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相似文献
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1.
快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的.使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质.本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等.  相似文献   

2.
快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。  相似文献   

3.
周丹  王延梅 《化学进展》2006,18(7):987-994
快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。  相似文献   

4.
羟乙基纤维素及蔗糖无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段   总被引:4,自引:0,他引:4  
提出以羟乙基纤维素、蔗糖和硼酸形成“互穿网络”无胶筛分介质,显著地提高了分离效率,分离了φX174/HaeⅢDNA的所有11个DNA片段,探讨了“互穿网络”无胶筛分机理。将该方法应有和于决定鳝鱼性别基因PCR扩增产物的分离与鉴定,结果较好。  相似文献   

5.
聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围DNA片段   总被引:1,自引:0,他引:1  
在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75 μm有效长度21.0 cm)分离DL5000 DNA Marker(DNA长度为100~5000 bp),研究筛分介质浓度、缓冲液pH、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链DNA片段的影响,优化出分离100~5000 bp DNA片段的最佳条件。毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度0.5%、缓冲液pH值8.0、电压12 kV、溴化乙锭浓度3.0 μg/mL。此条件下,对山梨醇脱氢酶基因(SDH)和乙烯受体基因(ETR1)的聚合酶链式反应(PCR)扩增产物同时检测,分离、鉴定效果良好。  相似文献   

6.
基于纤维素衍生物的毛细管无胶筛分电泳及其应用   总被引:6,自引:0,他引:6  
毛细管无胶筛分电泳近年来取得了很大进展。本文综述了以纤维素衍生物作为筛分介质的毛细管无胶筛分电泳的研究进展,包括筛分理论,筛分体系模式,以及它在DNA、蛋白质分离方面的应用。  相似文献   

7.
设计并制作了一种新型的中空纤维接口,以此为核心构建了毛细管等电聚焦(CLEF)/毛细管无胶筛分(CNGE)电泳二维蛋白质分离技术平台,实现了将二维凝胶电泳从平板转移到毛细管中。利用该二维分离平台,对血红蛋白样品进行了高效、快速分离分析,验证了该二维分离平台的可行性及分离效能。实验结果表明:二维分离系统总的峰个数和分离效能都比各自一维分离系统有较大提高。  相似文献   

8.
本文研究了不同因素对脱氧核糖核酸(DNA)毛细管电泳迁移行为的影响.采用毛细管无胶筛分电泳法,对不同片段长度DNA进行分离检测,考察DNA片度长度、电场强度、聚合物浓度及分子量等因素对DNA迁移行为的影响.实验结果显示,DNA迁移时间随其长度的增加而延长;电场强度越高,DNA迁移时间越短,分离效果变差;DNA在高浓度聚...  相似文献   

9.
用毛细管电泳以聚环氧乙烷(PEO)为筛分介质对pUC19DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)Marker中的12条DNA片段进行了分离,并尝试用Ogston模型、爬行模型以及线性模型对分离机理进行研究,最终发现26~147bp的小片段,在低电场强度时能很好地符合Ogston模型理论,而190~501bp中等长度的DNA片段电泳迁移率与其尺寸间存在很好的负相关的线性关系,为此,提出一种新的线性模型来进行解释.此外,还探讨了PEO的浓度和电场强度对分离的影响.其结论可更好地从理论上指导对中小片段DNA的分离,对肿瘤基因突变点的分析和PCR扩增产物的分离分析具有重要的意义.  相似文献   

10.
本文报道了毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离较短的 p GEM7Zf(+) Hae DNA片段 (DNA长度为 1 8~ 675bp)。研究表明 ,在 1 %的羟乙基纤维素无胶筛分介质中 ,加入 2 %的聚乙烯吡咯烷酮能显著提高 DNA片段的分辨率和分离效率。在混配无胶筛分介质中 ,聚乙烯吡咯烷酮有两种作用 ,一是动态涂渍 ,降低毛细管内壁对 DNA片段与 DNA荧光插入试剂的吸附 ,改善分离效率 ;二是两种不同长度、性质的线性高分子能形成更为致密的“缠绕网络”,有利于较短的 DNA片段电泳分离。  相似文献   

11.
变性无胶毛细管筛分电泳分析聚合酶链式反应产物   总被引:2,自引:0,他引:2  
韩富天  许琪  林炳承  沈岩  吴冠芸 《分析化学》1999,27(10):1179-1182
在分离Y染色体性别决定区,人11号染色体短β-珠蛋白基因部分序列扩增产物和PBR322/HaeⅢ标准片段的混合样品时,SRY和108/B的迁移时间均产生较大的偏差,在尿素变性存在的无胶筛分体系中迁移时,这种迁移时间的偏差得以消除,这意味着尿素性剂的存在消除了DNA空间结构对迁移的影响,DNA在此筛分介质中的迁移只与其片段长度有关。  相似文献   

12.
聚N-异丙基丙烯酰胺无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用0.5%~6%聚N-异丙基丙烯酰胺作为筛分介质,对ФX174/Hae Ⅲ酶切DNA片段毛细管电泳分离进行了研究,结果表明其筛分效果差,信噪比低。然而,添加适量甘露醇可以显著改善分离效率。在3%聚N-异丙基丙烯酰胺中添加2%~6%甘露醇可以取得较好的分离结果,并对甘露醇改善筛分能力的机制进行了探讨。  相似文献   

13.
探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离.以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75 μm,有效长度27 cm)分离DNA Marker D和1 kbp DNA Ladder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响.对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测.结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短.方法较适于分离较宽范围的DNA片段.  相似文献   

14.
甘露醇添加剂对毛细管无胶筛分电泳分离DNA的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
韩富天  林炳承 《色谱》1998,16(6):489-491
在纤维素衍生物筛分体系中加入甘露醇添加剂大大提高了分离能力,在较低筛分剂浓度条件下可得到满意的分离。同时还对甘露醇影响分离的机理做出了解释。  相似文献   

15.
无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段   总被引:2,自引:0,他引:2  
王园朝  熊音  曾昭睿  程介克  沈萍 《色谱》2001,19(5):439-442
 由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。  相似文献   

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