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用于变性蛋白质复性及同时纯化的简易型色谱柱的研制及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
研制出一种简易型色谱柱并通过装填大颗粒的疏水色谱填料对色谱柱的性能进行了考察,该柱的外形和操作如同传统的液相色谱柱,但它却在生物大分子分离方面有着和高效液相色谱相似的分辨率。另外,只要给该柱装填合适的固定相,比如疏水相互作用色谱固定相,便可用于蛋白质的复性及同时纯化。实验考察了该色谱柱的结构、操作和性能,包括柱压、柱寿命及对蛋白质的分辨率等。以溶菌酶为模型蛋白质,实验测得其在初始浓度为50.0 g/L时的质量回收率和活性回收率分别为(96.6±1.3)%和(101.1±6.0)%。这种简易型色谱柱价格低廉 相似文献
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在高效液相色谱(HPLC)中,使用多柱串联能够极大地增加柱效和改善分离效果,提高温度能够明显降低色谱柱反压、加快分析速度.将色谱柱串联与提高柱温相结合构建了多柱串联高温HPLC系统,该系统常温下分析标准样品时(以芴计),绝对柱效达7.6×104塔板数;柱温升高到120℃,色谱柱反压从35.3MPa降低到15.4MPa,分析时间从78.39min缩短为19.26min.采用构建的系统分析中药六味地黄丸,常温下出峰94个,升高温度至100℃出峰80个,分离效果较常规的单柱系统有明显提高;升高温度,使主要组分的出峰时间缩短,可获得更为详尽的组成信息. 相似文献
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全二维液相色谱的初步构建及其在山羊血清分离中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
以GFC/RP模式构建全二维液相色谱系统,第一维凝胶过滤色谱柱使用ShodexProteinKW 802. 5(300mm×8mmi.d. ),以0. 2mol/LNaH2PO4 (pH7. 0)的流动相在0. 15mL/min的流速下等度洗脱,第二维反相色谱柱使用HypersilBDSC18 (35mm×4. 6mmi.d. ),在3mL/min的流速下梯度洗脱。采用平行柱交替分析的形式作切换接口, 2. 5min切换一次,两个反相柱交替富集、分析第一维洗脱产物。以5个标准蛋白混合物的分离评价该系统,在单独一维模式中不能分离的样品在全二维液相色谱中得到了较好的分离,二维系统的总峰容量为225。与一维色谱相比,系统的总峰容量、分辨率得到较大提高。并用于山羊血清的纯化分析,对一维分离中的重合谱峰进行验证,对制备纯化有一定的实际意义。 相似文献
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高温正相色谱/反相色谱(HTNPLC/RPLC)二维联用系统的构建与应用 总被引:1,自引:1,他引:0
为解决含水正相色谱与反相色谱联用过程中的谱带展宽问题,以高温正相色谱(HTNPLC)为第一维,室温反相色谱(RPLC)为第二维,分别建立了切割模式的二维液相色谱(HTNPLC-μRPLC)和全二维液相色谱(HTNPLC×RPLC)系统.样品首先在第一维(CN色谱柱)进行正相分离,第一维洗脱产物选择性地或者交替存储在十通阀上的定量环中,然后切换十通阀将定量环内存储的样品组分转移到第二维(C18色谱柱)进行反相分离.该系统降低了第一维切割组分在第二维柱头的扩散,提高了分离度以及分离效率.采用多环芳烃混合物和天然植物甘草提取液对该二维液相色谱系统进行了评价. 相似文献
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硅胶整体柱的研究进展 总被引:9,自引:0,他引:9
自液相色谱技术创立以来,色谱填充材料经历了4个发展阶段[1],包括从形状不规则的填充颗粒到球形颗粒填料、从大的颗粒到小的填充颗粒、从不纯的填充材料到高纯的球形硅胶颗粒以及目前整体柱的产生,一直在向着提高柱效和实现快速分离的方向发展。与整体柱相比,传统的液相色谱柱存在种种弊端和限制[2,3],人们为了提高颗粒型填充柱的柱效而使用越来越小的填料,但柱压降随填料粒度的减小却急剧上升。因此,综合柱效和分离速度两方面因素,较为折中的5μm填料被广泛使用。换句话讲,传统的高效液相色谱(HPLC)填充柱对分离对象很难同时实现既高… 相似文献
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《分析测试学报》2014,(3):367
<正>中国科学院兰州化物所色谱技术研究开发中心是我国唯一从事研制、生产高效气相色谱柱、高效液相色谱柱、液相色谱填料以及相关产品的高科技企业,中心致力于我国色谱柱产业核心技术体系的发展,独创出国际领先的液相沉渍、原位一体化合成制备高效PLOT色谱柱技术;拥有先进的超净-静态制备高效WCOT色谱柱技术。在国内率先完成了球形硅胶色谱填料制备研究开发工作;研制开发出多种液相手性分析填料以及国内急需的专用色谱柱;创造出多项"中国第一"。早在1988年,由中国科学院推荐,国家机械工业委员会将我中心生产的系列色谱柱列为"推荐替代进口产品"。中心年产各类色谱柱数万根,已在石油化工、生命科学、药物研究、环境监测及食品卫生等行业得到广泛应用。是目前国内最大的色谱柱及其零配件生产基地。 相似文献
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二维液相色谱接口的改进及其在蛋白质组学研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
随着蛋白质组学、本草物质组学等组学概念的提出,所需分析的样品的成分越来越复杂,因此具有强大分离能力的多维液相色谱技术受到人们越来越多的关注。二维液相色谱中第二维的分离性能和速度是整个分离系统性能的关键。基于捕集柱模式,我们采用经特殊设计的流路系统,使得双捕集柱型接口具有预分离的功能。样品从第一维流出以后被富集在捕集柱1的柱头,经过脱盐后,正冲捕集柱,捕集柱1与第二维色谱柱联用对富集的样品进行分离,增加了第二维分离效率。当捕集柱上的样品全部被洗脱到第二维色谱柱上时,捕集柱2已经完成对第一维洗脱液中样品的捕集和脱盐,此时将阀进行切换,捕集柱2与第二维色谱柱直接相连进行洗脱。循环切换捕集柱1和捕集柱2,维持较高的阀切换频率,实现了第二维色谱柱的连续洗脱。因此保证了第二维分离具有较快速度,同时具有较高的分离效率。使用35 mm长捕集柱和十通阀为接口,以弱阴离子交换(WAX)色谱为第一维分离模式,以反相(RP)色谱为第二维分离模式,构建了WAX-RP二维液相色谱系统(2D-LC system)。以小鼠血清为样品对系统进行了初步评价。色谱流出曲线出现了明显的界面现象,这是由于捕集柱流动相中含有的较多盐分流出时的背景吸收造成的。同时,由于界面两侧的流动相黏度不同产生了黏性指进(VF)现象。当第二维色谱柱长度为50 mm时,理论上可将第二维分离效能提高70%。该接口可以应用于多种二维液相色谱模式,适用于蛋白质组学和本草物质组学研究中对于复杂样品的分离分析。 相似文献
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(ISBN 978-7-122-11958-2)该书从色谱科学的角度详细地阐述了制备色谱的原理、重要的实验技术、关键性色谱分离技巧及其应用。内容包括制备色谱的基础知识、制备薄层色谱、常压柱色谱、低压及中压柱色谱、高压制备液相色谱、高速逆流色谱、模拟移动床色谱、顶替色谱、制备气相色谱、电泳以及与制备色谱技术紧密相关的生物代谢产物的提取分离技术等。本书对制备色谱技术的系统介绍具有简明、系统、全面的特点。 相似文献
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目前,新型色谱填充材料发展很快,但传统的高效液相色谱(HPLC)颗粒型填充柱存在缺陷,难以实现既高效又快速的分离,Minakuchi等制备了连续的硅胶整体柱,该柱同时具有通孔和中孔双孔结构,孔容量大大高于填充柱,因此,该柱具有高速、低压、高效、适于溶剂及流速梯度洗脱等优点,适合高通量分析和快速分离, 相似文献
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