用分光光度法研究牛血清白蛋白与曙红Y的结合反应

1　引　　言在酸性介质中 ,蛋白质与酸性染料发生结合反应 ,形成有色探针 ,用于蛋白质的定量测定已得到广泛应用。作者提出水溶性曙红Ｙ(ＥＹ)与牛血清白蛋白 (ＢＳＡ)在酸性溶液中结合 ,作为蛋白质的吸光探针 ,用于人血清中总蛋白质的测定 ,方法简便 ,灵敏度较高 ,干扰较少 ,结果与考马斯亮蓝方法一致。对结合反应的机理进行了研究 ,认为它们之间主要以静电引力而结合。疏水作用力对结合反应也有影响。拟定了最佳结合反应条件 ,对结合反应的参数进行了测定和计算 ,并讨论了染色反应的影响因素 ,对改进和发展蛋白质定量分析方法有重要意义。…     

曙红Y分光光度法测甲砜霉素的含量

甲砜霉素(TAP)与曙红Y(EOSY)在pH＝1.52的酸性介质中相互反应生成离子缔合物,可使体系吸光度增大.最大吸收波长位于482 nm,表观摩尔吸光系数(ε)为4.27×10 4 L·mol-1·cm-1,甲砜霉素浓度在0.18～5.3 mg·L-1范围内遵从比尔定律,据此建立了以曙红Y为探针测定甲砜霉素的分光光度法.该法简便快速,有较高灵敏度,可用于实际样品中甲砜霉素的测定.     

曙红Y探针褪色分光光度法测定长春瑞滨

在pH 2.2的Britton-Robinson缓冲体系中,长春瑞滨与曙红Y反应,形成离子缔合物能使染料发生明显的褪色反应。最大褪色波长位于520 nm,且在0.25~15μg/mL范围内,吸光度降低与长春瑞滨质量浓度成正比,表观摩尔吸光系数为7.7×104L·mol-1·cm-1。由此建立了测定长春瑞滨的吸收光谱新方法,可应用于注射液中长春瑞滨的测定。     

曙红Y分光光度法测定盐酸异丙嗪

在弱酸性NaAc HCl缓冲介质中 ,盐酸异丙嗪与曙红Y、赤藓红、乙基曙红等卤代荧光素类染料反应 ,形成离子缔合物。溶液颜色发生明显变化 ,其中曙红Y体系则发生显著的褪色作用 ,最大褪色波长为 5 16nm ,ε为 2 .73× 10 4 L·mol- 1 ·cm- 1 ,此外在 5 4 8nm处出现一个较低的吸收峰 (Δλ =32nm)。因此 ,本文采用曙红Y褪色光度法测定盐酸异丙嗪。其浓度在 0～ 1.5× 10 - 5mol/L范围内遵守比尔定律。方法灵敏度较高 ,选择性好 ,操作简便快速。用于片剂、针剂和伤风止咳糖浆中盐酸异丙嗪的测定 ,结果满意。     

曙红Y分光光度法测定盐酸吡格列酮含量

盐酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride)是由日本武田公司研制开发的新型胰岛素增敏剂,于1999年7月获美国FDA批准用于治疗Ⅱ型糖尿病[1],化学名称:(±)5-[4-[2-(5-乙基-2-吡啶)乙氧基]苯甲基]-2,4-噻唑烷二酮盐酸盐,分子式:C19H20N2O3S·HCl,化学结构如下: 盐酸吡格列酮为噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂,通过增强外周组织和肝脏对胰岛素的敏感性,改善胰岛素对葡萄糖和脂肪代谢的控制,减少肝糖的产生和输出,从而具有降低血糖和血脂的作用,有明确的改善胰岛素抵抗,降低空腹血糖和糖化血红蛋白的效果,同时还可调节脂质代谢,降低致动脉粥样硬化的危险因素,并减轻胰岛B细胞负担,对胰岛B细胞有良好的保护作用[2].是一种新型口服抗Ⅱ型糖尿病药.     

曙红Y褪色光度法测定微量铈

研究了在氨-氯化铵介质中Ce(Ⅳ)催化高碘酸钾氧化曙红Y的褪色反应及其动力学条件,测定了反应级数和表观活化能,建立了测定痕量铈的新方法.曙红Y的最大吸收波长为515 nm,该方法的检出极限为2.0×10-10 g·ml-1,线性范围为0～400 ng·ml-1,可用于发样中痕量铈的测定.     

曙红Y探针吸收光谱法测定氯霉素

在pH 1.0～3.0的条件下,曙红Y与氯霉素反应生成红色离子缔合物,其最大显色波长和褪色波长分别位于483 nm和560 nm,表观摩尔吸光系数分别为4.49×104和1.20×104L·mol-1.cm-1,当用双波长叠加法测定时,表观摩尔吸光系数可提高到5.70×104L·mol-1.cm-1,在0.15～6.5 mg.L-1范围内,显色反应或褪色反应的吸光度绝对值与溶液中氯霉素浓度成正比,由此建立了测定氯霉素的吸收光谱法。该法用于药物及尿样中氯霉素的测定,结果满意。     

新铜试剂—曙红Y萃取光度法测定微量铜

铜(I)-新铜试剂(NCP)-曙红Y(Eosin Y)能形成离子对三元络合物,其络合比为1:2:1。在氯仿中该络合物的λ_(max)=544nm,表观摩尔吸光系数ε=6.83×10~4 L mol~(-1)cm~(-1)。以柠檬酸盐作掩蔽剂,控制水相pH=4.5,相比(水相/氯仿)=2/1,可将络合物定量萃入氯仿中。一般常见的共存离子均不干扰测定,显色稳定性好,线性范围为0～5μg cu/5ml氯仿。方法灵救度高,选择性好。     

曙红Y探针共振瑞利散射法测定盐酸二甲双胍

在pH=3.0的B-R缓冲介质中,盐酸二甲双胍(MFH)与曙红Y(EY)形成离子缔合物,引起共振瑞利散射光谱显著增强,其最大特征散射波长位于292nm处。MFH的浓度在0.05~2.5μg/mL范围内与散射信号的增强(△I_(RRS))呈线性关系。MFH的检出限(3σ)为0.02μg/mL。讨论了适宜的反应条件和共存物质的影响。据此,提出了测定痕量MFH的光散射新方法,并应用于实际样品中MFH的测定,结果满意。     

曙红B与盐酸洛美沙星相互作用的分光光度法研究

在pH=1.2的Clark Lubs缓冲溶液条件下,曙红B与盐酸洛美沙星复合物的最大吸收峰位于535nm,比曙红B本身红移30nm,复合物的表观摩尔吸光系数为5.82×103L·mol-1·cm-1。方法的线性范围为10～40mg·L-1,检出限为2.2mg·L-1。实验考察了反应条件的影响,初步讨论了反应机理。     

曙红B-蛋白质-聚乙烯醇体系显色反应及其分析应用

用分光光度法研究了曙红B(EB)与牛血清白蛋白(BSA)在聚乙烯醇(PVA)存在时的结合反应 ;在最佳反应条件下 ,以试剂空白参比 ,EB -BSA复合物的最大吸收波长在538nm ,BSA的浓度在1.6×10-8～2.8×10-7 mol·L-1 范围符合比尔定律 ,表观摩尔吸光系数ε=1.41×106 L·mol-1·cm-1,Sandell灵敏度s=0.048μg·cm -2 ,对BSA的检出限为4.9×10 -9mol·L -1 ,方法用于人血清中蛋白质总量的测定 ,与经典的考马斯亮蓝G_250方法结果一致     

曙红Y与牛血清蛋白作用的荧光光谱研究及分析应用

在pH 2.53的介质中,曙红Y与牛血清蛋白（BSA）作用形成复合物,最大吸收峰从513nm红移到529nm,曙红Y荧光光谱发生显著变化,最大发射光波长540nm（最大激发光波长308nm）荧光猝灭,其猝灭程度与BSA含量成正比,线性范围0－2.5mg/L ,相关系数0.999,检出限2.8μg/L(3σ）。作者研究了反应条件、干扰物质及进行了样品测试,结果令人满意。     

曙红Y共振光散射法测定双嘧达莫

在pH=1.98缓冲溶液中,双嘧达莫可与染料探针曙红Y通过相互结合,产生以315nm为特征峰的共振光散射(RLS)增强信号.在该特征波长下测定的增强共振光散射强度(△IRLS)与双嘧达莫浓度在一定范围内呈线性关系,据此建立了测定痕量双嘧达莫的共振光散射法.当曙红Y的浓度为3.0×10-5mol/L时,双嘧达莫的检出限可达16.1nmol/L.同时进行了实际样品的测定,相对标准偏差在1.3%～2.5%之间,回收率为(99.2±3.3)%～(102.0±1.7)%.     

曙红Y分光光度法测定阳离子表面活性剂及其机理研究

在弱酸性的HCl-NaAc缓冲介质中,阳离子表面活性剂(CS)与曙红Y(EY)染料反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变,最大褪色波长分别在514 nm(EY-CPB体系)、516 nm(EY-CTAB体系),同时在548 nm(CPB体系)、544 nm(CTAB体系)处有吸收峰,在褪色波长处阳离子表面活性剂的浓度与褪色程度呈良好线性关系,从而建立测定阳离子表面活性剂的光度法。在最大褪色波长处,CPB体系、CTAB体系中CS的浓度在0~4.79×10-5mol/L、0~2.90×10-5mol/L范围内遵守比尔定律,表观摩尔吸光系数为2.94×104、2.86×104L.mol-1.cm-1,检出限为8.97×10-7mol/L、7.87×10-7mol/L。若用双波长叠加,表观摩尔吸光系数达5.58×104、5.20×104L.mol-1.cm-1,检出限为5.87×10-7、6.25×10-7mol/L。方法适用于水样中CS的测定。本文还用密度泛函理论对反应机理进行了探讨。     

曙红Y与消旋山莨菪碱的相互作用及其分析应用

在弱酸性介质中,消旋山莨菪碱与曙红Y依靠静电引力和疏水作用力形成离子缔合物,使曙红Y的共振光散射(RLS)强度明显增强。体系的最大散射峰位于364 nm处。研究了离子缔合物的光谱特征、反应的最佳条件和共存物质的影响。消旋山莨菪碱的浓度在1.0~140 mg/L的范围内与RLS强度呈线性关系;方法的检出限为0.88 mg/L。将方法用于市售消旋山莨菪碱片含量的快速测定,并与药典分析法进行了对照,结果表明两种方法之间无显著性差异。     

曙红Y褪色光度法测定尼莫地平

1引言尼莫地平(n imod ip ine)又名硝苯甲氧乙基异丙啶,主要用于防止5-羟色胺和前列腺素血管性物质引起的血管收缩。故临床上主要用于脑血管疾病的治疗。近年来的研究表明,它还有保护式促进记忆的作用。研究发现,在pH 4.90的HOAC-NaOAC缓冲介质中,通过静电作用、疏水作用和荷电     

CdS量子点与曙红Y间的荧光共振能量转移研究

在水溶液中,量子点与有机荧光染料之间可能发生荧光共振能量转移(FRET)。本文以发射波长470nm的Cd S量子点为供体,曙红Y为受体,建立了Cd S量子点-曙红Y的FRET体系,研究了该体系的FRET参数。该体系受体供体数目比为8,猝灭效率为45.6%,增强效率为20.1%;供体-受体间的距离为4.4nm;临界能量转移距离为2.4nm。     

普罗帕酮与曙红Y的双荧光猝灭反应及其分析应用研究

曙红Y(EY)是一种荧光染料, 它具有强的荧光, 而普罗帕酮(PPF)也是一种荧光物质. 在pH 2.5～3.8的酸性溶液中, EY的最大发射波长(λ_em)位于549 nm, PPF的λ_em则在419 nm处, 两者的荧光光谱相距较远而能很好地分开. 当PPF与EY反应形成复合物时, 观察到两者的荧光均发生猝灭, 因此这是一种双荧光猝灭的反应体系. 当用EY作探针测定PPF时, 检出限(3σ)为9.4 ng/mL|反之当用PPF作探针测定EY时, 检出限为259.7 ng/mL, 前者具有很高的灵敏度, 后者灵敏度较低, 因此方法更适合于对痕量PPF的定量测定. 研究了荧光猝灭反应的适宜条件、影响因素和分析化学特性, 并探讨了反应机理和复合物的组成和结构, 结果表明两者通过静电引力、疏水作用、芳基堆积作用和氢键作用而形成1∶1的复合物. 荧光猝灭是一种静态猝灭过程. 因此以EY作探针荧光猝灭法测定PPF为例, 考察了方法的分析应用.