应用少数引物对3个绵羊类群的RAPD分析

对3个不同绵羊类群（波德代，无角陶赛特，藏陶杂种羊）的共11个样本DNA进行了RAPD分析。结果表明，无角陶赛特羊与藏陶杂种羊2个种群间遗传距离最小，为0．1102；波德代羊与藏陶杂种羊2个种群间遗传距离最大，为0．2989；无角陶赛特羊与波德代羊2个种群间遗传距离为0．1655。     

RAPD标记对甘薯及其近缘野生种的遗传多样性分析

用随机扩增多态性DNA（RAPD）分析技术对甘薯近其近缘野生种进行了遗传多样性分析,使用15种10个碱基的随机引物,对17个甘薯品种及其近缘野生种的基因组DNA进行了扩增,共产生了105条DNA带,其中91条为多态性带,通过聚类分析将17个甘薯品种及其近缘野生种聚类成3个类群：A类群由三裂叶野牵牛（Ipomoeatriloba）单个野生种组成,C类群由海滨野牵牛（I.littoralis）和二倍体三浅裂野牵牛（I.frifida2x）组成,B类群则由四倍体和六倍体三浅裂野牵牛以及12个甘薯品种组成。     

疣蝗5个种群间遗传分化的RAPD分析

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在ＤＮＡ分子水平上对疣蝗５个种群间的遗传差异进行了研究。在２３个引物中有６个引物出现稳定的扩增带，扩增总带数为６６条，其中５３条具多态性，占８０．３％，平均每个引物８．９条。利用Ｎｅｉ ＆ Ｌｉ相似系数和ＵＰＧＭＡ聚类法对结果进行分析，发现用该法检测到的遗传差异从南向北是连续性梯度差异，因而建议所研究地区疣蝗是一个单型种。     

基于RAPD分析用的佛手DNA的提取

对佛手DNA提取过程从不同方面进行了改良、优化，筛选出较理想的佛手DNA提取方法：每eppen—dorf管鲜样品取量为0．1g～0．25g，700μL提取缓冲液，加提取液前用液氮研磨，Vc(抗坏血酸)添加量为ω(Vc／鲜样)=0．1．该方法分离出DNA的A260／A280大于1．9，符合佛手RAPD(随机扩增多态DNA)分析要求，在佛手遗传多态性分析和品种分子鉴定中具有良好的应用前景。     

浙江省及其临近地区益母草的RAPD分析

运用8个有效的10mer-寡核苷酸引物对浙江省及其邻近地区益母草(Leonurus japonicus)7个居群的基因组DNA进行了RAPD(random amplified polymorphic DNA)扩增，共检测到65个位点，其中多态位点45个，占69．23％。应用Jaccard公式计算了7个居群在65个位点上的相似性，并以此为基础，应用主坐标排序法作出了7个居群遗传分化的三维排序图，结果表明，浙江省及其邻近地区益母草的遗传性状总体较为接近，7个居群的遗传分化与其地理分布有一定的联系。     

日本对虾野生和养殖群体遗体多样性的RAPD分析

为加深和丰富对我国最为重要的经济对虾类之一日本对虾（Penaeus japonicus)遗传多样性的认识,分析了日本对虾一个野生地理种群（台湾海峡北部）及其移植到北方水域进行繁育的养殖群体各23个个体的随机扩增DNA多态性,实验选取OPK组20个10bp随机引物中的17个产生效果稳定的扩增结果用于群体遗传多样性分析,在两个群体中共检测出155个位点。野生种群和养殖群体的多态比例分别为85.14％和78.62％。用经修正的Shannon表型多样性指数量化两个群体的遗传多态度,野生种群和养殖群体的遗传多态度分别为0.214和0.201;两群体的遗传相似度为94.20%,遗传距离为0.058。     

水杉自然居群遗传多样性的RAPD研究

用随机扩增多态性方法对四川、湖南、湖北交界处的２７个水杉样本进行了基因组ＤＮＡ多态性分析．１１个随机引物共获得ＲＡＰＤ谱带１２１条,多态性谱带占５３％．聚类分析结果表明：水杉个体间的遗传距离与这些个体的地理分布相关,即相同产地个体间的遗传距离较小,不同产地个体间的遗传距离较大．与松柏目其它类群相比,水杉居群的遗传多样性程度高于银杉（３２％）,而在所处的大类群中则处于中等水平．初步结果表明,尽管孑遗物种水杉的自然种群的目前分布范围和个体数目非常有限,但是它仍然保持着中度的遗传多样性水平．可推测,孑遗植物的遗传多样性水平具有一定的变异范围     

疣蝗5个种群间遗传分化的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,在DNA分子水平上对疣蝗5个种群间的遗传差异进行了研究.在23个引物中有6个引物出现稳定的扩增带,扩增总带数为66条,其中53条具多态性,占80.3%,平均每个引物8.9条.利用Nei & Li相似系数和UPGMA聚类法对结果进行分析,发现用该法检测到的遗传差异从南向北是连续性梯度差异,因而建议所研究地区疣蝗是一个单型种.     

褐沙蒿遗传分化的研究

采用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法,对5个褐沙蒿(ArtemisiaintramongolicaH.C.Fu)种群的遗传分化进行了研究.结果表明,15个引物共扩增出283个位点,其中多态位点有269个,多态位点百分率达95.1%.各种群的多态位点百分率较高,在84.1%～89.0%之间,除正镶白旗种群略高外,其他均比较接近.各种群间有一定的遗传分化,基因分化系数Gst=0.1204,表明87.96%的遗传变异存在于种群内.基因流N m=3.6524>1,说明褐沙蒿种群间存在着广泛的基因交流.聚类分析显示,褐沙蒿种群之间的遗传距离与地理距离有一定的相关性.     

高粱抗丝黑穗病基因的分子标记RAPD分析

丝黑穗病是影响我国高粱生产发展的主要病害之一,在高粱产区每年都有发生,发病率有时高达70 %,给生产造成很大损失,而选育抗病品种是最为有效的抗病策略.分别以高粱2381恢复系(抗病)、矮四恢复系(感病)的叶片为试材,采用CTAB法提取高粱基因组DNA,并应用RAPD筛选技术对高粱基因进行分子标记.在最佳的RAPD反应体系中共筛选了100个RAPD随机引物,筛选出来27个适宜引物,获得了稳定的RAPD扩增结果及多态性较好的DNA谱带.其中有6个引物对DNA扩增产生了差异谱带.     

龙柚离体培养快速无性繁殖技术研究

龙柚的茎尖和幼嫩的茎段离体培养快速繁殖试验研究结果：外植体用75％的乙醇浸泡0.5min后再用0．1％的HgCl2溶液浸泡10min灭菌效果最好；不同外植体的培养结果是茎段（带腋芽的）的繁殖系数大于茎尖，差异达到显著水平；培养基以MS添加6-BA0．5mg／L和IBA0．2mg／L对不定芽诱导效果最好，增殖比例达到4．2，与其它处理差异达到极显著；无根苗转入1／2 MS附加IBA1．0mg／L的培养基中不定根诱导率为78．3％．添加活性炭对培养材料生根诱导有促进效果．     

福建6种柚RAPD鉴定分析

以福建省栽培面积较广,果实成熟期不同的渡尾文旦柚、琯溪蜜柚、坪山柚、长泰文旦柚、龙柚、下河蜜柚6种柚为研究对象,用100个10bp的随机引物对6种柚的基因组DNA进行RAPD分析,筛选出能扩增出稳定多态性片段的引物31个,一共扩增出174条片段,其中多态性片段有137个,占78.74%.聚类分析的结果,RAPD标记所反映的6个品种之间的遗传相互关系与传统的分类结果是一致的.     

文旦柚和下河蜜柚组织培养快速无性繁殖

对两种柚类的茎尖和幼嫩的茎段进行组织培养快速无性繁殖，研究结果表明：不同柚类的培养结果不同，文旦柚的繁殖系数大于蜜柚的，为386．2％；文旦柚不同外植体的培养结果是带腋芽的茎段的繁殖系数大于茎尖，差异达到极显著；茎段在附加激素的基本培养基MS上培养诱导形成不定芽，低浓度的奈乙酸（NAA）和6-苄基嘌呤（6-BA）对外植体的成活率没有显著影响，激素浓度升高则会显著影响外植体的成活率；培养基以MS添加6-BA0．5mg/L和NAA0．2mg/L的培养效果最好，繁殖系数达到407．1％，与其它处理差异达到极显著水平；     

不同生长期的柚子叶的挥发性成分分析

对柚子的老叶和嫩叶的挥发油化学成分进行研究,并探讨其差异,为柚子叶的开发利用提供科学依据.采用无溶剂微波萃取法提取柚子老叶和嫩叶的挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其化学成分进行分析,并以面积归一化法测定各个成分的相对含量.从柚子老叶和嫩叶的挥发油中分别分离鉴定出了59、51个化合物,分别占其挥发油总量的91.29%、87.45%,且2个部分的挥发性成分及含量差异性较大.柚子叶中的挥发性成分非常丰富,其中,许多化学成分具有芳香性或药理药效作用,在香精香料或医疗领域具有一定的利用价值.另外,柚子老叶的得油率比嫩叶高,其挥发性成分也比嫩叶的丰富,故柚子叶的采收宜在生长后期.     

柚果皮果胶浸提过程及动力学分析优化设计

以琯溪蜜柚果皮为原料,采用果胶酸解浸提法,基于果胶在浸提过程中包括原果胶转变为果胶、果胶从组织扩散到溶剂、果胶大分子降解等进程,以同步串联反应法构建果胶浸提动力学模型,获得基于浸提工艺优化和果胶同步降解影响的浸提动力学方程,进而进行模型验证分析及参数优化.有效性(残差分析及F检验)检验表明:该模型可应用于分析柚果皮果胶浸提动力学过程,在温度70 ～ 90℃,浸提过程表观活化能Ea为31.34kJ· mol-1;优化分析获得在浸提液pH =2.0,浸提温度90℃,浸提时间90.25 min,料液质量与体积比为1:40时,柚果皮果胶浸提得率11.83％,此结果与正交设计优化结果吻合.     

NPR1和Defensin双价抗病基因过量表达载体的构建及其对沙田柚的遗传转化

柑橘黄龙病是一种严重危害柑橘生产上的毁灭性病害,目前对该病尚无有效的防治方法.为了培育柑橘黄龙病抗性育种材料,本文分别从克里曼丁橘和荔枝品种三月红叶片中提取总DNA,根据已公布于NCBI中的基因序列设计引物,克隆获得了NPR1和Defensin基因序列。以pbi-121作为载体骨架,构建了NPR1和Defensin双价抗病基因过量表达载体（命名为ND-pbi121）.通过根癌农杆菌介导的遗传转化,获得了6株PCR检测为阳性的导入了NPR1和Defensin基因的沙田柚植株.这一结果将为探究NPR1和Defensin基因的过量表达对柑橘黄龙病的抗性影响提供试材和技术基础.     

沙田柚S-RNase基因的克隆及序列分析

利用高通量测序技术对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序。通过差异分析得到沙田柚S-RNase基因序列。该基因全长为1 238bp(GenBank登录号为KP172529),开放阅读框(ORF)全长为834bp,共编码278个氨基酸,编码的蛋白质的相对分子质量为31.402kDa,理论等电点为5.30。S-RNase蛋白为亲水性蛋白,共有17个可能的磷酸化位点。氨基酸序列分析表明,其编码的氨基酸与柚Citrus maxima、沙糖桔Citrus reticulata和甜橙Citrus sinensis的同源性分别为99%、98%和96%。系统进化树显示沙田柚S-RNase基因与柚、沙糖桔和甜橙亲缘关系很近,属于同一进化分支。     

柚果中柚皮苷含量与果实苦味相关性研究

运用HPLC法对柚（Citrus grandis L.）果实不同部位的柚皮苷含量进行测定.并对该方法相关问题进行讨论.该方法线性范围：0.056～0.504 μg（r=0.9998）,待测组分分离效果显著(R＞1.5),柚皮苷平均回收率为98.6%（RSD=2.13%）.柚果各部位柚皮苷含量差异显著,基本规律为果皮最高,其中以台北柚含量最高达到832.76×10-6 g/100 g鲜重,可作为工业生产的新原料,其次是种子,汁囊中最低.苦味程度随汁囊中柚皮苷含量的鲜重比由低到高依次增加而增强.     

咪鲜胺壳寡糖复合涂膜对脐橙果实采后品质的影响

以脐橙为试材,果实采后以1％的壳寡糖为涂膜剂,分别与质量分数为0.01％,0.05％,0.10％浓度的咪鲜胺(有效成份450 g/L水乳剂)组合,浸泡处理后置于18～25℃,75％～85％RH环境中贮藏,比较与不涂膜处理及仅用1％的壳寡糖处理对脐橙贮藏品质、采后生理的影响.结果表明:不同浓度的咪鲜胺壳寡糖复合涂膜均能降低果实的失重率、腐烂率;延缓果实可溶性固形物、可滴定酸、还原性抗坏血酸含量的下降;抑制呼吸强度、丙二醛含量、相对电导率的上升;有效保持贮藏脐橙果实的感官品质、风味品质、营养品质,延长果实的贮藏期.其中,0.05％咪鲜胺与1％壳寡糖复合涂膜处理果实的各项品质、生理指标优于其它处理组,为有效延长脐橙果实贮藏时间的最经济、安全组合浓度.     

中国名柚资源与品种现状研究

关于柚类起源有3种观点，作者认为柚起源于中国，并指出柚的植物学分类地位存在争议，我国柚类的遗传资源多样化，供生产采用柚品种近百个，大致分为水田柚、文旦柚和杂种植3个品种群；同时具有极早熟、早熟、中熟和晚熟配套的柚类资源结构，近20世纪80年代以业，国家加强了对柚类生产的领导，全国柚类栽培面积从1985年的0.7万hm^2上升到1999年的万hm^2，国家农业部累计评选出3个部优、11个部优、11个金奖、10个银奖和2个铜类产品称号，其中沙田柚、玉环文旦等7个名柚品种占全国柚类栽培面积的80%左右，最后，作者指出中国柚类品种改良应着眼于5个目标大力开展。