促性腺激素释放激素类似物/地欧酮对长臀血清雌二醇和睾酮质量浓度的影响

采用放射免疫测定技术,对长臀鮠(Cranoglanis bouderius)在不同的性腺发育时期的血清雌二醇(E2)和睾酮(T)质量浓度变动,以及注射促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)/地欧酮(DOM)后的血清E2和T质量浓度变动进行了研究。结果表明:血清E2质量浓度在雌鱼的性腺发育期明显升高,在性腺成熟期开始下降,性腺退化期降到最低;血清E2质量浓度在雄鱼的性腺发育过程中缓慢升高,并持续保持较低质量浓度,到性腺退化期略有升高。血清T质量浓度在雌雄鱼的变化情况相似,性腺发育期明显升高,而在性腺成熟期开始降低,到退化期降到最低。注射GnRH-A能显著提高性腺处于不同发育时期的雌鱼的血清E2质量浓度和雄鱼的血清T质量浓度,注射多巴胺拮抗剂地欧酮(DOM)对血清E2和T质量浓度没有影响,但是GnRH-A和DOM联合注射能使雌雄鱼血清E2和T质量浓度提高,在性腺发育期尤为明显,这和GnRH-A DOM促进血清GTH水平提高相一致。     

固相合成促性腺激素释放激素GhRH及其类似物

采用Merrifield多肽固相合成法 ,合成了促性腺激素释放激素GhRH ,即PGlu·His·Try·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro·Gly·NH2 以及类似物 [D -Ala6][去Gly·NH102 ]GhRH乙基酰胺 ,即PGlu·His·Try·Ser·Tyr·D -Ala·Leu·Arg·Pro·NH C2 H5和 [Arg2 ]GhRH ,即PGlu·Arg·Try·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro·Gly·NH2 ,并得到纯品     

固相合成促性腺激素释放激素GhRH及其类似物

采用Merrifield多肽固相合成法，合成了促性腺激素释放激GhRH，即PGlu.His.Try.Ser.Tyr.Gly.Leu.Agr.Pro.Gly.NH2以及类似物[D-Ala^6][去Gly.NH2^10]GhRH乙基酰胺，即PGlu.His.Try.Ser.Tyr,D-Ala.Leu.Arg.Pro.NH-C2H5和[Arg^2]GhRH，即PGlu,Arg,Try.Ser.Tyr.Gly.Leu.Arg.Pro.Gly.NH2并得到纯品。     

无脊椎动物促性腺激素释放激素研究进展

促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,_GnRH)是下丘脑-垂体-性腺(hypothalamic-pituitary-go-nad,_HPG)轴的关键信息分子,在脊椎动物的性腺发育、性成熟和繁殖功能的维持中起着重要作用。用免疫组织化学、酶联免疫吸附测定以及高效液相色谱等方法在多种无脊椎动物中也检测到了其存在,主要分布于中枢神经以及生殖系统。可见,GnRH在无脊椎动物中具有普遍存在性。目前已至少发现28种类型的GnRH,15种来自脊椎动物,13种来自无脊椎动物。目前,无脊椎动物中除被囊动物外,仅有真蛸、海兔和商乌贼已经获得了GnRH的mRNA序列,其肽链分子结构与脊椎动物的类似。GnRH在无脊椎动物中具有广阔的研究空间,将为无脊椎动物的生殖调控的研究提供参考。     

虎纹蛙促性腺激素及其释放激素含量的日变化

利用具有高度特异性的放射免疫测定法,研究了10月份虎纹蛙成蛙脑和脑垂体GnRH、以及脑垂体和血浆GtH含量的日变化,结果表明：雌蛙脑和脑垂体mGnRH含量、以及脑垂体cGnRH-Ⅱ含量都存在有明显的日变化;雄蛙脑垂体和血浆LH水平,以及雌、雄蛙血浆FSH水平也都存在明显的日变化;对各种激素日变化产生的原因进行了探讨.     

脊椎动物促性腺激素释放激素的结构、基因表达与调控的研究进展

综述了有关对脊椎动物促性腺激素释放激素的结构、基因表达与调控的研究进展 .阐明促性腺激素释放激素结构多样性 ,功能多样性 ,及其基因表达与调控 ,并对可能的应用前景作简要阐述     

重组促性腺激素释放激素基因原核表达的影响因素

为得到较多的GST-GnRH/TRS融合蛋白,深入研究其性质,对工程菌内GST-GnRH/TRS基因表达的条件进行了研究。结果表明,诱导GST-GnRH/TRS基因原核表达的最佳IPTG浓度为0.2mmol/L;在30℃诱导培养,能够获得较高的蛋白表达量;最佳诱导培养时间2h;最佳诱导培养的初始pH值为7.0;在振荡转速为135r/m1n、诱导培养时间为2h时,增大接种量,有利于原核基因的表达;在培养基因中添加适量的葡萄糖,能够提高GST-GnRH/TRS基因的原核表达,但葡萄糖含量较高时也不利于GST-GnRH/TRS基因原核表达;K 、Mg2 、Ca2 、Fe3 抑制GST-GnRH/TRS基因的原核表达,其中K 抑制作用最为强烈;添加少量的NH4 有利于提高GST-GnRH/TRS基因原核表达的量,但NH4 含量过高也不利于GST-GnRH/TRS基因原核表达。     

促性腺激素/类固醇激素对家兔小肠平滑肌功能的影响

研究促性腺激素及类固醇激素对家兔小肠平滑肌功能的影响.取家兔离体小肠平滑肌十二指肠、空肠、回肠的不同肠段,分别置于灌流肌槽中,连接张力传感器,信号输入BL-420E+生物技能实验系统,加入促性腺激素、类固醇激素,分别记录小肠平滑肌的收缩活动.结果表明,促性腺激素可以增大十二指肠和回肠的收缩活动力,减小空肠的收缩活动力;孕酮可以减小十二指肠和回肠的收缩活动力,增大空肠的收缩活动力;雌二醇可以增大十二指肠和空肠的收缩活动力,减小回肠的收缩活动力.不同类型的生殖激素都能够影响家兔小肠平滑肌的收缩功能,影响方式依赖于激素及肠段类型.     

人促性腺激素释放激素及转运肽的表达及生物活性测定

为研究重组人促性腺激素释放激素(GnRH)表达产物及其生物活性,将人促性腺激素释放激素及转运肽基因重组到表达载体PTYB2上,测序结果表明序列正确,未改变读码框架,然后转入大肠杆菌BL21(DE3)PlysS中进行诱导表达,纯化后的表达产物经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,以其抑制肿瘤前列腺癌细胞增生作用验证其生物学活性。     

投喂LHRH-A粗品对雌性金鲫促性腺激素分泌和卵巢发育的作用

研究投喂不同剂量LHRH-A粗品对雌性金鲫GtH分泌和卵巢发育的作用。以LHRH-A粗品0.01 mg/g饲料和0.1 mg/g饲料的剂量投喂6周后,与对照组相比,金鲫血清的GtH水平显著升高;部分卵母细胞已发育至Ⅳ 时相,GSI明显增长。这些结果表明将LHRH-A粗制品拌入饲料长期投喂金鲫后,能使血清GtH水平明显提高,进而促进性腺的发育成熟。     

外源激素对南方鲶血清促性腺激素水平的影响

南方鲶l龄幼鱼促性腺激素(GTH)分泌调节研究表明：南方鲶幼鱼GTH的释放受到促性腺激素释放激素(GnRH)和多巴胺(DA)的双重调控．但DA不能抑制基础的GTH释放，而只能抑制GnRH刺激的GTH释放，DA对GTH的释放抑制作用是间接通过GnRH实现的．这与研究过的鲤科鱼类不同．而与研究过的其它鲶形目鱼类相似．注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后南方鲶血清GTH水平上升．hCG促使血液GTH水平升高可能与hCG与非洲鲶促性腺激素抗体具有一定的交叉免疫反应有关．hCG与促黄体释放激素类似物(LHRH-A)结合注射后血清GTH水平也显著高于单独注射hCG或LHRH-A后的血清GTH水平，这种升高可能来源于外源GTH(hCG)和LHRH-A刺激脑垂体分泌的内源GTH。     

斑鳠血清促性腺激素的季节变化和埋植甲基睾酮对斑鳠促性腺激素分泌的影响

 采用鲤鱼GtH β-亚基(cGtH β)的标准品和抗血清建立了斑鳠异源的促性腺激素（Gonadotropin, GtH）放射免疫测定技术,并对斑鳠性腺指数（Gonadosomatic index, GSI）和GtH分泌的季节变化,以及埋植甲基睾酮（17α-methyl-testosterone,MT ）对斑鳠GtH分泌的影响进行了研究。结果表明：斑鳠雌雄鱼GSI值分别在5月份和6月份达到最高,与其他月份相比有显著性提高（P<0.05）;斑鳠雌鱼血清GtH水平在6月份达到最高,与10月和12月相比有显著性提高（P<0.05）,斑鳠雄鱼血清GtH水平在6月份达到最高,4月、10月和12月相比有显著性提高（P<0.05）;雌雄鱼血清GtH水平表现出基本相同的变化趋势,并且血清GtH水平差异不显著（P>0.05）;埋植MT对斑鳠雌雄鱼血清GtH水平有一定影响,在性腺发育初期能提高雌雄鱼血清GtH水平,而在性腺成熟和排卵期能降低雌雄鱼血清GtH水平。上述结果表明在斑鳠的人工繁殖中可以采用埋植MT的方法对斑鳠进行催熟和催产。     

促性腺激素与性腺激素对母鸡产蛋性能作用的试验

选择180只,34周龄“京白823”母鸡,采用孕酮、孕酮+PMSG处理,以探讨提高鸡产蛋率的激素处理途径。试验结果,孕酮在每日每天0.02—0.05毫克时,可明显提高鸡产蛋率(P<0.01)。注射PMSG后,母鸡产蛋量明显增多,但多次重复处理可造成“钝化”现象。     

电针刺激去势雌性大鼠肾俞脾俞双穴对其血清中睾酮、雌二醇和孕酮浓度的影响

目的 :为研究针刺治疗更年期综合征的作用机制提供实验依据 .方法 :以去势 4～ 5月龄雌性SD大鼠为更年期模型 ,选取“肾俞”、“脾俞”两个穴位 ,电针治疗 7天后 ,测定血清雌二醇 (E2 ) ,睾酮 (T)以及孕激素 (P)的含量 .实验结果表明 ,电针雌性大鼠“肾俞”、“脾俞”穴可使老年大鼠血清中雌二醇的水平升高 ,睾酮的水平降低 ;对青年大鼠血清中孕酮、雌二醇、睾酮的水平无明显影响 .结论 :电针刺激“肾俞”、“脾俞”双穴对大鼠体内雌二醇和睾酮水平有调节作用 ,可以使老年大鼠体内雌二醇水平升高 ,从而缓解了更年期症状 .     

GnRH-A免疫母兔对血清LH和FSH浓度的作用

目的：探讨促性腺激素释放激素类似物（GnRH-A）对动物性腺激素分泌的作用与机理,为临床应用奠定基础．方法：以EDC-HCL为偶合剂,将GnRH—A与BSA连接为复合物,制备GnRH—A抗原．24只日本大耳白兔分为四组,在实验I组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组兔子的颈背部分别皮下注射1．0mL（100μg,／mL、100μg／mL和50μg／mL）GnRH—A抗原,实验Ⅱ组和实验Ⅲ组于第3周以相同剂量加强注射一次,在实验的不同时间采血、分离血清,用ELISA法测定促卵泡刺激素（FSH）和促黄体生成素（LH）含量．结果：EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的FSH浓度在注射后30d开始升高,至40d达到峰值。EG-Ⅱ和EG-Ⅲ明显高于EG-Ⅰ和对照组及EG-Ⅲ（P〈0．05）,整个实验期间EG-Ⅰ和对照组无显著差异．EG-Ⅱ和EG-Ⅲ的LH注射后不断升高,在40d至峰值（P〈0．05）,此后降低,30d～50d时EG-Ⅱ明显高于EG-Ⅰ和EG-Ⅲ及对照组．结论：兔体内注射GnRH-A可以明显增强LH和FSH的合成与分泌,加强注射效果更明显,而且与注射剂量相关,持续时问为40d左右．     

E2对鲤鱼生长激素分泌的影响：离体研究

采用离体灌流孵育的方法研究了１７β－雌二醇（Ｅ２）对鲤鱼脑垂体生长激素（ＧＨ）分泌的影响．结果表明：１μｍｏｌ／ＬＥ２作用于性腺成熟期鲤鱼脑垂体碎片３０ｍｉｎ后,ＧＨ基础分泌显著提高,２ｈ后达到最大值,随后逐步下降,４ｈ后ＧＨ基础分泌水平与作用前无显著性差异．用Ｅ２（１μｍｏｌ／Ｌ）进行１０～１２ｈ的过夜孵育,ＧＨ的基础分泌无显著性变化,但影响了脑垂体对ＬＨＲＨ－Ａ和ＴＲＨ刺激的反应性,对前者有抑制作用,对后者有促进作用     

促性腺激素对小鼠腔前卵泡及其卵母细胞体外发育的影响研究

通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索促性腺激素(FSH、LH)对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,在卵泡培养的同期相比,卵泡增长值最大组为FSH400+LH200组,而卵母细胞增长值最大组却是FSH400组.从添加物上看,各个实验组与对照组之间,卵泡直径和卵母细胞直径增长值都存在显著性差异(P0.05).随着培养时间的延长,FSH400+LH200组卵泡存活率、成腔率表现为最高,分别为68.6%,47%.从卵泡发生生发泡破裂率和第一极体排出率来看,FSH400+LH200组发生生发泡破裂率高于其他组,为17.6%,但第一极体排出率却低于FSH400组.因此,改良的TCM199无血清基础培养液中联合添加400mIU/mL FSH和200mIU/ML LH效果优于单独添加组的效果.     

促性腺激素处理对性未成熟小鼠子宫中STAT3表达和激活的影响

信号转导和转录激活因子3（STAT3）在动物的早期胚胎发生、细胞生长、凋亡控制和细胞运动等过程中起着很重要的作用。以小鼠为材料,利用原位杂交和免疫组化等方法,研究了促性腺激素对性未成熟小鼠子宫中STAT3表达和激活的调节。用PMSG处理性未成熟的小鼠,可刺激子宫腔上皮和腺上皮中STAT3的表达上调、发生酪氨酸磷酸化和核转位而激活。hCG单独处理也能导致STAT3表达的上升和酪氨酸磷酸化的发生,但反应较慢。PMSG处理48h后再以hCG处理24h内能促进子宫腔上皮、腺上皮、基质和肌层细胞中STAT3的表达和激活。研究表明,促性腺激素处理能够上调小鼠子宫中STAT3的表达和激活,促性腺激素处理后小鼠子宫的增殖可能与Jaks-STAT3通路的激活有关。     

不同浓度尼古丁对大鼠黄体细胞分泌雌二醇和孕酮的影响

为了研究不同浓度尼古丁对大鼠卵巢黄体细胞存活情况、在有无hCG支持下分泌孕酮、雌二醇的影响 ,将妊娠第 4天的母鼠卵巢中取出的黄体细胞培养于含 5 %胎牛血清的M199培养基中 ,放置于 37℃、5 %CO2 、饱和湿度的培养箱中培养 .大鼠黄体细胞培养 1～ 2小时后 ,分组加入尼古丁生理盐水溶液 ,最终浓度为 :4mg mL、0 4mg mL、0 0 4mg mL、0 0 0 4mg mL、0 0 0 0 4mg/mL ,将大鼠黄体细胞分为两组 ,一组为基础分泌组 ,另一组为hCG刺檄组 .在大鼠黄体细胞受尼古丁作用 4小时后 ,吸取培养液上清部分以放射性免疫法测定孕酮和雌二醇的含量 ,同时用MTT比色法测定黄体细胞存活情况 .结果发现 ,大鼠黄体细胞在有无hCG的刺激下 ,孕酮 ,雌二醇的分泌量均是随着加药浓度的增加而增加 ,大致呈线形关系 ,但其基础分泌量远远小于hCG刺激下的激素分泌量 .     

重组人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白的可溶性表达、纯化和对肿瘤细胞的抑制活性

以人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A衍生物（GnRH-PE39KDEL）为研究对象,根据大肠杆菌密码子偏好性优化,通过基因合成的方法获得重组蛋白核酸序列,连接至pET-24b载体中,并转化入大肠杆菌BL21 (DE3)及BL21 ( DE3) plyS中进行诱导表达。结果显示,在含有2 mg/mL葡萄糖的LB培养基中37 ℃培养至OD-600约为0.6 h,加入0.2 mmol/L IPTG在30 ℃诱导2 h后,重组蛋白可以实现可溶性高表达。工程菌经超声波破碎、高速离心后,经镍柱纯化和脱盐后得到重组蛋白,蛋白纯度达到95 %以上,蛋白最终得率在2.6 mg/g菌体。重组蛋白经IC-50检测,可以较好地抑制肿瘤细胞株的生长。