委内瑞拉产地龙须菜藻红蛋白基因的克隆及其系统学研究

本文报道了红藻Gracilaria lemanei formis委内瑞拉株的藻红蛋白基因的部分序列，将序列与其它红藻-Rhodella violacea，Polysiphonia boldii，Griffithsia monolis，Porphyra tenera，phyra yezoensis及青岛产龙须菜的相应序列对齐后，进行了系统学研究。结果显示，同一属的藻白α和β亚基之间的间隔序列，从长度到核苷酸序列均非常相似，而同一科不同属或同一目的科该序列有很大的不同；两不同产地龙须菜的PE基因在β亚基上的转换多于颠换，说明β亚基比α基保守；委内瑞拉来源龙须菜与青岛产地龙须菜可能不属于同一物种，应为同属不同种关系；由蛋白基因所得的系统树包括3个与建立在形态标准上的遗传位置一致的分支；藻红蛋白基因序用于种间及更高地位的分子系统研究。     

藻红蛋白基因部分序列的克隆和顺序分析

报道了真核红藻－龙须菜的藻红蛋白亚基基因的部分序列,位于β亚基的近碳端,α亚基的近氮端,包括β亚基部分３０９个核苷酸,α亚基部分１６２个核苷酸,还有间隔部分５５个核苷酸,可编码β近碳端的１０２个氨基酸和α近氮端的５４个氨基酸,并与目前已知的相应序列做了比较,该序列与已知红藻ＰＥ亚基基因相应部分的相似性为７７．９％和８１．１％。对应的氨基酸序列的相似性为７９．５％到８６．５％,蛋白质序列的保守性高于     

R-藻红蛋白的提取方法的比较研究

R-藻红蛋白的提取是其分离纯化的重要前提.因此,选择适合的提取方法是较为关键的步骤.以坛紫菜藻为材料,分别采用反复冻融法、液氮研磨法、细胞溶胀法、低浓度CaCl2提取法、SDS溶液提取法、纤维素酶提取法和超声波破碎法提取R-藻红蛋白,以期确定最佳的提取方法.研究结果表明:在反复冻融法中,以磷酸盐缓冲液为提取液,冷冻2 ...     

海生红藻R-藻红蛋白和隐藻藻蓝蛋白光吸收系数测定

选用Bradford法和Lowry法,以牛血清蛋白和γ-球蛋白作为标准蛋白,分别对从海生红藻异管藻（Heterosiphonia japonica）和多管藻（Polysiphonia urceolata）以及蓝隐藻（Chroomonas placoidea）中分离纯化的异管藻R-藻红蛋白（HR-PE）、多管藻R-藻红蛋白（PR-PE）、蓝隐藻藻蓝蛋白（Cr-PC）进行了蛋白浓度及其特征吸收峰的光吸收系数测定.根据2种方法和2种蛋白针对3种藻胆蛋白的测定结果以及影响结果的主要因素进行了细致地分析和比较,Lowry法是进行藻胆蛋白,尤其是六聚体藻红蛋白浓度及光吸收系数测定的更适合、准确的检测方法;在进行同类或相同藻胆蛋白之间相对含量、比例的定量分析时,Bradford法是一种更便捷的测定方法.由于藻胆蛋白光吸收系数值与选用的蛋白定量检测方法及其所用的标准蛋白直接相关,在使用和比较藻胆蛋白光吸收系数值时必须明确检测方法和标准蛋白,否则藻胆蛋白光吸收系数值将不具有可比性.     

大型海藻龙须菜蛋白提取及双向电泳体系的优化

本文以龙须菜为材料,比较了尿素/硫脲法,改良丙酮沉淀法,Trizol法3种不同蛋白质提取方法;并从胶条长度及pH范围,上样量,分离胶浓度等因素探讨了双向电泳技术体系的优化.结果表明:采用Trizol法辅以超声破碎提取龙须菜总蛋白效果优于尿素/硫脲法和改良丙酮沉淀法;同时,采用pH 4-7,11 cm胶条,上样量为800μg,分离胶浓度为12%的双向电泳条件可获得背景清晰,分辨率好的二维电泳图谱.该体系也可以为龙须菜属和江蓠属其他海藻的蛋白质双向电泳分析提供参考.     

红毛菜藻红蛋白的提取及稳定性研究

用多种提取方法提取红毛菜（Bangia fusco-purpurea）藻红蛋白并对藻红蛋白粗提液的稳定性进行了初步研究。冻融法提取藻红蛋白的得率较高；温度、pH、铜离子、铁离子及光照对藻红蛋白稳定性有很大影响，藻红蛋白较适宜的保存条件为；低温（5℃左右）、pH5.7、避光。根据实验结果，提出了藻胆蛋白光解反应的可能机理。     

硫酸铵盐析条件对多管藻R-藻红蛋白和R-藻蓝蛋白得率和纯度的影响

 藻胆蛋白是一类用途广泛、市场前景广阔的天然色素蛋白,但分离纯化困难。粗提条件优化对最终获得的藻胆蛋白的得率和纯度影响较大。研究了硫酸铵饱和度、盐析次数、分级盐析对海洋红藻多管藻R-藻红蛋白（RPE）和R-藻蓝蛋白（RPC）提取得率和纯度的影响。结果表明,多管藻RPE和RPC的得率随硫酸铵饱和度的提高而增加,饱和度为60%时得率最高,分别为91.59%、97.98%。饱和度20%的硫酸铵仍能沉淀47.3%的RPE和24.8%的RPC。RPE的纯度随硫酸铵饱和度的提高而降低,但RPC纯度随硫酸铵饱和度的提高而增加,至饱和度为45%时纯度最高,之后随饱和度的提高而缓慢降低。饱和度<40%时,RPE/RPC得率比随硫酸铵饱和度提高而增加;饱和度>40%时,RPE/RPC得率比趋于稳定。硫酸铵盐析2次与盐析1次相比,RPE、RPC的得率降低,但纯度提高。二步法盐析比一步法盐析RPE、RPC的纯度分别提高122.42%、18.67%,但得率降低。因此硫酸铵盐析提取多管藻RPE、RPC时,以饱和度60%为宜,盐析2次,二步法盐析有利于藻胆蛋白纯度的提高,二步法盐析时初次使用的硫酸铵饱和度应<20%。藻胆蛋白盐析条件优化可为藻胆蛋白的进一步分离纯化奠定基础。     

R—藻红蛋白的多对同晶置换联合相位的分析…

在已报道的Ｒ－藻红蛋白金和汞重原子衍生物的基础上，又得到了含重金属铂和汞的与Ｒ－藻红蛋白母体同晶型的另外２种重原子衍生物，使用全部４种重原子衍生物联合相位的品质因子为０．７０。经溶剂过滤法处理，相位得到了很大改善，总的品质因子增加到０．８６。从已改善的ＭＩＲ的相位计算的电子密度图上可以清晰的观察到Ｒ－藻红蛋白亚基间的配置和分子的轮廓。     

龙须菜多糖的提取、分离及抗氧化活性的研究

对龙须菜多糖的最适提取工艺条件、分离方法及其抗氧化活性进行了研究. 结果表明: 提取多糖的最适条件为浸提温度90℃, 浸提时间4 h, 料水比1∶100. 分别经DEAE 纤维素离子交换层析柱和Sephadex 100层析柱分离, 均显示出提取的多糖含有3种以上组分. 抗氧化实验显示该多糖对Fenton体系产生的·OH自由基具有较强的清除能力.     

吖啶红光度法测定荸荠皮的抗氧化活性

在稀硫酸介质中,羟自由基能迅速氧化吖啶红而使其褪色,溶液在526nm处的吸收减弱.荸荠皮水提取液(AEETP)在400～700 nm范围内无明显吸收.在吖啶红 羟自由基体系中加入AEETP,可以部分清除羟自由基,使溶液在526 nm处的吸收显著增强.在硫酸浓度为4.00×10-3mol/L、吖啶红浓度为2.73×10-7mol/L、过氧化氢浓度为2.65×10-5Mol/L、FeSo4浓度为3.40×10-5Mol/L和反应时问为15 min的最佳实验条件下,AEETP的加入量在0～1.75 mL范围内,吸光度增加值与AEETP加入量成线性关系,回归方程为A526=0.063 6V AEEP 0.346 6,相关系数R=0.995 2.在相同的实验条件下,测得AEETP对羟自由基的清除率为33.7%.实验结果说明,料液比为1:10的AEETP稀释5.7倍后,仍具有较强的抗氧化活性.     

环境因素对龙须菜过氧化物酶活性的影响

研究了温度、盐度、N浓度和重金属4种环境因素对龙须菜(Gracilaria lemaneiform is)过氧化物酶(Per-oxidase,POD)活性的影响.结果表明,龙须菜POD对温度的变化极为敏感,30℃或35℃条件下12 d内POD活性上升近5倍.N浓度升高则龙须菜POD活性呈现先下降再升高的趋势;随着Hg2 、Pb2 浓度增大,龙须菜POD活性先下降后上升再下降,显示出比较复杂的变化规律;高盐度或低盐度胁迫明显降低了龙须菜POD活性.对提纯的龙须菜POD离体酶的研究表明,盐度、N浓度和重金属是通过完整细胞的协同作用来影响POD活性的.温度变化可明显诱导龙须菜POD离体酶的活性变化,显示温度对POD活性的影响不依赖于细胞的完整性.     

环境因子对4种江蓠生长的影响

【目的】为了更好的发展我国海南地区江蓠（Gracilaria）的人工栽培产业,考察4种不同江蓠品种在海南地区不同环境下的生长情况。【方法】比较采自广州南澳岛的脆江蓠（Gracilariabursa-pastoris）和龙须菜（Gracilariopsislemaneiformis）与海口当地的菊花江蓠（Gracilaria lichenoides）和细江蓠（Gracilaria tenuistipitata ）在不同的盐度、温度、光照以及氮源条件下20d内的生物量变化情况。【结果】细江蓠和菊花江蓠能耐受盐度范围较宽,耐受高温能力强。脆江蓠和龙须菜对盐度的耐受范围较窄;在合适的盐度条件下,能在水温达30℃的条件下存活较长时间;添加硝酸钠能明显促进脆江蓠和龙须菜的生长。在合适的盐度条件下,脆江蓠的生长速度与当地的细江蓠相当。【结论】对脆江蓠进行良种培育与筛选,能获得适宜在海南进行推广栽培的优良江蓠藻种。     

海带中岩藻多糖提取工艺的研究

以海带为原料研究岩藻多糖的提取工艺,并初步研究了一些因素对岩藻多糖的自由基清除能力的影响．研究表明,岩藻多糖的最佳提取温度为100℃．提取时间为611,加水量为90mL／g,提取率为11.05％：温度对自由基清除能力影响不大,岩藻多糖质量浓度与自由基清除能力成正相关．     

细江蓠硫酸酯多糖的提取工艺优化

为实现资源丰富的南海海藻细江蓠的高值化利用,对细江蓠硫酸酯活性多糖的提取工艺进行优化研究.采用能有效保护硫酸酯基团的方法提取细江蓠硫酸酯多糖,通过正交实验研究了浸提温度、浸提时间、加水量与多糖产率的关系.结果表明,对细江蓠多糖产率的影响程度依次为:浸提时间>加水量>浸提温度,其最佳提取工艺为:浸提时间3 h,加水量60倍,浸提温度90℃.多糖产率可达13.42%.     

几种中药不同溶剂组分的抗氧化活性研究

采用连苯三酚自氧化法，对8种中药浙贝母、茵陈、柴胡、青蒿、桑皮、山楂、三七和薏仁，分别用石油醚、二氯甲烷，乙醇和水分级草取进行提取分离，测试各提取物的抗氧化活性。结果表明，其中7种中药都有一定抑制连苯三酚自氧化，清除超氧阴离子自由基的能力，且脂溶性或醇溶性的提取物抗氧化作用较强。     

大型海藻龙须菜对两种海洋赤潮藻的生长抑制效应

利用共培养系统研究了在不同光照强度、生物量条件下,大型海藻龙须菜(Gracilarialemaneiform is)及其水溶性抽提液对两种海洋赤潮藻旋链角毛藻(Chaetoceros curvisetus)和椎状斯氏藻(Scrippsiella trochoidea)的生长抑制效应.结果显示,龙须菜和两种赤潮藻间存在着营养竞争,受龙须菜的影响,两种赤潮藻的最大密度与对照组相比均有所下降,其受抑制程度随着龙须菜起始密度的增大而增强,而两种赤潮藻对龙须菜生长的影响却不显著.此外,龙须菜和两种赤潮藻之间还存在着光竞争,弱光条件更适合龙须菜的生长,强光条件下龙须菜对两种赤潮藻的抑制作用减弱.此外,龙须菜水溶性抽提液也会对两种赤潮藻的生长产生抑制.     

碱性蛋白酶水解螺旋藻制备抗氧化活性肽的工艺优化

为了提高螺旋藻肽的抗氧化能力与收率,采用单因素实验和响应面法对碱性蛋白酶水解螺旋藻粉制备抗氧化活性肽的工艺条件进行优化。实验结果表明,与木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶相比,碱性蛋白酶对螺旋藻粉的水解能力最强,其最适水解条件为55.46℃、pH值为 6.71、固(g)液(mL)比为1∶10.83。在此条件下,酶解240min,螺旋藻肽的收率为58.50%,与优化前相比,提高了15.61%。所制备的螺旋藻肽具有较强的抗氧化能力,在质量浓度为0.86g/L时,其DPPH·清除能力为77.60%,与优化前相比,提高了7.62%。     

红景天多糖的提取及体外抗氧化活性研究

目的优化红景天多糖的制备工艺,并系统评价红景天多糖清除自由基的能力.方法采用正交设计方法优化红景天多糖提取工艺,以多糖提率为考察指标,比较不同固液比、提取温度、提取时间、提取次数对多糖提取效果的影响;通过反复冻融、透析及酶-sevag联合脱蛋白法,纯化制备红景天多糖(RSP);采用苯酚-硫酸法、红外色谱仪及紫外-可见分光光度计对红景天多糖的基本理化性质进行表征;利用体外抗氧化模型评价红景天多糖对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O_2~-·)自由基的清除能力.结果红景天多糖的最佳提取条件固液比为1∶20,提取温度为90℃,提取时间为3 h,提取次数3次.此外,红景天多糖对DPPH·和·OH具有较好的清除能力.结论成功确立红景天多糖的最佳提取工艺,红景天多糖具有一定的抗氧化作用.     

江蓠琼脂碱法提取工艺模型的建立及应用

为探究江蓠(Gracilaria japonica)琼脂生产过程中碱处理工艺对碱消耗量及琼脂质量的影响,采用模型拟合优化琼脂提取碱处理工艺参数,以降低碱消耗量;研究不同碱处理工艺条件下制备的江蓠琼脂性质,测定出胶率、碱消耗量和江蓠中吸收碱量,建立碱处理工艺对琼脂质量和碱消耗量影响的关系模型.运用模型优化得到3个最佳碱处...