利用对辣根过氧化物酶催化体系的干扰测定左旋多巴

提出辣根过氧化物酶法分析左旋多巴，方法基于一定条件下左旋多巴对辣根过氧化物酶催化对氯苯酚－４－ＡＡＰ偶联发色体系有干扰，干扰程度与左旋多巴的有浓度有相关性。     

辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性

研究了以辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林反应显色新体系,检测黄嘌呤氧化酶(XOD)活力的新方法。确定该酶活性测定的最佳条件为:辣根过氧化物酶(HRP)7000 U/L,4-氨基安替比林(AAP)1 mmol/L,苯酚(PA)6 mmol/L,黄嘌呤(XAN)1 mmol/L溶于50 mmol/L Tris-CL缓冲液(pH 8.4);反应温度为37℃,保温时间为20 m in;检测波长为508 nm。本方法测定XOD酶活的线性范围为5.0~100.0 U/L,线性关系良好(r=0.9992),检出限为1.3 U/L。该方法操作简单易行,测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和临床常规生化检测。     

催化荧光光度法测定辣根过氧化物酶及甲胎蛋白

建立了催化动力学荧光光度法测定辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）及人甲胎蛋白（ＡＦＰ）的新方法。在含ＴｒｉｔｏｒＸ－１００的磷酸盐缓冲溶液中,辣根过氧化氢氧化邻苯二胺的产物２,３－二氨基吩嗪的荧光强度有明显的增强。在一定的实验条件下,该产物的荧光强度与ＨＲＰ的量成正比,方法对ＨＲＰ的线性范围为１０～２００pg,线性相关系数为０．９９５６,最低检出下限可达８pg,其相对标准偏差为３．２％（n＝１０）。应用此测定体     

镧离子对植物体内过氧化物酶活性的影响

本文首次比较了在植物体内La³⁺与过氧化物酶(POD)的相互作用和在植物体外La³⁺与辣根过氧化物酶(HRP)的相互作用。在植物体内的研究表明,La³⁺能够明显改变POD的活性,并呈现低促高抑的“Hormesis效应”。用圆二色谱(CD)、紫外-可见(UV-Vis)吸收光谱和傅立叶变换红外(FTIR)光谱研究在植物体外La³⁺与HRP相互作用的结果表明,在模拟生理条件的溶液中,La³⁺对HRP的活性同样呈现低促高抑的＂Hormesis 效应＂。其作用机理可能是La³⁺通过与HRP中酰胺基的O或N键合,导致HRP二级结构变化,进而改变活性中心血红素中铁卟啉的化学结构,最终改变HRP的催化活性。     

辣根过氧化物酶自组装多层膜结构形貌与活性的研究

用分子沉积自组装作制备了阳离子化和阴离子化的辣根过氧化物酶自组装膜；并用原子力显微镜（AFM）研究了不同离子化辣根过氧化物酶单层及多层自组装膜的形貌结构与自组装膜的活性变化关系。结果表明：阴离子化的辣根过氧化物酶自组装膜的表面形貌比较粗糙，均方根粗糙度（RMS）及酶分子粒径较大，且组装膜的活性比较大。     

固定化辣根过氧化物酶和硫堇的过氧化物传感器

利用卡拉胶水凝胶将辣根过氧化物酶和硫堇同时固定在玻碳电极表面,制备以硫堇为媒介体的过氧化物电化学传感器.包埋在卡拉胶水凝胶中的硫堇在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中出现了1对氧化还原峰,氧化峰电位和还原峰电位分别在-0.176和-0.264 V,电位差为88 mV,电流比近似为1,说明硫堇在电极表面发生准可逆的电化学反应.硫堇能作为辣根过氧化物酶催化还原过氧化物中的电子媒介体,加速催化还原过程中的电子传递,减少了催化还原过程中的其它氧化物的干扰.传感器检测过氧化物(过氧化氢、异丙苯基过氧化氢、过氧化丁酮、叔丁基过氧化氢)具有较快的响应时间和良好的灵敏度、重现性、稳定性及较长的使用寿命.     

辣根过氧化物酶在分析化学中的应用

辣根过氧化物酶是一种重要的分析化学试剂,对过氧化氢底物特异性强。广泛用于临床化学、环境化学和食品工业等领域。本文评述了近十年来辣根过氧化物酶在分析化学中的应用进展。包括光度法、荧光法、化学发光法、电化学传感器和光导纤维传感器法测定过氛氢及相关物质,及辣根过氧化物酶在其他无机、有机及生物物质分析中的应用。引用参考文献６０篇。     

毛细管电泳流动注射化学发光检测辣根过氧化物酶及其在免疫分析中的应用

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)是从植物辣根中提取出来的一种由无色的酶蛋白和深棕色的卟啉结合而成的糖蛋白,能催化鲁米诺(luminol)、异鲁米诺(isoluminol)及其衍生物而发光.     

辣根过氧化物酶直接电化学传感器检测过氧化物的研究

该文以高比表面积的泡沫镍电极(Ni foam)为基础,通过电沉积碳纳米管(CNTs)制备了CNTs/Ni foam。然后在十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)的辅助下,通过一步法电沉积纳米金(AuNPs)将辣根过氧化物酶(HRP)固定到电极表面,制备了HRP-AuNPs/CNTs/Ni foam直接电化学酶传感器。并采用SEM、能谱(EDS)和电化学方法对该电极进行了表征,优化了测试电位和pH值,将该传感器对过氧化氢及2种有机过氧化物进行了检测。结果表明,该传感器性能良好,对过氧化氢、过氧化氢异丙苯、2-过氧化丁酮具有良好的催化检测性能,其检出限分别为1.2×10~(-7)、4.5×10~(-7)、2.5×10~(-7) mol/L。     

Multicommutated Flow Analysis System for Determination of Horseradish Peroxidase and Its Inhibitors

A fully mechanized multicommutated flow analysis (MCFA) system dedicated to determining horseradish peroxidase (HRP) activity was developed. Detection was conducted using a flow-through optoelectronic detector-constructed of paired LEDs operating according to the paired emitter-detector diode (PEDD) principle. The PEDD-MCFA system is dedicated to monitoring the enzyme-catalyzed oxidation of p-phenylenediamine (pPD) by a hydrogen peroxide. Under optimized conditions, the presented bioanalytical system was characterized by a linear response range (33.47–200 U/L) with a detection limit at 10.54 U/L HRP activity and 1.66 mV·L/U sensitivity, relatively high throughput (12 signals recordings per hour), and acceptable precision (RSD below 6%). Additionally, the utility of the developed PEDD-MCFA system for the determination of HRP inhibitors allowing the detection of selected thiols at micromolar levels, is demonstrated. The practical utility of the flow system was illustrated by the analysis of some dietary supplements containing L-cysteine, N-acetylcysteine, and L-glutathione.     

稀土铽离子对辣根过氧化物酶活力指数的影响(英)

0IntroductionHorseradishperoxidase(HRP)isaplanthemeenzymecatalyzingoxidationofawidevarietyofaro鄄maticmoleculesbyhydrogenperoxideanditisthemostwidelystudiedmemberoftheperoxidasefamily[1~3].ThecrystalstructureofHRPhasbeensolved[2].ThestructuralfeaturesofHR…     

葡萄糖浓度的酶联荧光毛细分析法测定

该文以葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶为催化剂,使含有对甲基酚的葡萄糖溶液体系通过酶偶联催化反应生成荧光物质,从而实现对葡萄糖浓度的测定。优化的实验条件为:反应时间20 min;NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH 10.4);对甲基酚浓度30.0μmol/L。分别采用荧光毛细分析法和荧光光谱分析法测定了相同浓度的系列葡萄糖溶液的荧光强度。在5.0~500.0μmol/L范围内,两种方法测得的荧光强度均与葡萄糖浓度的对数成正比。通过对比测试结果分析了两种方法的优缺点。     

辣根过氧化物酶在亲水性离子液体中的活性与稳定性研究

基于辣根过氧化物酶对过氧化氢氧化愈创木酚这个显色反应的催化作用,研究了辣根过氧化物酶在七种亲水性离子液体[C2mim][BF4]、[C4mim][BF4]、[C6mim][BF4]、[C4mim]HSO4、[C4mim]Cl、[C4mim]NO3、[C4mim][CF3CO2]中的活性与稳定性变化.结果表明辣根过氧化物酶在不同离子液体中均有不同程度的失活,辣根过氧化物酶活性随离子液体极性增强而降低.辣根过氧化物酶在含[C4mim]Cl离子液体的介质中,随着温度升高,[C4mim]Cl对辣根过氧化物酶的失活过程起加速作用,离子液体浓度越高,酶的热稳定性越差.紫外-可见光谱研究表明,在含[Cnmim][BF4]、[C4mim]HSO4、[C4mim]Cl、[C4mim]NO3的介质中,辣根过氧化物酶血红素中心最大吸收峰没有发生变化,但吸收值增强,证明离子液体使酶的血红素基团暴露于介质中而增强了吸收;而在含[C4mim][CF3CO2]的介质中,辣根过氧化物酶血红素基团最大吸收峰区发生蓝移,证明有部分血红素基团被离子液体破坏而脱落.     

连续流动分析法测定水中的阴离子表面活性剂

在GB/T 7494–1987法的基础上将自动进样、在线萃取、在线分离技术与分光光度法相结合,测定水中阴离子表面活性剂的含量。在分析过程中利用二次萃取和分离有效除去干扰物质,提高了分析的准确度和灵敏度。标准工作曲线线性相关系数为0.999 2,检出限为0.007 mg/L,测定结果的相对标准偏差为2.0%~2.4%(n=6),加标回收率为95.0%~98.0%。连续流动注射分析法操作简单,基线稳定速度快,连续分析效果好,大大降低了氯仿对人体的危害,适合大批量水质中阴离子表面活性剂含量的分析。     

Determination of Mercury at the Picogram per Milliliter Level Using Immobilized Horseradish Peroxidase

Abstract

New test method and test device for the mercury (II) determination at the pg/mL level were developed based on the mercury inhibitory action on horseradish peroxidase immobilized on solid supports – in the cells of the polystyrene plate and on the chromatographic paper. The reactions of o-dianisidine, 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine and o-phenylenediamine oxidation by hydrogen peroxide were used as the indicator reactions. The mercury inhibitory effect increased in the presence of thiourea. Under the elucidated optimal conditions the calibration curves for the mercury determination showed a linear relationship between the peroxidase inhibition degree and the mercury concentration in the range of 0,1–1000 pg/mL. The mercury detection limits were 0,1–10 pg/mL in dependence on the concrete indicator reaction. The analysis completed in 15 min. The proposed test device was applied to the mercury determination in underground waters of Moscow region. The mercury content obtained was coincident with that obtained by atomic-fluorescent method with cold vapour.     

Horseradish Peroxidase Catalyzed Synthesis of Polycardanol Microcapsules

Polymers synthesized from naturally derived monomers are valuable since they decrease the reliance on petroleum based feed stocks. Cashew nut shell oil (CNSL) is a side-product from processing of edible Cashew nuts of Annacardium occidentale. One of the major components of CNSL is cardanol, which is a phenol derivative having an unsaturated pentadecyl substituent in the ‘meta’ position with varying amount of unsaturation (no double bonds to three double bonds). The substituent in the meta position can also be hydrogenated to yield completely saturated hydrogenated cardanol. Cardanol can be utilized to stabilize the dispersions of oil in water and vice versa since it displays amphiphilic behavior owing to the phenolic head and the C15 aliphatic tail. Here we report the horseradish peroxidase (HRP) catalyzed polymerization of cardanol at oil water interface to obtain polycardanol microcapsules. A synthetic analogue of hydrogenated cardanol, 3-pentadecylphenol (3PDP), was also oxidatively polymerized at the oil-water interface to obtain Poly(3-pentadecylphenol) microcapsules.