探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质

在模拟体液离子强度下,基于5-硝基水杨酸(5-NSA)与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-NSA为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法. 体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响. 结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在3.2×10-8～6.4×10-8 mol/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为1.7×10-8 mol/L(n=11). 对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在99.96%～100.04%之间.     

白藜芦醇探针同步荧光法测定蛋白质含量

在Tris-HCl缓冲溶液体系中(pH=7.4),白藜芦醇与人血清白蛋白相互作用,对蛋白的内源性荧光产生猝灭作用,而且,同步荧光的强度与人血清白蛋白的浓度成正比。 基于此,建立了以白藜芦醇为荧光探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法。 体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质和离子强度等因素的影响。 在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(I)与人血清白蛋白在1.380~276.0 mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为1.037 mg/L(n=11)。 对血清、尿样和唾液等生物样品进行测定,回收率在93.5%~105.8%之间,与传统的考马斯亮蓝(G-250)法作对照,结果一致。     

探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质的应用研究

在模拟人体生理条件下,基于5-硝基水杨酸与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-硝基水杨酸为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响。对上述实验条件进行了优化,结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在2.21 ~ 469.2 mg/L 的浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为0.81 mg/L(n=11)。本实验对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在98.4% ~ 102.6 %之间。     

磺胺嘧啶钠探针分析生物样品中蛋白质含量的研究

在pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,荧光猝灭光谱和三维荧光光谱显示磺胺嘧啶钠(SDS)可与人血清白蛋白(HSA)相互作用,使人血清白蛋白疏水微环境极性以及构象发生变化。考察了Δλ值、反应介质、离子强度等因素对该体系同步荧光光谱特征及强度的影响。在选定的最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在1.38～276μg/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,线性相关系数为0.9992,从而建立了以磺胺嘧啶钠为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法,检测限可达0.48μg/mL。用此方法对生物样品人血清、唾液和尿液中蛋白质含量进行了测定并进行加标回收实验,回收率在95.7%～103.7%之间。本文还用经典的考马斯亮蓝法对样品进行了测定,所得结果和本方法一致。同时还考察了一些常见的共存物质对蛋白质测定的影响。     

荧光探针碘苷在血清白蛋白同步荧光测定中的应用研究

在最佳实验条件下,碘苷与血清白蛋白相互作用,导致血清白蛋白的内源荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中血清白蛋白的浓度呈线性关系.据此,建立了以碘苷为荧光探针,运用固定波长同步荧光光谱分析测定人血清白蛋白和牛血清白蛋白的新方法.体系的同步荧光强度与人血清白蛋白和牛血清白蛋白分别在1.38～579 mg/L和0.78～585 mg/L范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.612 mg/L和0.358 mg/L.对实际样品进行回收测定,回收率为97%～101%.     

一种缩氨基硫脲类衍生物探针测定生物样品中的蛋白质含量

在Tris-HCl缓冲溶液体系中(pH=7.4),研究了1,4-二羟基-2-甲酰基-9,10-蒽醌缩对甲氧基苯基氨基硫脲(EN)与人血清白蛋白(HSA)体系的荧光猝灭光谱和三维荧光光谱,证明EN与HSA可以发生相互作用,使人血清白蛋白的疏水微环境的极性以及构象发生变化。 考察了Δλ值、反应介质和离子强度等因素对体系同步荧光光谱特征及强度的影响。 在此基础上,建立了以EN为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中的蛋白质含量的方法。 在最佳实验条件下,体系同步荧光强度与HSA在1.380~165.6 mg/L范围内呈良好的线性关系。 对11份空白溶液进行平行测定,检出限达到0.414 mg/L,相对标准偏差为1.52%。 运用此方法对血清、唾液、尿液进行了加标回收实验,回收率在98.4%～105%。 且同步荧光光谱法测定结果与考马斯亮蓝法基本一致。     

快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究

最佳实验条件下,基于脱氧尿苷与人血清白蛋白(HSA)相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光光谱发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中白蛋白的浓度呈良好的线性关系,建立了以脱氧尿苷为探针,运用固定波长同步荧光光谱快速测定生物样品中蛋白质总含量的新方法.深入考察了△λ值、反应介质、试剂用量、离子强度、加入顺序、反应时间等因素对测定的影响.在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与血清白蛋白在2.76～524.4μg/mL范围内的线性相关系数为0.9991,方法的检出限可达0.11μg/mL.运用本方法对人血清、唾液和尿液等生物样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在98.0%～102.5%之间.对11份空白溶液进行平行测定,相对标准差为1.2%.用经典的考马斯亮蓝G-250(CBB)法做了对照实验,两种方法测定结果基本一致.还考察了一些常见离子和有机物存在时对蛋白质测定的影响.本方法已用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定.     

同步荧光光谱法测定蛋白质

在模拟生理条件下,由于核苷类药物中间体氰基乙基尿嘧啶(CEU)与血清白蛋白相互作用,血清白蛋白的内源荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中血清白蛋白的浓度呈线性关系,据此提出以氰基乙基尿嘧啶为探针,用固定波长同步荧光光谱法测定人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA)的方法.在最佳试验条件下,体系的荧光强度与HSA和BSA的质量浓度分别在1.38～496.2 mg·L-1和1.56～624.0 mg·L-1范围内呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.045 mg·L-1和0.051 mg·L-1.方法应用于人血清及牛血清中HSA及BSA的测定,并以此样品为基体分别加入HSA及BSA标准溶液作回收试验,测得回收率在95.1%～102.5%之间,相对标准偏差(n=6)在0.43%～2.72%之间.     

氰基乙基-5-氯尿嘧啶核苷探针测定蛋白质的同步荧光法研究

基于核苷类药物中间体氰基乙基-5-氯尿嘧啶(CECU)与血清白蛋白相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以氰基乙基-5-氯尿嘧啶为荧光探针,用固定波长同步荧光光谱技术测定人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋白(BSA)的新方法。结果表明,在最佳实验条件下,体系的荧光强度与人血清白蛋白和牛血清白蛋白分别在2.76~497μg/mL和3.90~507μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限分别为1.64和1.72μg/mL(n=11)。该方法灵敏度高、稳定时间长、选择性好、线性范围宽。方法已用于血清样品中蛋白质的快速测定。     

固定波长同步荧光法测定生物样品中蛋白含量

不同代喹诺酮类药物分子与人血清白蛋白(HSA)相互结合,体系的同步荧光强度和溶液中HSA浓度呈良好的线性关系,其中氧氟沙星(OFLX)水溶性好,且对HSA的内源荧光有较强的猝灭作用,因而建立了以OFLX为分子探针,运用固定波长同步荧光法测定生物样品中蛋白质总含量的新方法.考察了△λ、介质、pH值、试剂用量和离子强度等因素对体系同步荧光的影响.在最佳实验条件下,体系同步荧光强度与HSA浓度在6.0×10-8～3.4×10-6 mol·L-1范围内的线性相关系数为0.9997.运用该方法对人血清、唾液和尿液等样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在99.3％～103.5％之间.该方法具有简单、快速、准确度高、重现性好等优点,可直接用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定.     

反斯托克斯荧光是荧光吗

阐释了反斯托克斯光的发光原理.根据荧光的定义,得出反斯托克斯光不属于荧光的结论.指出了仪器分析课程中存在的概念性错误,简要分析了错误原因.     

Fluorescence spectrometer-on-a-fluidic-chip

A chip-size spectrometer is realized by combining a linear variable band-pass filter with a CMOS camera. The filter converts the spectral information of the incident light into a spatially dependent signal that is analyzed by the camera. A fluidic platform is integrated onto the spectrometer for analyzing the fluorescence from moving objects. The target is continuously excited within an anti-resonant waveguide, and its fluorescence spectrum is recorded as the object traverses the detection area.     

空间分辨荧光分析技术

空间分辨荧光分析技术突破了传统荧光分析的局限,为获得空间定位信息提供了技术保障。系统地综述了构成该技术的共焦荧光法、全内反射荧光法、多光子荧光法以及近场荧光法等4种方法的原理、特点、发展及其应用,并且强调了其在单分子测定中的作用。引用文献64篇。     

双光子荧光探针

双光子吸收是指在强光激发下,介质分子同时吸收两个光子,从基态跃迁到两倍光子能量的激发态的过程。荧光显微成像是研究活体生物的重要工具,而最通常的细胞成像方法则是使用单光子激发荧光团的单光子显微成像。近红外光源激发的双光子荧光探针克服了单光子荧光探针的光漂白与光致毒而更适于生物检测与成像,为生命科学研究提供了更为锐利的工具。双光子荧光探针的作用机理包括分子内电荷迁移(ICT)、荧光共振能量迁移(FRET)、光诱导电子迁移(PET)与基团转换(GC) 4种方式。该文综述了双光子阳离子探针(Mg²⁺, Ca²⁺, Pb²⁺, Hg²⁺, Ag⁺, Fe³⁺, Zn²⁺, Na⁺, Cr³⁺)、双光子阴离子探针(F^-)、pH探针、双光子葡萄糖示踪器、双光子脂筏探针、双光子巯基探针、双光子半胱氨酸探针和双光子生物标记探针,以及双光子荧光探针在生物成像方面的应用,展望了双光子荧光探针的发展趋势与应用前景。     

壳聚糖支载菁染料荧光探针及荧光特性

壳聚糖支载有机荧光染料可在生理条件下改变其荧光特性,本文采用壳聚糖(CTS)支载有机荧光染料Cy3,利用红外光谱和热分析对产物进行了表征,研究了壳聚糖支载的荧光染料紫外吸收光谱和荧光光谱特性,结果表明,壳聚糖支载的荧光染料Cy3的紫外吸收特征峰的波长无明显变化,荧光强度明显增强,支载后的荧光染料光稳定性良好,初步细胞标记实验显示,壳聚糖支载后的Cy3染料对脑胶质瘤细胞具有良好的亲和性,并能穿透细胞膜且发出明显荧光。     

X射线荧光光谱分析

评述了我国在2000年7月-2002年6月间X射线荧光光谱，包括粒子激发的X射线光谱的发展和应用，内容包括仪器研制、激发源、探测器、软件、仪器改造、仪器维护和维修、样品制备技术、分析方法研究和应用。     

薄膜荧光传感

<正>不同于其它探测技术,荧光以激发态实现传感。因此,荧光传感具有灵敏度高、可设计性好、仪器结构相对简单、能耗低、不涉及放射性源、易于实现便携等优点,受到了人们的特别关注^1,2。薄膜荧光传感是荧光传感的一种重要形式,是继离子迁移谱技术之后最具发展潜力的可实现便携的气相微痕量物质探测技术。敏感薄膜创制是薄膜荧光技术的核心,薄膜性能主要取决于决定传感发生机制的传感单元,以及影响传感对象分子吸附、解析和扩散的活性层(adlayer)结构。一般而言,     

Electrophoresis with Polarized Fluorescence Detection. Application to Capillary Fluorescence Rejection

In this paper, we integrate the apparatus of electrophoresis with polarized fluorescence detection to suppress the background fluorescence arising from illuminating the coating layer of channel containers with a laser excitation source. It has demonstrated moderate background suppression efficiency, close to the ideal 3‐fold reduction on the surface doped with randomly distributed static fluorophores. In addition, when the fluorescence coverage is coated along the same orientation more uniformly, the background reduction is 10‐fold in our experiments. This detection scheme is applicable to acquire the electrophoregrams of separating small organic molecules and biopolymers, such as nucleic acids, when the loading of staining dyes is not heavy. This apparatus is simple. Only adding a pair of polarizer optics is needed. This detection scheme should work equally well with an incoherent light source.     

BODIPYs with Photoactivatable Fluorescence

The borondipyrromethene (BODIPY) chromophore is a versatile platform for the construction of photoresponsive dyes with unique properties. Specifically, its covalent connection to a photocleavable group can be exploited to engineer compounds with photoswitchable fluorescence. The resulting photoactivatable fluorophores can increase their emission intensity or shift their emission wavelengths in response to switching. Such changes permit the spatiotemporal control of fluorescence with optical stimulations and the implementation of imaging strategies that would be impossible to replicate with conventional fluorophores. Indeed, BODIPYs with photoactivatable fluorescence enable the selective highlighting of intracellular targets, the nanoscaled visualization of sub-cellular components, the real-time monitoring of dynamic events and the photochemical writing of optical barcodes.