烷磺酸钠的40 mmol/L磷酸钠缓冲溶液(pH 3.72)-甲醇(95∶5,V/V)为流动相,流速0.9 mL/min,柱温35℃,紫外检测波长设置:0～8.00 min,450 nm;8.01～16.00 min,260 nm。SAH与SAM的线性范围分别为0.25～3.0 mg/L和0.50～10 mg/L,检出限分别为0.15和0.07 mg/L。方法日内和日间相对标准偏差(RSD)分别小于6.5%和7.4%,平均回收率为80.9%～116.2%。利用本方法对19例叶酸缺乏孕小鼠和11例健康对照孕小鼠红细胞进行测定。结果表明:叶酸缺乏组SAH明显高于健康对照组,而SAM两组间无显著差异。     

柱前衍生化HPLC法测定酵母细胞壁中的甘露聚糖与β-葡聚糖

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)为柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱法,建立了同时测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖的方法。样品中的多聚糖经盐酸高温水解得到甘露糖和葡萄糖,经PMP衍生后,以0.02 mol/L乙酸铵-乙腈(80.5∶19.5)为流动相等度洗脱,反相C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,紫外检测器(波长250 nm)检测,所测2种单糖的含量通过换算后得到甘露聚糖和β-葡聚糖的含量。结果表明,甘露糖和葡萄糖在10.0~1 000 mg/L质量浓度范围内与对应峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.999。样品在28.0~80.0 mg范围内加标水平的平均回收率为88.1%~91.0%,相对标准偏差(RSD)小于3%,甘露糖和葡萄糖的检出限(LOD)分别为0.10 mg/L和0.08 mg/L。该方法灵敏度高、准确性好、实用可靠,适用于酵母细胞壁样品中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的分析测定。     

高效液相色谱法测定食品中的爱德万甜

建立了食品中爱德万甜检测的高效液相色谱分析方法。样品经甲醇-水(50∶50,体积比)溶液提取10 min,离心后取上清液进行分析。采用Agilent TC-C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,以甲醇-0.02 mol/L乙酸铵(53∶47,体积比)等度洗脱,在280 nm波长下检测,外标法定量。结果表明,目标化合物在1.0~200.0 mg/L范围内呈良好的线性,相关系数(r)为0.999 8,饮料、酸奶和蛋糕的检出限(S/N≥3)分别为0.6、1.5、9.0 mg/kg。方法的回收率为90.9%~103.4%,相对标准偏差(RSD,n=5)为1.1%~4.5%。该方法的色谱分离效果好,干扰少,准确度高,可用于实际样品中爱德万甜的测定。     

ASE-HPLC检测某型号球形发射药中的叠氮硝胺、硝化甘油、Ⅱ号中定剂含量的研究

采用快速溶剂萃取(ASE)技术和高效液相色谱法测定某球形药中叠氮硝胺(DIANP)、硝化甘油(NG)和II号中定剂(C2)的含量.ASE提取条件:二氯甲烷做萃取溶剂,萃取温度100℃,静态萃取10 min,萃取2次.HPLC测定条件:YWG C18柱(150×4.6 mm,10μm),以甲醇和水作为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长210nm.测定结果表明DIANP、NG、C2平均回收率分别为99.6%、100.3%、99.4%,RSD分别为0.7%、0.8%、0.9%(n=5),检出限分别为2.1、1.5和0.2 mg/L,线性范围分别为0.02~0.98 g/L,0.03~1.38 g/L,0.002~0.124g/L.用此方法共检测某批球形发射药样品5份,检测结果与滴析-HPLC法检测结果相当.