有机介质中固定化酶催化萘普森与硅醇的酯化反应

柱状假丝酵母脂肪酶,在异辛烷体系中可选择性地催化Ｓ－２－（６－甲氧基－２萘基）丙酸（萘普森）与三甲基硅甲醇发生酯化反应。利用硅藻土吸附固定化酶有效地改善了酶在有机介质中的分散状态,提高了催化效率。选择和确定了四氯化碳作为辅溶剂——底物酸的增溶剂,并对辅溶剂与异辛烷的比例、醇浓度及温度对酯化反应过程的影响进行了研究。结果表明：在酯化反应中,高浓度的醇具有抑制作用;较高反应温度也导致酶的失活;去除水有利于酯化反应的进行。     

纳米TiO_2固载脂肪酶及其固载界面表征

以3种不同形貌的纳米TiO2为载体固定化脂肪酶,研究载体形貌、酶添加量、pH值、温度和时间对固载酶活性的影响.研究结果表明,纳米线形貌TiO2固定化效果最好,最优固定化条件为加酶量0.25g/25mL溶液、pH 7.0、固载温度40℃、固载时间6.3h.利用SEM、XRD、FT-IR等对固载酶及其界面进行表征,SEM和XRD结果表明,脂肪酶吸附于纳米线TiO2载体表面,且未改变纳米线TiO2的晶型结构;FT-IR表征表明固载酶含有脂肪酶的特征吸收峰;比表面积分析显示固定化后样品的BET明显减小,表明脂肪酶在纳米线TiO2表面进行物理型吸附.     

微乳凝胶固定化酶催化油酸丁酯的合成

研究了以AOT(二(2—乙基已基)琥珀酸酯磺酸钠)／正庚烷／水／明胶组成的反向微乳凝胶固定化脂肪酶催化油酸和丁醇的酯化反应，分析了凝胶组成、反应温度、溶剂等因素对酯化反应的影响，得到了一种合适的体系，使油酸丁酯酯化率达90％以上。     

硅藻土强化吸附壳聚糖固定化青霉素酰化酶

文中针对壳聚糖颗粒机械强度不够和比表面积不大的缺点,用无机多孔材料硅藻土(celite)在低压下强化吸附壳聚糖,再用戊二醛使其活化,以此为载体通过共价结合固定化青霉素酰化酶。以酶活和回收率为指标,讨论了活化、固定化及酶反应的不同条件对固定化青霉素酰化酶的酶活和回收率的影响。当戊二醛溶液质量分数为5%、pH值为8.5;酶固定化温度为27℃,固定化pH值为7.6,固定化时间为12～18h时,为最佳固定化条件。固定化酶的酶活可达10000mol/s左右,回收率约为40%。固定化酶的储存稳定性和热稳定性好,载体有良好的强度。     

固定化乙酰胆碱脂酶的研究

以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱脂酶交联固定到硅胶载体上,研究了影响固定化酶的主要因素．通过酶活力的测定,确定了最佳戊二醛浓度、pH值、固定化时间、酶用量、固定化酶的最适作用温度、pH值、酶的稳定性及其回收率．结果表明：戊二醛浓度为0．5％,pH值为8．0,固定3．0h,酶与载体比例为30mg／g可制备良好的功能化载体．固定化乙酰胆碱脂酶最适作用温度和pH范围分别为40℃和6．0～9．0．重复使用10次固定化酶,回收率约为70％．     

酶促萘普生酯的选择性水解拆分

柱状假丝酵母脂肪酶可以选择性催化S－萘普生甲酯、乙酯和乙氧基乙基酯发生水解,从而对化学合成的混旋萘普生进行拆分,制备具有高光学纯度的S－对映体。利用中等极性大孔吸附树脂HZ－806作为固定化载体,可在酶分子周围营造一个有利于反应的微环境,有效地提高酶的催化活力及解决酶的回收。在中等极性大孔吸附树脂固定化酶填充床反应器中,混旋乙氧基乙基萘普生酯可被连续水解拆分,当流量为72mL/h时,酯的水解率为17％,光学纯度为89．1％。     

非水介质中酶促酯化反应机制及醇抑制动力学

以非极性大孔吸附树脂吸附固定化脂肪酶在异辛烷／四氯化碳混合溶剂中选择性催化Ｓ－２（６－甲氧基－２－萘基）丙酸与正辛酯化为反应模型,对非常规溶剂中酶催化反应机制及动力学进行了初步研究。结果表明：在有机溶剂中该脂肪酶催化萘普森与正辛醇的酯化反应同样符合米氏方程,此酯化反应符合双底物乒乓反应机制,但值得提出的是酰基受体的过量存在会对酯化产生竞争性抑制作用。     

醛基化大分子强化介孔泡沫硅中青霉素酰化酶和胰蛋白酶的固定化

为了提高酶的亚基增强固定化酶的稳定性,在介孔泡沫硅中对固定化酶进行共价修饰.以青霉素酰化酶和胰蛋白酶为目标酶,考察醛基化修饰对固定化酶活力、负载率的影响以及在酸性缓冲溶液、亲水有机体系和离子液体中的催化稳定性,并对固定化酶进行电泳分析.结果表明:醛基化修饰的青霉素酰化酶在酸性缓冲液中6h保留95%的残余活力,在疏水离子液体中50℃处理10h保留近80%的残余活力;醛基化胰蛋白酶在20%乙醇中50℃保持活力不变.因此,醛基化修饰能稳定酶的亚基,在创建酶催化的微环境的同时,又能提高酶在极端环境下的稳定性.     

响应面法优化鸡脂酶解工艺

通过单因素实验考察了脂肪酶、乳化剂、反应温度、pH值、反应时间、酶添加量及摇床转速等影响鸡脂脂肪酶水解的因素.采用响应面分析法对反应温度、酶添加量、pH值和反应时间等工艺参数进行了优化研究.结果表明,二次多项式模型符合实验数据.反应获得较优酸值时反应参数条件为:温度46.6℃,加酶量0.5%,pH值6.4,反应时间4.33 h.     

酶促制备丝裂霉素类似物反应动力学模型研究

基于固定化T. laibacchii脂肪酶催化2-甲基-1,4-苯醌与正丁胺的Michael加成反应建立了酶促制备丝裂霉素类似物2-甲基-3-正丁胺酰-1-氢-4-醌的反应动力学模型.该反应在柠檬酸缓冲溶液(pH值为7.0)中进行,最终产率可达98%.该文提出了修正的有序双双和随机双双机理,采用King-Altman方法得到相关微分方程组以表示即时反应速率.通过联合解微分方程和最优化方法确定动力学模型参数,使用ode45程序解微分方程组,并运用Fmincon软件计算动力学常数.研究结果表明:模型拟合值与实验值的平均相对偏差为11.25%,且偏差服从关于y=0的轴对称分布.当固定化酶粒径为0.5 mm、搅拌转速为200 rpm时可以忽略内外扩散限制.该文建立的动力学模型为固定化酶固有动力学模型.     

固定化脂肪酶的动力学研究

以壳聚糖为载体,用物理吸附固定化脂肪酶,对影响固定化过程的各种因素进行了考察,确定了最优条件,并比较了游离酶和固定化酶的最适温度、pH、酶的热稳定性以及表观Km。固定化酶水解的最适pH(pH7．0)稍低于游离酶(pH8．0),最适温度为50℃(游离酶为40℃)。固定化酶在50℃的半衰期(0．96h)是游离酶(0．32h)的3倍,在4℃的冰箱中贮存3个月活力变化很小。     

活性炭吸附法固定猪胰脂酶的初步研究

初步研究了以活性炭为载体的猪胰脂酶吸附固定，吸附pH和吸附量对吸附固定有重要影响，吸附的最适pH在8左右，酶的比活随吸附量的增加而减小，同时固定化酶有比自由酶更好的热稳定性。     

固定化脂肪酶催化棉籽油合成生物柴油

对比多种载体固定化脂肪酶的吸附效果,确定了以大孔吸附树脂D101为载体,采用先吸附后交联的方法固定脂肪酶。固定化后脂肪酶的稳定性得到较明显改善,最适反应温度50℃,最适反应pH值为8。确定了固定化脂肪酶催化棉籽油与甲醇转酯化反应合成生物柴油工艺条件,醇油比3∶1,含水量1.25%(V/V),加入质量比(酶量与固定化载体)0.48的固定化酶,反应介质辛烷,在40℃反应24h催化生物柴油的合成,最高转化率可达到65%。     

固定化柱状假丝酵母脂肪酶的制备与催化性能的研究

通过反相悬浮技术制备了含磁性Fe3O4微粒的聚合物微球,利用扫描电子显微镜（SEM）、X射线粉末衍射仪（XRD）、红外光谱（FT-IR）、振动样品磁强计（VSM）和低温N2吸脱附等方法对微球进行了结构性质表征.结果表明,微球中Fe3O4质量分数为5.82%,比饱和磁化强度σs为3.85 emu/g,且具有超顺磁性;其比表面积、平均孔径和孔容分别为123.6 m2/g,13.01 nm和0.50 cm3/g,表面环氧基团含量为0.74 mmol/g.将磁性聚合物微球用于固定柱状假丝酵母脂肪酶,在30℃下用其催化（R,S）-2-溴丙酸甲酯不对称水解反应,产物（R）-2-溴丙酸的对映体过量值eep为17.7%,（S）-2-溴丙酸甲酯的对映体过量值ees为97.0%.固定化酶经5次重复使用,产物（S）-2-溴丙酸甲酯的对映体过量值ees值仍为75.7%,并且固定化酶在磁场的作用下能够快速沉降,与产物分离.     

无溶剂体系中固定化脂肪酶催化的酯交换反应研究

采用癸酸乙酯与己醇的酯交换作为模型反应，研究了两种固定化脂肪酶在异丙醚溶液和无溶剂体系中的催化行为。考察了水活度(水含量)、反应时间、搅拌以及底物摩尔比等因素对酯交换反应的影响，并对无溶剂体系固定化脂肪酶催化反应的机制进行了初步探讨。结果表明，在无溶剂体系中，固定化脂肪酶的活力显提高，反应转化率达到90％以上。     

Study on the Characterization and Kinetics of Immobilized Lipase

1 Rusults Most enzymes, including lipase, play a key role in biotechnology, but their usage is quite limited because of poor recovery, yield, limited re-usability and rapid inactivation in the soluble state. Immobilization enzymes offer advantages over free enzymes because of the availability of a choice of batch or continuous processes, rapid termination of reactions, controlled product formation, ease of enzyme removal from the reaction mixture, and adaptability to various engineering designs.In this ...     

生物柴油生产用固定化脂肪酶研究进展

生物柴油是新型的绿色能源,是石油燃料的理想替代物之一．目前生产生物柴油的方法主要是化学法、酶法和超临界法,而其中又以生物酶法最为环保,具备良好的发展前景．通过阐述固定化酶法制备生物柴油的国内外研究和生产现状,从而对固定化酶法制备生物柴油技术的发展给出了建议．     

棉纤维膜上高碘酸钠法固定化脂肪酶

研究了棉纤维膜上高碘酸钠法固定化脂肪酶的工艺条件,并考察了固定化脂肪酶的温度、酸度以及间歇操作稳定性。通过实验给出了固定化酶的最佳条件：NaIO4浓度为0．2mol/L,交联时间24h,pH值为9左右,酶的质量浓度6．0g/L,固定化酶最在活力7．38U/cm^2。该固定化酶最适应的温度为35℃,pH＝8．0,t1/2=168h。     

固载脂肪酶催化制备生物柴油

本实验探讨了固载脂肪酶催化蓖麻油和甲醇酯交换反应制备生物柴油，研究了醇油摩尔比、反应时间与温度等因素对酯化反应的影响.通过固载脂肪酶，很大程度上增强了其稳定性和抗酸碱性，提高了酶的重复使用率，节约成本.结果表明：固载脂肪酶催化酯交换反应最佳反应条件为醇油物质的量比为6∶1，固载酶2%（油重），反应时间为2 h，反应温度为50℃，蓖麻油的转化率最高为92.44%.     

Green Synthesis of Wax Ester by Immobilized Lipase

1 Results Enzyme catalysis is most attractive for the synthesis and modification of biologically relevant classes of fine organic compounds, which are difficult to prepare and to handle by conventional means[1]. In this study, commercial immobilized lipase from Candida antarctica (Novozym 435) was used in the preparation of fine organic compound with excellent properties and application as raw material for cosmetic formulation - oleyl palmitate. The effect of various reaction parameters were optimized c...