高效液相色谱法测定红霉素、甲红霉素和罗红霉素的研究

建立了高效液相色谱-荧光法同时测定红霉素、甲红霉素、罗红霉素的方法。该方法以9-芴代甲氧苯酰氯(FMOC-CL)为衍生试剂,以V(乙腈)∶V(磷酸二氢钾)=3∶1为反应体系,于50℃反应1 h。液相色谱分析条件为:Extend-C18柱(4.6 mm i.d.×150 mm),乙腈-25 mmoL磷酸二氢胺(pH 7)为流动相,梯度淋洗;柱温30℃,流速1.5 mL/min,激发波长255 nm、发射波长315 nm。线性范围分别为红霉素0.5~100μg、甲红霉素0.5~100μg、罗红素0.1~150μg。检出限为红霉素1μg/mL、甲红霉素1μg/mL、罗红霉素0.25μg/mL。加标回收率为90%~97%,相对标准偏差为3.5%~7.9%。     

反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺

建立了运用反相高效液相色谱法测定人尿中利凡诺的方法.采用Spherisorb C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm);流动相: V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(0.2 mol/L NH4Ac)=60∶37∶3;流速: 1.0 mL/min;柱温: 40 ℃;荧光检测器: 激发波长360 nm,发射波长500 nm.在5 ng/mL～1 μg/mL质量浓度范围内,呈现良好线性(r=0.9999),检出限为1 ng/mL.     

荧光检测-高效液相色谱法测定水果、蔬菜中抗蚜威残留量

建立了水果、蔬菜中抗蚜威残留的荧光检测-高效液相色谱法。样品以乙腈提取,固相萃取氨基小柱(LC-NH2)净化,Waterscarbamateanalysis(3.9mm×150mm,4μm),V(甲醇)∶V(水)∶V(乙腈)=16∶68∶16为流动相,柱温30℃,流速为1.5mL/min进行分离,用荧光检测器进行检测,激发波长和发射波长分别为317nm,392nm。回收率在98.5%~105.4%,相对标准偏差为3.0%~4.6%,检出限为0.01mg/kg。     

微流蒸发光散射检测器的研制及评价

构建了适用于纳升级到微升级流量的毛细管分离体系的微流蒸发光散射检测器(μELSD),实现了其与毛细管液相色谱(eLC)的联用.对雾化器孔径和雾化毛细管内径、蒸发管内径和长度、光散射池尺寸、雾化毛细管位置和辅助载气流量等参数进行了优化.在最优条件下,微流蒸发光散射检测器检出限为直接进样葡萄糖1 ng(S/N＞ 10),线性范围0.01～1.0 μg,重复性好,峰面积RSD(n=6)为0.4％,峰高RSD(n=6)为0.3％.本检测器已成功应用cLC-μELSD平台,使用C18毛细管色谱柱(内径250 μm),0.1％甲酸铵溶液(pH 4.5)-甲醇(60∶40,V/V)为流动相,分离检测了3种常用甜味剂,表明本研究构建的系统可以应用于实际分离检测中,具有分析时间快、溶剂消耗量少、样品需求量小的优点.     

高效液相色谱法测定生活饮用水中的苯并[a]芘

建立高效液相色谱二极管阵列检测器检测生活饮用水苯并[a]芘的测定方法。采用C18反相色谱柱(150mm×4.6 mm,5μm),在流动相为甲醇–水(体积比为90∶10)、流量1.0 mL/min、检测波长295 nm、柱温35℃、进样体积20μL的条件下测定生活饮用水中苯并[a]芘。该方法检出限为6 ng/L,线性范围0～100 ng/mL,加标回收率为88.1%～93.4%,测定结果的相对标准偏差为1.06%(n=9)。该法样品预处理简单,分离度高,分析时间短,适用于生活饮用水中苯并[a]芘的准确定性定量测定。     

高效液相色谱-喷壁/薄层安培检测器用于同时测定5种环境优先污染酚

结合传统的喷壁式和薄层式安培检测器,制备了一种新型的喷壁/薄层安培检测器。联合高效液相色谱(HPLC)同时对5种环境优先污染酚进行了检测。实验发现,安培检测工作电极面积的增大会导致响应电流的增大,但同时也会增大噪声,因此,基于信噪比优化电极面积是重要的。选用色谱柱SHIM-PACK VP-ODS(150 mm×4.6 mm),流动相V(甲醇)∶V(0.1 mol/L PBS,pH=7.5)=40∶60,柱温40℃,流速1 mL/min,进样量20μL,安培检测电位为1.0 V,紫外检测波长为220 nm,喷壁-薄层安培检测器不经富集对对硝基酚、苯酚、间甲酚、2,4-二氯苯酚和2,4,6-三氯苯酚共5种酚类物质的检测下限均低于1μg/L(S/N=3),优于相同条件下的紫外检测器和商品电化学检测器。用于实际水样分析亦获满意结果。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定烟草中的水溶性糖

采用Waters高效糖分析柱,梯度洗脱分离,建立了高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC—ELSD）同时测定烟草中水溶性糖的新方法。乙腈-水为流动相,流速1．0mL／min,柱温30℃,蒸发光散射检测器漂移管温度80℃,氮气作载气,流速2．00L／min。水溶性糖的线性范围：鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖0．5—30μg,检出限低于12．5ng;木糖、阿拉伯糖、甘露糖、麦芽糖0．5—20μg,检出限低于25．0ng。8种水溶性糖的加标回收率范围为86．0％～102．4％;相对标准偏差（n=5）皆小于4．1％。     

全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用测定辣椒油中苏丹红

建立了全自动在线固相萃取-二维高效液相色谱与质谱联用快速测定辣椒油中的苏丹红Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ的方法。样品经乙腈和二氯甲烷萃取后,在一维色谱柱(Acclaim PAⅡ,150 mm×3.0 mm×3μm)上分离出苏丹红,通过阀的分段切换,依次富集在SPE柱(Acclaim 120 C18,10 mm×4.6 mm×5μm)上,在线完成净化和萃取富集;再通过阀切换将它们转移至二维色谱流路,在Acclaim 120 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×2.2μm)上分离检测。一维色谱以水-乙腈-甲醇/四氢呋喃(1∶1,V/V)为流动相,进样体积20μL,0.6 mL/min流速梯度洗脱和紫外-可见检测器(λ=254 nm)监测分离状况;二维色谱以水-乙腈-甲酸/乙腈(1∶1000,V/V)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱,采用单四极质谱仪,选择离子方式检测。整个分析流程27 min即可完成。4种苏丹红的保留时间的相对标准偏差均小于0.1%,色谱峰面积的相对标准偏差均小于2%(n=7);在0.6～60μg/L范围内峰面积与进样质量浓度的线性相关系数均大于0.9958;加标回收率为50%～97%;方法检出限均小于0.2μg/L(S/N=3)。测定结果令人满意。     

高效液相色谱法测定卡格列净中葡萄糖酸-δ-内酯的含量

提出了高效液相色谱-电雾式检测器法(HPLC-CAD)测定卡格列净中葡萄糖酸-δ-内酯(GDL)的含量。优化的色谱条件如下:Thermo Hypersil Gold Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(9+1)混合溶液,流量0.5mL·min~(-1),柱温30℃,进样量10μL;电雾式检测器(CAD)的雾化温度为50℃,载气压力427.5kPa。在上述的色谱条件下,GDL的线性范围为1.05~22.5mg·L~(-1),GDL的检出限(3S/N)为0.32ng。在3个浓度水平上进行加标回收试验,测得回收率在96.2%~103%之间。供试品加标溶液和对照品溶液在室温条件下放置12h内稳定,测定值的相对标准偏差(n=7)分别为1.8%,1.3%。     

高效液相色谱法测定瑞香狼毒根、茎、叶、花中7,8-二羟基香豆素的含量

建立了反相高效液相色谱法测定瑞香狼毒根、茎、叶、花中7,8二羟基香豆素含量的方法,同时利用二极管阵列检测器建立了7,8二羟基香豆素标准品纯度检测法和植物提取样品中7,8二羟基香豆素紫外光谱鉴定方法。色谱柱为AlltechC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇∶水(40∶60,V/V);流速为1.0mL/min;二级管阵列检测器检测,检测波长326nm;柱温28℃。线性范围1.4～880mg/L;线性回归系数大于0.9999;检出限为0.2mg/L(3σ)。测得瑞香狼毒根、茎、叶、花中7,8二羟基香豆素百分含量分别为0.37%、0.58%、1.76%和160%;其中叶样品中7,8二羟基香豆素的回收率为95.8%～100.8%;RSD为1.92%(n=6)。该方法简便,准确,线性范围宽,重现性好,适于对含有该成分的药物和药材进行质量评价。     

HPLC-MS/MS同时检测人血液中佐匹克隆、唑吡坦、扎来普隆和褪黑素

建立液相色谱串联质谱同时检测全血中佐匹克隆、唑吡坦、扎来普隆和褪黑素的方法。采用液液萃取进行提取,提取物以Inersil ODS(2.1×100 mm,3.5μm)色谱柱分离,以10 mmol/L的甲酸铵水溶液(体积分数0.1%甲酸)-乙腈(体积分数0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,液相色谱串联质谱检测。全血中佐匹克隆、唑吡坦和褪黑素的线性范围为0.20~100.0ng/m L,检出限为0.20ng/m L;扎来普隆的线性范围为0.50~100.0ng/m L,检出限0.50ng/m L。     

环境水体中亚硝态氮、硝态氮和总氮的液相色谱测定

建立了环境水体中NO2-、NO3-及总氮含量的液相色谱测定方法.采用Hypersil ODS(5μm,250mm×4.6mm i.d.)色谱柱;流动相:17.5mmoL/L KH2PO4-2mmol/L H3PO4缓冲液(pH3.5)-乙腈(体积比92.5:7.5);流速:0.8mL/min;柱温:30℃;紫外检测器:波长204nm.结果表明:水体中NO2-和NO3-的线性范围(以N计):1～80ng,r=0.999 9;方法检出限:NO2-0.4ng、NO3-0.09ng;回收率为NO2-99.2%～102.4%、NO3-98.7%～99.3%,RSD为0.79%和0.25%.     

液相色谱-质谱联用技术测定无糖食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖

建立了无糖食品中葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的高效液相色谱-串联四极杆质谱联用测定方法.本方法以水提取样品,以Waters Carbohydrate Analysis柱(300 mm×3.9 mm, 10 μm)分离,流动相为水-乙腈(15∶ 85, V/V),电喷雾负离子MRM模式检测.方法的检出限为0.1 g/kg;线性范围为2.5～125.0 mg/L;加标回收率为86.2%～97.7%;相对标准偏差为3.1%～8.7%.     

高效液相色谱分析七种氟苯甲酸示踪剂

建立了高效液相色谱法测定7种新型水文示踪剂氟苯甲酸的分析方法。使用C18(150 mm,4.6 mmi.d,5μm)色谱柱、乙腈∶水(磷酸盐)=20∶80(2.56 mmol/L)为流动相、紫外检测器,检测波长223 nm。考察了pH、缓冲溶液浓度、有机相浓度等对保留时间的影响。相对标准偏差1.2%~4.2%,线性范围0.05~5.6μg/L。方法的检出限为0.03~0.07μg/L。平均回收率93.3%~106.6%之间。     

河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中角黄素残留的超高效液相色谱法测定和超高效液相色谱-串联质谱法确证

建立了河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中角黄素残留的超高效液相色谱测定方法和超高效液相色谱-串联质谱确证方法。样品用抗氧化剂焦性没食子酸保护,乙腈均质提取,正己烷液-液分配净化,超高效液相色谱-紫外检测器测定,外标法定量,超高效液相色谱-串联质谱法确证。测定方法采用BEHC18色谱柱(50 mm×2.1 mm,i.d.1.7μm),流动相为V(0.1%的甲酸)∶V(乙腈)=3∶97,检测波长470 nm。实验结果表明,角黄素在0.05~2.0 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9999),在空白样品中,添加低、中、高3个浓度水平(0.05,0.1,1.0 mg/kg),角黄素的回收率均在82.52%~96.96%之间,相对标准偏差为6.9%~15%。方法的检出限(LOD)为0.02 mg/kg,定量限(LOQ)为0.05 mg/kg。串联质谱确证方法采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下以多反应监测(MRM)扫描方式检测,定性离子对565.5/203.2和565.5/133.1,定量离子对565.5/203.2。     

固相萃取反相高效液相色谱荧光检测法测定拟南芥中的生长素

建立了固相萃取反相高效液相色谱荧光检测法测定拟南芥中生长素的方法.采用Waters sunfire C18(150 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-10 mmol/L乙酸钠(20∶ 80, V/V,乙酸调节至pH 3.5)为流动相,在流速1 mL/min,进样量20 μL,柱温20 ℃,样品温度10 ℃,荧光激发和发射波长分别为275和345 nm条件下,分离测定了拟南芥中的植物生长素吲哚乙酸和吲哚丙酸含量.分离效果良好,线性范围分别为85.71 pg～21.43 ng和0.33 ng～1.29μg,相关系数分别为0.9992和0.9999,相对标准偏差小于5%,平均回收率分别为103.8%和102.6%.本方法可对少量模式植物样品进行灵敏、准确的定量分析.     

高效液相色谱-三重四极杆/复合离子阱质谱测定大鼠血浆中11种合成大麻素

建立并验证了一种用于定量检测大鼠血浆中11种合成大麻素(SCs)的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。选择Waters UPLC HSS T3(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈为蛋白沉淀剂(血浆∶乙腈=1∶9,V/V),实现了11种目标物质的色谱分离和检测。方法学验证数据表明,本方法在0.05～10 ng/mL范围内具有良好线性(R²>0.991),基质效应为69.5%～119.0%,回收率为43.8%～131.5%,相对标准偏差为4.0%～28.3%,定量限为0.05～1 ng/mL。本方法适用于血浆中SCs的定性定量检测。     

高效液相色谱法在长链烷基小檗碱衍生物定量分析中的应用

采用高效液相色谱法(HPLC)对8-十六烷基小檗碱的含量进行测定,色谱条件为Thermo Hypersil Gold C18柱(5μm,150 mm×4.6 mm),流动相:乙腈-20 mmol/L KH2PO4溶液(V/V=80:20,用H3PO4溶液调p H至4.0),柱温:30℃,流速:1.0 m L/min,进样量:50μL。方法检出限为4 ng/m L,线性范围20~3000 ng/m L,回归方程y=91.501x+578.98,相关系数R2=0.9993,回收率为78.3%~89.9%(n=6),日内和日间相对标准偏差分别为3.4%~5.1%和5.4%~7.4%(n=6)。方法可用于对添加8-十六烷基小檗碱的大鼠血浆的测试。     

液相色谱-电喷雾离子阱质谱对芥子碱的测定方法

探讨了采用液相色谱-电喷雾串联质谱法检测小鼠前列腺中芥子碱硫氰酸盐的方法。流动相为V(乙腈)∶V(0.5%乙酸)=20∶80,色谱柱为ZorbaxXDB-C18(150 mm×4.6 mmi.d.,5μm),流速为0.6 mL/min。芥子碱硫氰酸盐的准分子离子和二级碎片离子分别为m/z 304和m/z 251,方法的检出限为0.7μg/L,线性范围为2.7~80.5μg/L,r为0.9934,相对标准偏差为7.5%~12.9%,样品的回收率为81.2%~102.5%。     

高效液相色谱检测反应香精中的2-氨基-N-甲基-5-苯基咪唑并吡啶(PhIP)方法研究

建立了用高效液相色谱快速检测反应香精中2-氨基-N-甲基-5-苯基咪唑并吡啶的方法. 反应香精中的2-氨基-N-甲基-5-苯基咪唑并吡啶用二甲基甲酰胺直接超声振荡提取; 高效液相色谱的色谱柱为Eclipse XDB-C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm); 流动相为V(二甲基甲酰胺)∶V(甲醇)∶V(水)=8∶50∶42; 流速为0.5 mL/min; 光电二极管阵列检测器检测波长为UV-327 nm. 10种反应香精中均未检出该种物质, 回收率为78.9%～85.9%, 检出限为19.2 ng/mL.