大豆(Glycine max(L.)Merr.)未成熟子叶组织的体细胞胚胎诱导和植株再生的研究

本文利用大豆未成熟子叶作外植体,进行大豆体外培养并诱导体细胞胚胎形成和植株再生的研究。结果表明,高浓度生长素10mg/l NAA或5mg/l 2,4-D是大豆体细胞胚胎形成的先决条件。附加10mg/1 NAA的Murashige和Skoog培养基(简称MS培养基)能够直接在子叶表面诱导体细胞胚的形成,其频率可达85％;附加5mg/l 2,4-D的MS培养基首先诱导未成熟子叶产生胚性愈伤组织,然后产生大量体细胞胚,频率高达94％。我们成功地获得再生的大豆完整小植株15株,消除了大豆基因工程的障碍之一。     

风信子外植体直接再分化花芽的研究——Ⅰ.花芽和营养芽形态发生的控制

本文研究外源激素和外植体对风信子花芽和营养芽再分化的控制。其结果为:(1)对花瓣外植体来说,培养基中附加2,4-D只能诱导形成愈伤组织;附加6-BA能诱导营养芽;附加玉米素能诱导直接再分化花芽。(2)在附加玉米素的培养基上,花瓣和花茎外植体能直接再分化花芽;幼叶和鳞片只能诱导再分化营养芽。(3)在附加玉米素的培养基上,从花瓣外植体再分化的花芽上分离的花瓣可以继续再分化花芽;从花瓣外植体再分化的营养芽上分离的叶切段只能诱导再分化营养芽。结果表明,对于诱导风信子外植体直接再分化花芽来说,培养基中附加玉米素和外植体必须取自花器官是两个关键因素。     

黄花烟草(Nicotiana rustica. L)叶肉原生质体花芽的发育

黄花烟草(Nicotiana rustica.L)两个栽培种的叶肉原生质体培养于Nagata-takebe(NT)培养基上形成愈伤组织。将已形成的愈伤组织移入修改的MS分化培养基(MSBI,MSBN)上诱导器官发生。仅有一个品种的愈伤组织形成了绿色突起,将它移植到不加任何生长素的基本培养基上,这些绿色的小突起在不同的光照条件下,均进一步发育成花芽,特别是其中一部分绿色小突起在试管内从愈伤组织直接形成不具叶片的花蕾,并开花结籽。     

高等植物根原生质体的分离和培养

本文由12种植物,其中包括8种豆科植物(绿豆、黑绿豆、大豆、豌豆、木豆、蚕豆、苜蓿和胡卢巴)和4种十字花科植物(油菜、本油菜、甘兰和白芥)的萌发种子的幼根分离得到了根原生质体.根原生质体在培养中表现出活跃的分裂能力.除了在木豆和蚕豆中仅观察到细胞分裂外,其余10种植物的根原生质体均形成了愈伤组织。其中苜蓿根原生质体通过形成胚状体再生了植株,而油菜和甘兰的根原生质体通过愈伤组织诱导成芽也再生了植株,由此证明了根原生质体的全能性.这为那些在分离或培养原生质体方面仍存在困难的植物种提供了另一可供选择的系统.本文还讨论了这一系统的优点以及存在的问题。     

毛白杨的叶肉原生质体培养再生植株

毛白杨(Populus tomentosa)是我国华北地区特有的一种林木,从毛白杨无菌苗分离得到的叶肉原生质体在改良的KM8p液体培养基中进行浅层培养,7天后开始第一次细胞分裂,1O天时分裂频率可达20％左右,随后形成大量的细胞团和愈伤组织,通过调整培养基中的激素浓度,愈伤组织呈黄绿色并逐渐变得紧密,当这种愈伤组织转到附加玉米素和吲嗓乙酸或者萘乙酸的MS培养基上时,培养4—5周后开始有芽的分化,待芽伸长后从基部切下转到无激素的1/2MS培养基上,即长根形成完整植株。     

大麦花药培养中的密度效应

本文研究了大麦(Hordeum vulgare)花药在漂浮培养中,为获得大量花粉愈伤组织,用已经低温预处理的单核中期花药,接种密度至少需在60枚/毫升。外源激素(2,4-D和激动素)对于愈伤组织的形成并非必须。但如不加激素,需用更高的花药密度。 高密度也可用相应减少培养基的体积(用0.2毫升的液滴培养)来达到。使用预先培养过二核期花药的条件培养基,也可有效地降低所需的密度,而愈伤组织的产量和生长情况常仍比用新鲜培养基在最适密度下的培养为优。作者认为对于其他象大麦一样,花药小、对培养反应差的植物,有可能用类似本文所提出的方法,以提高花药培养的效率。     

大豆原生质体经体细胞胚再生植株

从栽培大豆(Glycine max L)的未成熟子叶游离的原生质体,以Gelrite bead法包埋,培养在大豆根瘤产物(天冬酰胺、谷氨酰胺、尿囊素、尿囊酸等)为主要氮源的ZSP培养基中,形成了胚性愈伤组织。该愈伤组织在体细胞胚分化培养基上直接分化出体细胞胚,并进一步诱导出再生植株,进入正常发育而开花。     

柱前衍生高效液相色谱法对动物组织中胶原蛋白的测定

动物组织中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用邻苯二甲醛（OPA）与其中的一级氨基酸衍生,再用9-芴基甲氧基羰酰氯（FMOC）与其中的羟脯氨酸衍生,用反相高效液相色谱法测定羟脯氨酸含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量计算胶原蛋白含量。在0.01-50 mg.L^-1范围内,羟脯氨酸的峰面积和质量浓度之间的相关系数为0.9993,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.30%和2.9%。该法选用FMOC与氨基酸衍生产物的特征波长检测,能够完全屏蔽一级氨基酸衍生物的干扰,可快速、准确、高效地测定羟脯氨酸及胶原蛋白的含量。     

小麦原生质体培养——高频率的细胞团形成和植株再生

通过调整培养基中还原态氮的含量及变換使用不同水平的2,4-D,从普通小麦的成熟种子诱导建立了胚性愈伤组织无性系,随后又从中诱导出了适合悬浮培养的松脆愈伤组织,并建立了悬浮系。由悬浮细胞游离原生质体,培养于KM8P等几种培养基中,获得了大量的再生细胞团。变换使用不同的培养基使细胞团进一步发育,形成了致密的或颗粒状的愈伤组织,在分化培养基上以器官发生和胚胎发生的途径形成了完整的植株。     

杜仲韧皮部离体培养的研究

本文证明杜仲剥下的树皮,其里面的部分具有未成熟的次生韧皮部.这一部分在人工培养下,可以由射线细胞和韧皮部中其他生活的细胞发生愈伤组织,从中分化出不连续的分生组织带或直接形成一些管胞状分子,后来并可出现成群的管胞状分子团.雄株韧皮部产生的愈伤组织中并可分化出不定芽和不定根原基.离休韧皮部经过人工培养所发生的愈伤组织内,没有分化出筛胞状分子。     

缺铁条件下苹果砧木愈伤组织的特异反应及多肽分析

以苹果属砧木种对缺铁敏感的山定子(Malus baccata(L.)Borkh.)和对缺铁耐受的西府海棠(Malus micromalus Makino)为材料,用无菌苗茎段建立了可继代培养的愈伤组织试验体系。比较了两种愈伤组织在不同铁营养条件下其生理与生化的变化。山定子愈伤组织在铁逆境下,其干重和鲜重显著增加,P,S,Mg,K,Zn,B等元素含量也均有所增加,三价铁还原能力未发生变化,细胞的超微结构遭到一定损伤,并在加重碳酸根离子(HCO_3~-)的缺铁逆境下合成了一种25kD的多肽。相反,西府海棠愈伤组织在缺铁条件下,干重和鲜重未发生显著变化,P和S元素含量显著降低,三价铁还原能力增加,并形成了传递细胞,在低铁和低铁加重碳酸根离子逆境下,合成了25kD,34kD和100kD的多肽。以上结果表明,对缺铁敏感的山定子和对缺铁耐受的西府海棠对缺铁营养逆境的反应不同,这是由其不同的遗传基础决定的。本结果为今后培育耐缺铁新类型提供了理论依据。     

基于分子印迹识别的化学发光传感器测定人血清中的游离羟脯氨酸

羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)是一种非必需氨基酸,主要存在于胶原组织中,是构成胶原的重要成分之一,作为胶原蛋白中的特异性氨基酸,可以反映机体中胶原蛋白含量的变化,而胶原蛋白含量变化又与许多疾病有关,如烧伤、创伤后的修复、骨质疏松、肝硬化、肺纤维化、肾纤维化、肿瘤等,因此测定血液中游离羟脯氨酸含量有重要临床意义.     

NdCl_3对油菜离体子叶生长和iPA水平的影响

１４０μｍｏｌ／ＬＮｄＣｌ３可明显促进油菜黄化子叶在光照培养期间鲜重，叶绿素和蛋白质含量的增加，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定异戊烯基类（ｉＰＡ）细胞分裂素的含量表明，经ＮｄＣｌ３处理后，子叶中ｉＰＡ在１２ｈ后开始增加，２４ｈ时后已达１４７７６ｐｍｏｌ／ｇ·ＦＷ，是对照的２倍，ｉＰＡ的含量在４８ｈ后才显著下降，迟于对照     

碘离子胁迫对绿豆萌发过程4种微量元素的影响

用火焰原子吸收法测定绿豆萌发过程中铜、铁、锰和锌的含量,研究不同含量碘离子胁迫对绿豆萌发过程中生理活动的影响。结果显示,各含量培养液所培养的绿豆芽苗中4种元素含量随培养时间的增加而显著降低,适当质量浓度的碘离子(20~80 mg/L)可以促进绿豆对铜、铁、锌的溶出,但碘离子质量浓度过高(100 mg/L)时将抑制绿豆对铜、铁、锰的溶渗出,培养末期绿豆均能从培养液中重新利用铁、锰、锌3种微量元素。     

八角莲的组培品及野生品的鬼臼毒素含量比较研究

对采自峨眉山野生品八角莲根、组培品的愈伤组织及根的鬼臼毒素含量进行对比研究,为八角莲的快速繁殖及利用生物技术生产鬼臼毒素提供科学依据.高效液相色谱技术(HPLC);组织培养的八角莲愈伤组织和根中均含有鬼臼毒素,分别为0.117%和0.148%,野生品的根中其含量为0.60%.通过组织培养可在不破坏自然资源的前提下快速生产鬼臼毒素,为开发鬼臼毒素类抗癌药物提供大量原料.     

氨基酸分析法研究蒙古国博格达汗宫建筑彩画的胶料种类

为了鉴定博格达汗宫建筑彩画使用的胶料,采用氨基酸分析法测定了古代常用胶料(鸡蛋、动物胶及奶类)的氨基酸组成比.分析3类胶料,发现各胶料的氨基酸组成特点,其中动物胶含羟脯氨酸,且甘氨酸平均含量高达20.45%;鸡蛋中天冬氨酸与脯氨酸的比值较高,平均值为2.29;奶类中谷氨酸与丙氨酸的比值较高,平均值为5.01.在此基础上,分析了蒙古国博格达汗宫建筑彩画样品,对样品的氨基酸组成比进行主成分分析,确定了样品胶料的种类.同时,以动物胶特有的氨基酸--羟脯氨酸(含量均值13.6%)为研究对象,估算出文物样品使用胶料的配方为鸡蛋胶原/动物胶胶原(1.5∶ 1),得出了蒙古国博格达汗宫建筑彩画是采用以鸡蛋为主、动物胶为辅的混合胶料的结论.     

脯氨酸和羟脯氨酸层析斑点的显色定量测定法

脯氨酸及羟脯氨酸层析斑点的显色定量至今无理想的方法,通常是用茚三酮或吲哚醌溶液显色,前者呈黄色,敏度低,很少用于定量分析,而后者虽显特异蓝色。但极不稳定,也难以作定量分析。Jepson等曾对羟脯氨酸先用茚三酮或吲哚醌溶液显色,再用Ehrlich试剂显色,呈特异紫色,但未见定量分析报导,Hrabetova等,曾用吲哚醌醋酸锌异丙醇液显色测定脯氨酸;Heathcote等用镉—茚三酮液显色测定各氨基酸层析斑点,此二种氨基酸斑点呈黄色,须在350毫微米波长比色定量,且稳定性欠佳。     

基于MALDI质谱成像技术分析莲子中代谢物的组织分布

该文建立了一种可对莲子中多种代谢物进行高覆盖分析的基质辅助激光解吸附质谱成像(MALDI-MSI)方法,实现了莲子中生物碱类、黄酮类、氨基酸类、脂肪酸类、有机酸类、胆碱类、磷脂类等多种代谢物的组织原位可视化表征。结果表明,生物碱类代谢物主要分布在莲子胚芽中;黄酮类代谢物主要分布在莲子胚芽和种皮中;氨基酸类代谢物在莲子子叶中的含量显著高于莲子胚中;脂肪酸类代谢物在莲子不同组织中的分布差异很小;胆碱类代谢物在莲子胚芽和莲子子叶底部的含量更高,甘油磷酸胆碱在莲子子叶顶部的含量更高;有机酸类代谢物以及绝大多数磷脂类化合物在莲子子叶中的含量高于莲子胚。该研究为评价莲子药物质量、探究莲子中化合物的时-空代谢网络提供了新的技术支持。     

抗4-氧赖氨酸的烟草愈伤组织突变体及其再生植株组织的研究

本文用烟草叶片发生的愈伤组织,相继用L-4-氧赖氨酸(OL,1克/升),2％甲基磺酸乙酯(EMS)和OL(4克/升)处理,选择并建立了抗OL的烟草愈伤组织突变体(W_0),它对乙硫氨酸(Eth)和5-甲基色氨酸(5MT)不表现交叉抗性。它比其亲本积累赖氨酸多一倍。从它再生出突变植株,在培养瓶内开花结籽。从突变植株发生次级愈伤组织(BCB)。检查了W_0和BCB对OL的抗性,赖氨酸含量和过氧化物酶同工酶谱带,证实与其亲本不同的上述三项特征都能通过再生传递在次级愈伤组织培养上表达。     

稀土对茶叶中稀土结合糖蛋白的组成及活性的影响

应用电感偶合等离子体质谱（ＩＣＰ－ＭＳ）、气相色谱（ＧＣ）、氨基酸分析仪及动力物模型,研究了喷施稀土对茶叶中稀土结合糖蛋白（ＲＥＥ－ＴＧＰ）组成及活性的影响,成品茶中有稀土结合糖蛋白;稀土对单糖种类及组成没有明显影响,但ＲＥＥ－ＴＧＰ中羟脯氨酸（Ｈｙｐｒｏ）及丝氨酸（Ｓｅｒ）含量增加明显,而谷氨酸（Ｇｌｕ）含量则比对照区的低,稀土处理区茶叶制得的ＲＥＥ－ＴＧＰ中Ｌａ含量增加了１９３％;ＲＥＥ－ＴＧＰ具有明显的降血糖效果和增强免疫作用等活性。