气相色谱/质谱联用测定大鼠脑部的神经甾体

应用气相色谱 质谱联用技术建立了大鼠脑部神经甾体的测定方法。游离型甾体和甾体硫酸酯分两步萃取。第一步用乙酸乙酯提取游离型甾体,第二步用氯仿/2 丁醇提取甾体硫酸酯,然后经固相萃取纯化。甾体硫酸酯进行溶剂解形成游离型甾体。游离型甾体和甾体硫酸酯分别经七氟丁酸酐衍生化后进行气相色谱 质谱分析。经初步研究雄性大鼠脑部游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、黄体酮(PROG)、别孕烯醇酮(AP)和脱氢表雄酮(DHEA)的含量分别为（8.53±1.11） ng/g ,（ 7.01±2.60） ng/g ,（ 1.     

甾体激素类药物中微量硒的测定

以氧瓶燃烧法将硒(Se(VI))转化为硒的氧化物。在碱性溶液中,以水合肼为还原剂,将Se(VI)还原为Se2-,然后与Cd2+在水浴中回流反应,合成具有优良荧光特性的Cd Se量子点。依据硒的浓度与体系荧光强度的线性关系,建立了测定微量硒的新方法。研究了酸度、反应温度、反应时间、还原剂用量等因素对硒的测定的影响,确定了最佳实验条件。在最佳条件下,硒酸盐浓度在1.0×10-8~3×10-6mol/L范围与体系的荧光强度呈良好线性关系,线性方程为I=78.67+6.325×107c,线性相关系数为0.9955。方法可用于甾体激素药物中硒的测定。     

新型甾体缀合物的设计合成及活性研究

甾体化合物是一类生物体中广泛存在并起重要功能的生物分子。其特殊结构使这类化合物具有亲脂性,膜亲合性以及与低密度脂蛋白的特异性结合等性能。利用这些特性设计合成各种药物分子的甾体缀合物,可增加药物分子的脂溶性,提高跨膜渗透能力,在特定组织中的分布以及甾体缀合物自身具有独特的生物活性,对探索新型生物活性分子具有重要意义。本文介绍了近年来在设计合成新型甾体缀合物领域的研究进展,包括甾体药物缀合物、含磷甾体缀合物、作为离子通道和分子载体的缀合物及甾体二聚缀合物等。     

高效液相色谱/挥发激光散射检测器测定奶粉和鸟粪中的甾体化合物

利用反相高效液相色谱／挥发激光散射检测器发展了分析甾体化合物的新方法,采用甲醇和水溶液为冲洗体系,梯度淋洗,12种甾体类化合物在35min内得到很好的分离。方法简单快速,不需衍生,样品经固相萃取预处理,回收率介于84.0％～102.8％之间,响应值和浓度不呈简单的线性关系,在5～50mg／L浓度范围内对峰面积与浓度进行对数线性回归分析,得回归系数大于0.99。     

高效液相色谱法分析白僵菌培养物中甾体化合物的研究

在以酶催化为本质的甾体化合物微生物转化研究中,建立快速准确的分析方法一直是发酵化学领域面临的挑战性课题。过去十多年来HPLC技术的快速进展为解决这一问题提供了许多有益的范例,特别是反相HPLC技术在这方面提供了快速准确的定量检测手段,日益为人们瞩目。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物

建立了采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定猪、牛、羊和鸡肌肉组织及鸡蛋中睾酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙等11种甾体激素多残留的分析方法。试样在碱性条件下用叔丁基甲醚提取,冷冻离心脱脂净化,以乙腈和甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,反相液相色谱分离。采用电喷雾离子化、多反应监测方式(MRM),对11种甾体激素同时进行定性定量测定。动物肌肉和鲜蛋中睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮及司坦唑醇的检出限为0.3 μg/kg,群勃龙、诺龙、黄体酮、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的检出限为0.4 μg/kg。在动物组织及鸡蛋中添加1,2及10 μg/kg 水平的药物回收试验中,睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮及司坦唑醇的回收率均在62.3%～105%之间,相对标准偏差为0.5%～15%;群勃龙、诺龙、黄体酮、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的回收率大于50.0%,相对标准偏差小于16%。11种甾体激素在1～100 μg/L范围内,线性关系良好,相关系数都大于0.99。该方法的样品前处理简单、快速,测定灵敏、准确,选择性好,可满足动物源食品中甾体激素类药物多残留的同时测定。     

反相高效液相色谱法同时测定保健口服液中20种甾体激素的研究

建立了利用反相高效液相色谱法同时测定保健口服液中２０种甾体激素的方法,进行了色谱条件的优化和样品预处理方法的探讨,并应用于市售保健口服液中微量激素的测定。最低检出量为０．１６～３．１８ｎｇ,回收率为８０．５％～１０３．１％,相对标准偏差为３．４％～９．２％。     

酶水解-高效液相色谱法测定肉类食品及牛奶中11种甾体激素

碎肉用乙腈超声提取,挥干后加入KH2PO4缓冲液(牛奶直接加入KH2PO4缓冲液),再加β-葡萄糖醛酸酐酶,37℃恒温24 h,稀释后过SPE小柱,用乙腈洗脱,线性梯度变化的KH2PO4-CH3CN分离,二极管阵列检测器检测。所测11种激素的检出限为0.009~0.020 mg.kg-1;平均回收率为51.0%~107.0%;相对标准偏差为0.77%~6.42%之间;相关系数为0.999 5~0.999 9之间。酶水解-高效液相色谱法测定肉类食品及牛奶中11种甾体激素是一种简便、快速、灵敏、线性好的检测方法。     

液相色谱-四极杆/离子阱质谱同时确证和测定肌肉中16种同化甾体激素残留

采用液相色谱-四极杆/离子阱质谱(LC-Q/Trap-MS)建立了肌肉中16种同化甾体激素类物质(ASs)残留的同时确证及测定方法。肌肉中的ASs采用乙腈超声辅助提取,正己烷脱脂,氨基固相萃取柱净化,CAPCELL PAK C18 MGIII柱(150 mm×2.0 mm, 5.0 μm)分离,0.1%(v/v)甲酸-乙腈溶液和0.1%(v/v)甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱;预设定多反应监测(sMRM)-信息依赖性采集(IDA)-增强子离子扫描(EPI)模式检测,在线EPI谱库确证,内标法定量。结果表明,16种ASs在线性范围内线性关系良好(r≥0.999);定量限(LOQ, S/N≥10)为0.029～0.36 μg/kg; 3个添加水平(0.5、2.0和20 μg/kg)下的回收率为89.9%～118%;相对标准偏差(RSD)为6.3%～16.2%。该方法准确灵敏,一次性完成16种ASs的确证和测定,可有效用于肌肉组织中ASs残留的监测分析。     

同时测定体液中咖啡因和茶碱的薄层色谱扫描法

研究了同时测定血清、尿样中的咖啡因和茶碱的薄层色谱定量法。在ＧＦ２５４硅胶板上，用乙酸乙酯－氨水（Ｖ乙酸乙酯∶Ｖ氨水＝９６∶４）的二元展开体系能将这两种生物碱有效地分离。其Ｒｆ值为咖啡因０．４６，茶碱０．１６。分离后的试样用薄层色谱扫描仪进行扫描定量，测定波长２７２ｎｍ，线性范围咖啡因０．００９７～１．９４μｇ，茶碱０．００９０～１．８０μｇ。血清及尿样的加标回收率在９５．８％～１０６．５％之间，相对标准偏差２．９５％～３．５０％。本法较为简便、快速、准确     

黑鳗藤中C_(21)甾体苷的分离和结构测定

从萝藦科植物黑鳗藤[Stephanotis mucronta (Blanco) Merr.]的藤茎中分离 到三个C_(21)甾体去氧糖苷（1） - （3）。通过化学降解和波谱技术，确定它们 的化学结构依次为：12-O-惕各酰基-20-O-乙酰基肉珊瑚苷元3-O-β-黄夹吡喃糖基 -（1→4）-β-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-磁麻吡喃糖苷（1），5，6-双氢-12-O- 乙酰基-20-O-惕各酰基肉珊瑚苷元3-O-β-黄夹吡喃糖基-（1→4）-β-磁麻吡喃糖 基-（1→4）-β-磁麻吡喃糖基（2）；12-O-乙酰基-20-O（N-甲基）邻氨基苯甲酰 基肉珊瑚甘元3-O-β-黄夹吡喃糖基-（1→4）-β-磁麻吡喃糖基-（1→4）-β-磁 麻吡喃糖甘（3）。其中1和2为新化合物，分别命名为mucronatoside A， mucrontoside B。3为已知化合物stephanoside E，系首次从该植物中分离得到。     

金属卟啉配合物催化3β-取代的△5-甾体衍生物立体选择性环氧化及酰胺化反应研究

研究了5,10,15,20-(2,6-二氯苯基)-卟啉锰及其钌配合物[Mn(TDCPP)Cl,Ru(TDCPP)CO]这类非手性的催化剂催化3β-取代的△5-甾体衍生物的非对映选择性环氧化及酰胺化反应.     

金属卟啉配合物催化3β-取代的Δ~5甾体衍生物立体选择性环氧化及酰胺化反应研究

研究了 5 ,10 ,15 ,2 0 (2 ,6 二氯苯基 ) 卟啉锰及其钌配合物 [Mn(TDCPP)Cl,Ru(TDCPP)CO]这类非手性的催化剂催化3 β 取代的Δ5 甾体衍生物的非对映选择性环氧化及酰胺化反应 .     

UPLC-MS法同时测定牛奶中磺胺类、喹诺酮类、甾体激素类及四环素类兽药残留

建立并优化了同时测定牛奶中10种磺胺类、6种喹诺酮类、8种甾体激素类以及1种四环素类药物共25种兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法。样品中目标药物经5%乙酸乙腈提取,HLB固相萃取小柱净化后,通过UPLC-MS测定,外标法定量。25种兽药在不同加标浓度下的回收率为61.6%~119.2%,组内相对标准偏差(RSD)为2.5%~13.4%,组间RSD为5.8%~14.2%,方法检出限为0.5~2.0μg/kg。     

配方奶粉中肉碱对映体的拆分及液相色谱-串联质谱法测定

采用手性试剂衍生化结合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法,分离了配方奶粉中的肉碱对映体,选用合适的手性试剂并优化了色谱分离条件。配方奶粉中的肉碱经乙醇提取后,采用手性试剂L-丙氨酸-β-萘胺衍生化,经C18色谱柱分离,乙腈-甲醇-四氢呋喃(A)和甲酸铵-甲酸溶液(B)为流动相梯度洗脱。在该分离条件下左旋肉碱与右旋肉碱的分离度Rs≥1.7,方法的检出限为0.3 mg/kg,定量限为1.0 mg/kg。在0.01~1.0 mg/L范围内线性良好,相关系数0.9991。低、中、高3个添加水平的平均回收率在90.9%~108%之间,相对标准偏差在4.5%~6.9%之间。方法可用于测定配方奶粉中左旋肉碱的含量及光学纯度,对国标方法的建立有一定参考意义。     

神经保护剂3β,5α,6β-雄甾三醇原料药中3种非对映异构体的分离与含量测定

建立了分离与测定3β,5α,6β-雄甾三醇(YC-6)原料药中3种非对映异构体的气相色谱方法。进行了分离条件的优化及方法学验证。研究结果表明:该方法可对YC-6与各非对映异构体进行分离,专属性良好(分离度≥1.5),精密度高(RSD≤2.0%);YC-6在6.0~30.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好。测定了非对映异构体的响应因子(1.59,1.32和1.41),并采用加校正因子的主成分自身对照内标法以峰面积计算各非对映异构体的含量。该方法操作简便,结果准确,可用于YC-6原料中各非对映异构体的分离及含量测定。     

药桑叶中黄酮类物质的薄层色谱鉴别和活性筛选及含量测定的研究

建立药桑叶中黄酮类物质的薄层鉴别及HPLC法测定其含量的方法,并对黄酮类物质进行抗氧化活性筛选。甲醇为溶剂超声提取桑叶中的黄酮类物质,以乙酸乙酯:水:甲酸:甲苯(17∶2∶2∶0.8)为展开剂于高效硅胶G板上展开,Al Cl3为显色剂,365 nm下检视。以二苯代苦味肼自由基(DPPH)溶剂显色,筛选抗氧化活性。采用PMC pack ODS色谱柱,以乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵溶液(p H=4.8)为流动相,梯度洗脱,检测波长350 nm,流速1.0 m L·min-1。桑叶中的芦丁、异槲皮苷及紫云英苷在紫外灯下出现明显斑点,薄层-生物自显影实验发现芦丁和异槲皮苷在紫色背景下呈淡黄色斑点,证明二者具有抗氧化活性。3种成分在35 min内均达到完全分离,芦丁、异槲皮苷和紫云英苷的平均回收率及含量分别为95.6%(0.85~1.14 mg·g-1)、97.4%(0.66~0.85mg·g-1)及96.2%(0.09~0.29mg·g-1)(RSD3%)。结论:本法操作简便,准确可靠,可用于药桑叶中黄酮类物质的薄层色谱鉴别及含量测定。