荧光法研究氧氟沙星与牛乳铁蛋白的相互结合作用

用荧光光谱法研究了稀水溶液中牛乳铁蛋白与氧氟沙星分子之间的结合作用机制.以荧光猝灭法测定了该反应的结合常数K, 结合位点数n；并依据Förster偶极-偶极无辐射能量转移机制,得到氧氟沙星和牛乳铁蛋白色氨酸残基之间结合距离r和能量转移效率E；并用同步荧光技术考察了氧氟沙星对牛乳铁蛋白构象的影响；牛乳铁蛋白与氧氟沙星分子之间有较强的结合作用,而且氧氟沙星对牛乳铁蛋白的构象有一定的影响.     

高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱分离鉴定牛乳铁蛋白素

建立了高效液相色谱-基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)分离鉴定牛乳铁蛋白素(bovine lactoferricin, LfcinB)的方法。采用胃蛋白酶酶解牛乳铁蛋白,酶解液离心后取上清液,经过离子交换色谱、反相液相色谱、透析等技术分离,对分离得到的目标产物进行抗菌活性分析、蛋白含量测定和MALDI-TOF/TOF MS鉴定。分离得到高活性的LfcinB,其相对分子质量为3124.89,蛋白含量为18.20 μg/mL。本方法具有精度高、分析速度快和分辨能力强等优点,是其他传统的分析鉴定LfcinB方法所无法比拟的,为进一步研究LfcinB奠定了基础。     

不同喂养方式对婴儿硒状态的影响

测定了３０名健康产妇母乳及市售鲜牛乳中硒含量，并随访了不同喂养方式的婴儿全血ＧＰＸ活性，结果显示，母乳尤其是初乳中含有丰富的硒元素，并显著高于市售牛乳，母乳喂养儿全血ＧＰＸ活性明显高于人工喂养儿，表明母乳喂养有助于改善婴儿硒营养状态，提示对人工喂养儿应加强硒营养。     

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定牛乳及制品中的唾液酸

建立了高效阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法检测常见唾液酸N-乙酰神经氨酸(Neu5AC)和N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)的方法,对影响分离和检测的条件进行了优化。以NaOH和NaAc为淋洗液,在CarboPac PA20阴离子交换柱上梯度分离,在30℃柱温,0.5 mL/min的流速下,20 min内可完成两种唾液酸的分析。使用脉冲安培检测法测定Neu5AC和Neu5Gc的线性范围为5~500μg/L;检出限为3.0和1.8μg/L(25.0μL进样,以3倍信噪比计算检出限)。将该方法用于15个牛乳及制品中Neu5AC和Neu5Gc的测定,两种唾液酸的标准加入回收率为88%~115%。方法具有灵敏、简便和环境友好的特点,样品前处理方法简单,方法适用性好。     

乳制品检测出苯甲酸是什么原因

牛乳中天然存在少量的苯甲酸。其机理是,在微生物的作用下,牛乳中天然存在的马尿酸会转化为苯甲酸,但生成量很低。因此,经过发酵的酸乳中苯甲酸含量高于一般液态乳。有研究表明,酸牛乳中马尿酸在乳酸菌作用下生成苯甲酸是不可逆的,马尿酸和苯甲酸的反应生成量为1：1。世界卫生组织对苯甲酸和苯甲酸钠的风险评估结果认为“自然界中许多动植物本身存在苯甲酸,可以认为苯甲酸是食品（包括牛乳）中的一种天然成分”。     

离子色谱法测定消毒牛乳中的硝酸盐

硝酸盐很容易因细菌作用被还原成亚硝酸盐,食用后可引起中毒。消毒牛乳中往往含有硝酸盐,国家标准中把它定为评价消毒牛乳质量的重要指标之一。国家推荐标准的检测方法为化学法,该法繁琐复杂,且干扰因素多,误差大。本文将样品沉淀蛋白并离心过滤后,采用新型ICS-2000离子色谱仪测定消毒牛乳中的硝酸盐,不仅样品前处理简便、快速,且检测结果准确,与化学法有较好的一致性。     

HPLC-ELSD与GC-MS法测定牛乳甘油三酯sn-2位脂肪酸组成

研究建立了快速、准确测定牛乳脂肪甘油三酯sn-2位脂肪酸组成的方法．利用胰脂酶专一水解甘油三酯sn-1和sn-3位置上的脂肪酸得到sn-2单甘油酯和游离脂肪酸,再通过蒸发光散射高效液相色谱分离出sn-2位单甘油酯,然后对其进行衍生,用气相色谱质谱联用仪对sn-2脂肪酸组成进行分析．结果显示用蒸发光散射高效液相色谱法分离sn-2位单甘油酯时方法的回收率达到83．3％～85．1％,该法省去了传统测定中费时费力的薄层色谱分离步骤．用气相色谱质谱联用法对产物进行分析,精密度高,结果可靠．分析结果表明,牛乳脂肪sn-2位脂肪酸由2．57％月桂酸、7．68％豆蔻酸、34．74％棕榈酸、11．56％亚油酸、22．53％油酸和15．21％硬酯酸组成．     

新生儿晚期低钙血症的原因是什么

新生儿晚期低钙血症是指出生48 h以后发生低血钙的新生儿,一般发生高峰多在第一周末,多见于牛乳喂养的足月新生儿。主要原因是由于磷摄入量过多而使血钙降低。牛乳含磷量为1 000 mg/L,而人乳含磷量为150 mg/L,牛乳含磷量比人乳含磷量高6倍之多,而且钙磷比例不当,为1·27∶1~1·     

超高效液相色谱串联质谱分析牛乳中24种磺胺类药物残留

建立同时测定牛乳中24种磺胺类药物多残留的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱 (UPLC-ESI-MS/MS)分析方法.样品经改良的QuEChERS技术提取和净化,采用ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱(100 mm × 2.1 mm, 1.7 μm ),0.25%乙酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,超高效液相色谱分离,电喷雾离子源电离,正离子多反应监测模式进行定性和定量分析.24种药物在5～100 μg/kg浓度范围内线性良好,相关系数r均大于0.99,以5,25和50 μg/kg 3个浓度水平进行添加回收率实验,样品的平均回收率在64.2%～110 9%之间,相对标准偏差为3.2%～13.1%,方法的检出限为0.21～1.62 μg/kg.方法重现性好、灵敏度高、分析时间短、确证能力强,适用于牛乳中磺胺类药物多残留的确证检测.     

超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法快速筛查生鲜牛乳中的14种磺胺类药物

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间高分辨质谱(UHPLC-Q TOF MS)技术建立了生鲜牛乳中14种磺胺类药物(磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲嘧啶、磺胺醋酰、磺胺曲沙唑、磺胺苯吡唑、磺胺苯酰、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲唑)的快速筛查方法。建立了此14种化合物的精确分子质量数和二级质谱碎片离子数据库。牛乳样品经含0.1%甲酸的乙腈溶液提取,采用Qu ECh ERS方法净化。目标药物经Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,使用Dual AJS ESI源,在正离子模式下进行数据采集,可在8 min内实现对14种磺胺类药物的良好分离。结果表明,14种磺胺类药物的定量下限(LOQ,S/N=10)为10μg/kg,在10,20,50μg/kg 3个加标水平下的平均回收率为72.5%~117.1%,相对标准偏差为1.3%~10.9%。结合精确分子质量数、保留时间、同位素丰度和二级特征碎片离子对目标化合物进行快速筛查与确证。该方法快速简便、准确、灵敏度较高,适用于牛乳中磺胺类药物残留的高通量筛查与定性鉴定。     

聚苯胺黄嘌呤氧化酶电极的生物电化学活性

用电化学方法将黄嘌呤氧化酶固定在聚苯胺中以制成聚苯胺黄嘌呤氧化酶电极。该电极呈现典型的酶催化反应动力学特性。且具有快速的生物电化学响应。固定化黄嘌呤氧化酶的表观米氏常数为21×10^-^6mol.dm^-^3, 最适pH为8.4,酶催化反应的活化能为85.1kJ.mol^-^1。酶电极具有较高的稳定性。使用聚苯胺黄嘌呤氧化酶电极能可靠地测定较低的底物浓度, 如2×10^-^6mol.dm^-^3黄嘌呤。     

胺氧化酶修饰聚苯胺电极的生物电化学响应特性

采用聚合物掺杂方法将胺氧化酶固定在聚苯胺膜中制成聚苯胺/胺氧化酶电极。该电极对组胺有快速的生物电化学响应,电极反应受酶动力学控制。固定化胺氧化酶的表观米氏常数为0.21mmol/L.最适pH值为7.3～7.6,酶催化反应的表观活化能为76kJ·mol^-1.酶电极具有较好的稳定性,可用来测定组胺。此外,酶电极的电化学性质通过循环伏安和交流阻抗进行了表征。     

别嘌呤醇对黄嘌呤氧化酶的抑制作用研究

用聚苯胺黄嘌呤氧化酶电极（生物传感器）研究了别嘌呤醇对黄嘌呤对氧化酶的抑制作用，实验结果表明：别嘌呤醇对黄嘌呤氧化酶有明显的抑制作用，但这种抑制作用是可逆的，抑制剂在存在使固定酶的表观米氏常数增大但并没有影响催化反应的最大速率，所以别嘌呤是黄嘌呤氧化酶的一种可逆竞争抑制剂，抑制剂对固定酶的最适ｐＨ值没有影响，而对反应活化能略能影响。     

Bioelectrochemical Response and Kinetics of Choline Oxidase Entrapped in Polyaniline—Polyacrylonitrile Composite Film

A novel choline oxidase electrode was constructed by entrapping choline oxidase into polyaniline-polyacrylonitrile composite film,The enzyme film was prepared by in situ electropolyme-ritztion of aniline into porous polyacrylonitrile-coated platinum electrode in the presence of choline oxidase ,the enzyme electrode exhibited sensitive and stable electrochemical response to choline ,The kinetics analysis,showed that the mass transport is partially rate-liniting.The influences of pH,applied potential and temperature on the response of the enzyme electrode were also desribed.     

Amperometric determination of xanthine in fish meat by zinc oxide nanoparticle/chitosan/multiwalled carbon nanotube/polyaniline composite film bound xanthine oxidase

Xanthine oxidase (XOD) was immobilized on a composite film of zinc oxide nanoparticle/chitosan/carboxylated multiwalled carbon nanotube/polyaniline (ZnO-NP/CHIT/c-MWCNT/PANI) electrodeposited over the surface of a platinum (Pt) electrode. A xanthine biosensor was fabricated using XOD/ZnO-NP/CHIT/c-MWCNT/PANI/Pt as working electrode, Ag/AgCl as reference electrode and Pt wire as auxiliary electrode connected through a potentiostat. The ZnO-NPs were characterized by X-ray diffraction (XRD) and transmission electron microscopy (TEM), and the enzyme electrode was characterized by cyclic voltammetry, scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy and electrochemical impedance spectroscopy (EIS). The biosensor showed optimum response within 4 s at 0.5 V potential, pH 7.0, 35 °C and linear range 0.1-100 μM with a detection limit of 0.1 μM. The enzyme electrode was employed for determination of xanthine in fish meat during storage. The electrode lost 30% of its initial activity after 80 uses over one month, when stored at 4 °C.     

Bioelectrochemical response of the polyaniline galactose oxidase electrode

Galactose oxidase has been immobilized in a polyaniline film. The response current of the galactose oxidase electrode is a function of the applied potential and increases as the pH increases from 5.61 to 7.25. The optimum pH of the immobilized galactose oxidase is 7.25. The activation energy of the enzyme-catalysed reaction is 41.8 kJ mol⁻¹. The response current of the enzyme electrode shows good reproducibility at temperatures below the optimum temperature of 30.4°C and increases as the galactose concentration increases from 0.2 to 6 mmol dm⁻³. Thus the polyaniline galactose oxidase electrode can be used to determine galactose concentration.     

Xanthine and hypoxanthine sensors based on xanthine oxidase immobilized in poly(mercapto-p-benzoquinone) film

The construction and performance of an enzyme electrode as an amperometric sensor of xanthine and hypoxanthine is described. Xanthine oxidase has been immobilized in a conductive redox polymer, poly(mercapto-p-benzoquinone), by means of an electropolymerization of mercaptohydroquinone in the presence of the enzyme. An Au-electroplated glassy carbon electrode coated with the resulting polymer film functioned well as a direct response type of sensor, where the polymer chain served as a conductive molecular chain between the active sites in the enzyme and the substrate electrode. Response characteristics as well as kinetic parameters have been evaluated.     

聚苯胺用作乙醇脱氢反应中的电子传递介质

脱氢酶（ADH）在电化学氧化还原反应中是很重要的一种酶,但它在催化有机分子脱氢反应时需烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）参与,后者从底物接收电子生成还原形NADH.脱氢酶电极是根据NADH的电化学氧化产生的阳极电流构成的[1－3].然而NADH与裸体炭电极和铂金电极之间的直接电子传递是非常困难的,往往需一个相当高的过电位[4].另一个问题是生成物易将电极玷污[5,6].克服这些问题的方法是使用均相电子传递介质,例如在底物溶液中加入Meldola蓝、Nile蓝A和NMP＋甲替硫酸盐等[7－9],及复相电子传递介质,例如将镍六氰基高铁酸盐固…     

聚苯胺膜电极在苯胺单体聚合反应中的电催化性能

自从第一个导电高聚物掺碘的聚乙炔问世以来［1］,人们又陆续开发研制了聚 苯胺(PAn)、聚吡咯和聚噻吩等导电高分子材料. 在众多的导电高分子材料中,聚苯胺以其原 料廉价易得,制备方法简便,导电性能优良,耐高温及抗氧化性能良好等优点而成为最具应用 前景的品种之一. 迄今为止,有关聚苯胺的链结构,掺杂反应,以及导电机理等基础理论方面 的研究已有大量的文献和综述报道［2～6］. 这些基础理论的研究为其应用研究奠定 了坚实的基础. 早在60年代,人们就发现,聚苯胺对氧化亚氮分解及丁二烯异构化反应具有独 特的催化作用;同时,聚苯胺具有超出几何表面的活性表面,故可对某些反应具有选择性的催 化作用. 因此,人们开始研究聚苯胺膜电极对某些电极反应的电催化性能［7～12］. 我国科学工作者在这一领域也做了许多有益的工作,如董绍俊等［13］研究了聚苯胺 膜修饰电极对抗坏血酸的电催化氧化,罗维忠等［14］研究了聚苯胺膜电极对Fe(Ⅱ) 和Sb(Ⅲ)的电催化作用. 本文主要讨论了扫描速度、苯胺单体浓度及温度对聚苯胺膜电极在 苯胺单体聚合过程中电催化性能的影响,为利用聚苯胺处理含苯胺废水提供了一定的理论依 据.     

伞形酮对黄嘌呤氧化酶的抑制作用研究

The investigation on inhibition of xanthine oxidase by umbelliferone was carried out using a polyaniline-xanthine oxidase electrode. The experimental results indicated significant inhibition caused by umbelliferone. The apparent Michaelis-Menten constant (K'm) and the maximum rate (im) of the immobilized xanthine oxidase were both affected by umbelliferone. This indicated that umbelliferone acts as a mixed type of inhibitor of xanthine oxidase. The optimal pH of the immobilized enzyme was hardly affected by umbelliferone; The response current increases with increasing potential in the potential range 0.55~0.68V.