骨骼肌肌纤维中的Ca^2＋ sparks现象研究

钙火花（即Ca^2＋ sparks）是肌兴奋-收缩偶联关键性假说-Ca^2＋诱导Ca^2＋释放（CICR）局部控制理论的基础，是肌兴奋-收缩偶联的基本单位。钙火花是肌浆网（sarcoplasmic reticulum，SR）膜上钙释放通道（RyRs）自发开放或由T管膜上单个L-型钙通道（DHPr）开放触发引起的局部钙释放现象。虽然对“钙火花”的研究已有近10年，但目前确切的发生机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou-3 AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析，在骨骼肌肌纤维中捕获钙火花现象。     

激光扫描共聚焦显微镜和Fluo—3／AM检测细胞内游离钙

利用细胞培养技术，Ｃａ２＋敏感荧光探针Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ标记细胞，激光扫描共聚焦显微镜检测鸡胚胎巨噬细胞内游离钙浓度（〔Ｃａ２＋〕ｉ）的变化。结果显示细菌脂多糖（ＬＰＳ）可引起培养的鸡胚胎巨噬细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ升高，ＬＰＳ的作用可被维拉帕米部分抑制。本实验表明激光扫描共聚焦显微镜结合Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ能准确迅速地检测单个或多个贴壁粘附细胞胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ的动态变化，并同步观察细胞的形态及其荧光分布情况。     

激光扫描共聚焦显微镜的技术培训探索

仪器共享平台可为用户提供多种实验技术服务,是高校和科研院所必不可少的教学科研支撑部门。激光扫描共聚焦显微镜是生命科学研究中常用的大型精密光学仪器,具有使用频率高、功能多、操作复杂等特点。仪器共享平台结合激光扫描共聚焦显微镜的共享使用情况尝试多种相关人员培训方式,探索出一套适用于多用户的培训模式以供仪器共享平台工作人员参考。     

激光扫描共聚焦显微镜在骨髓基质细胞移植中的应用

目的：探讨激光扫描共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）技术在骨髓基质细胞（Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs）移植中的应用。方法：使用活细胞示踪剂CM-DiI、细胞核探针DAPI和DNA合成前体物BrdU体外标记BMSCs,移植到动物模型体内,利用LSCM技术,观察BMSCs在受体组织内的分布和分化。结果：体外标记BMSCs后再移植到受体,使用LSCM技术可以观察到BMSCs定位于受体心肌组织和脑组织,并有部分BMSCs表达相应的组织特异性蛋白Cx43和GFAP。结论：利用LSCM技术观察BMSCs在受体组织内分布和分化是一种简单可行的方法。     

激光扫描共聚焦显微镜在微孔隙研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)具有分辨率高、制样简单、具有一定穿透能力、集激光扫描和数字图像处理为一体等优点。用于研究储层中的微孔隙,其能够快速、准确、直观地提供微孔隙的孔隙结构与面孔率等信息,本文通过对致密砂岩粒缘微缝、砂岩长石粒内溶蚀孔、云母内微孔、火山凝灰岩脱玻化气孔和英安岩溶蚀微孔进行激光共聚焦三维扫描,可以检测出孔径在0.1μm以上的微孔隙,有助于分析微孔隙特征与油气集输之间的关系,对天然气储层和致密砂岩储层的勘探和开发具有重要意义。     

激光扫描共聚焦显微镜在人胆管癌组织免疫荧光染色切片观察中的应用

目的：探讨利用激光扫描共聚焦显微镜鉴定单克隆抗体特异性。方法：正常人胆管组织、正常人肝组织及人胆管癌组织切片经免疫荧光染色后置于普通荧光显微镜及激光扫描共聚焦显微镜进行观察,比较二者效果。结果：与普通荧光显微镜相比,激光 聚焦显微镜能清晰地显示染色组织的荧光染色部位及强弱,能较好地显示染色组织的形态,显示出良好的准确性及精确性。结论：激光扫描共聚焦显微镜在免疫荧光染色切片的检测中具有准确、特异、清晰的特点,在单克隆抗体的鉴定中具有良好的应用前景。     

激光扫描共聚焦显微镜图像的计算机处理

为了研究激光扫描共聚焦显微镜图像的计算机处理,首先对图像进行预处理,包括光线吸收和散射的补偿以及基于最大后验盲解卷积,以提高图像质量。然后采用光线投射算法重建三维结构,实现三维图像平移、旋转、缩放、光线设置等操作。实验结果表明,该方法能够应用于普通配置计算机,可以处理各大品牌激光扫描共聚焦显微镜拍摄的图像序列,具有较快的处理速度和良好的人机交互等优点。     

激光扫描共聚焦显微镜在纳米毒理学研究中的应用

随着激光扫描共聚焦显微镜技术的不断更新,功能不断拓展,已成为新兴学科纳米毒理学及其交叉学科科学研究的重要工具.激光扫描共聚焦显微镜能够动态检测纳米颗粒在活细胞内的定位及其与细胞骨架、细胞内离子、生物大分子的相互作用,有助于深入研究纳米颗粒对机体的毒理学效应及其机制.     

激光扫描共聚焦显微镜样品制备的改进方法用于8种纤毛虫表膜的观察

采用KMnO4作为固定剂,对传统的免疫荧光细胞化学技术进行改进,将制备好的样品用激光扫描共聚焦显微镜进行连续断层扫描和三维重建,清晰地呈现了8种纤毛虫的表膜以及纤毛模式,为原生动物纤毛虫表膜研究提供了一种可供借鉴的样品制备方法。     

激光扫描共聚焦显微镜在石油地质上的应用

判断油层水淹状况在油田勘探开发中是非常重要的，过去采用普通荧光显微镜通过荧光颜色来区分油和水，但不能做到量化，且由于普通荧光显微镜采用的是场光源，来自样品内不同部位的荧光信号相互干扰难以区分，无法获得准确的定位和定量信息。现在我们利用激光共聚焦的多通道技术(用     

利用膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞浆内钙离子的释放

目的:采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放.方法:在体外培养的单个心室肌细胞上进行全细胞模式膜片钳技术和共聚焦显微镜钙成像技术相结合,同步实时记录钙火花和钙离子浓度变化.结果:在全细胞模式膜片钳记录心肌细胞膜钙电流的同时,激光扫描共聚焦显微镜可准确记录到胞浆内出现的钙火花.此技术有可能对于明确钙火花的特征.准确理解兴奋一收缩偶联的微观机制有重要意义.     

共焦激光扫描显微镜的研制

利用共焦和扫描原理,研制出共焦激光扫描显微镜样机。     

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网膜Ca2+通道的研究

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌肌浆网、T-管在收缩潜伏期内超微结构的时相—形态变化。方法：采用双红外线探测器—计算机控制的电刺激—超低温快速冷冻固定同步技术,对电刺激后的蟾蜍骨骼肌组织作快速冷冻固定,采用透射电镜对骨骼肌在电刺激后0．8ms,2ms,4．6ms,10．8ms和18．4ms的超微结构变化进行观察。结果：刺激0．8ms后,肌浆网和T-管未见明显改变。刺激2ms后,SR内出现电子密度较大的物质。刺激4．6ms后,肌浆网膜内外侧可见一一对应的电子密度大的物质。刺激10．8ms后,SR与T-管形态又恢复原状,SR内电子密度大的物质消失。结论：骨骼肌兴奋-收缩偶联发生时,肌浆网的形态发生改变,肌浆网内出现电子密度较大的物质且逐渐向靠近T-管的方向移动。     

激光共焦扫描显微镜及其在生物医学中的应用

本文介绍了激光共焦扫描显微镜的结构,分析了它的原理,研究了它的光学特性,并阐述了它在生物、医学上的应用,并给出了此系统的基本光学系统及其光路设计。     

一种适用于激光共焦扫描显微镜的体绘制

激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)主要运用于生物医学研究,利用其采集的序列二维断层图像重构三维图形是LCSM系统的重要组成部分。主要研究了LCSM系统数据场的体绘制方法,根据其数据场特点,提出了最大值绘制算法。实验结果表明,此方法适用于LCSM系统,能够生成逼真的三维图形。     

牙体玻璃离子充填材料边缘微渗漏的激光扫描共聚焦显微镜与金相显微镜比较研究

目的:在两种不同显微镜下定量观测人离体牙充填玻璃离子水门汀后边缘微渗漏的情况,并对两种方法进行比较.方法:选取新鲜无龋前磨牙,备洞,充填玻璃离子水门汀,37℃水浴条件下分别置于0.1%罗丹明B荧光染料或1%甲基蓝溶液浸染,激光扫描共聚焦显微镜和金相显微镜下分别测量染液渗入深度,定量评价微渗漏程度,对两种方法的检测结果进...