奶水牛血清碱性磷酸酶同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳和光密度扫描法，对摩拉（Ｍｕｒｒｈ）．尼里（Ｎｉｌｉ－Ｒａｖｉ）及三品系杂交［Ｎｉ♂×（Ｍｕ♂×Ｎａｎｎｉｎｇ♀）♀］母奶水牛血清碱性磷酸酶（ＡＬＰ）同工酶进行研究。结果表明：ＡＬＰ相对总活力为，摩拉（１９６２Ｏ０）＞尼里（１５３４００）＞三品杂（１５０３０Ｏ），尼里为高产奶量组＞低产奶量组、摩拉和三品杂为低产奶量组＞高产奶量组；ＡＬＰ三种同工酶的特点，尼里为ＡＬＰ２＞＞ＡＬＰ１＞ＡＬＰ３、摩拉和三品杂为ＡＬＰ２＞＞ＡＬＰ３＞ＡＬＰ１；种间比较，ＡＬＰ１为尼里＞摩拉＞三品杂、ＡＬＰ２为摩拉＞尼里＞三品杂、ＡＬＰ３则为三品杂＞尼里＞摩拉；种内比较，ＡＬＰ１在尼里和三品杂为低产奶量组＞高产奶量组、在摩拉则为高产奶量组＞低产奶量组，ＡＬＰ２则均为高产奶量组＞低产奶量组，而在ＡＬＰ３则均为低产奶量组＞高产奶量组。实验证实了两性载体电解质为水牛血清ＡＬＰ的强烈抑制剂。     

水牛奶碱性磷酸酶（ALP）同工酶谱型的研究

用聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳法对摩拉、尼里、三品系杂种水牛奶ＡＬＰ同工酶进行了分析研究。结果表明：３种奶都有３种同工酶，但出现的比例不一样－ＡＬＰ３为１００％，ＡＬＰ１和ＡＬＰ２均小于１００％。其同工酶活力相对百分含量，在不同种奶间，ＡＬＰ１为三品杂产＞尼里＜摩拉，ＡＬＰ２为三品杂交＞摩拉＞尼里，ＡＬＰ３为三品杂交＜摩拉＜尼里。在同种奶内是，ＡＬＰ３＞＞ＡＬＰ１＞ＡＬＰ２，尼里３种酶均是低产奶量组＞高     

几种家鸭血清无机磷含量及碱性磷酸酶同工酶的比较

对金定鸭,北京鸭及其余种大土北鸭血清无机磷含量和碱性磷酸酶同工酶谱的比较研究表明:雌金定鸭、?大土北鸭和雌北京鸭的血清无机磷含量分别为5.264mg/100 ml、4.730mg/100ml、3.305 mg/100ml,家鸭产蛋能力与其血清无机磷含量成正相关;金定鸭和大土北鸭的血清均含有四种碱性磷酸酶同工酶,而北京鸭血清只含有三种,根据大土北鸭的血清碱性磷酸酶同工酶性状部分地继承了金定鸭的遗传特征,推测碱性磷酸酶同工酶也是与家鸭产蛋性能相关的因素。     

MNNG诱发大鼠胃癌前期肝中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶变化的冰冻切片观察

用冰冻切片技术对MNNG诱发Wistar大鼠胃癌前期肝中碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)的变化进行观察．结果表明：(1)ALP、ACP的定位在处理组与对照组间无明显变化；(2)处理组比对照组ALP、ACP的活性增强；(3)处理组间比较，ALP、ACP的活性有上升趋势．结果提示，在胃癌的诱发过程中ALP、ACP的含量的增加和活性的增强有利于细胞维持正常的生理功能．ALP、ACP的含量和活性的变化有望成为肿瘤诊断、预后的辅助因子，有一定的研究价值。     

谈碱性磷酸酶及其应用

本文介绍了ALP的同功酶的检测方法及其在临床上的应用技术     

水体及沉积物中碱性磷酸酶的研究进展

阐明了碱性磷酸酶在水体和沉积物生态系统中的作用，重点综述我国海湾和淡水湖泊水体及沉积物中碱性磷酸酶的研究状况。     

长毛对虾碱性磷酸酶性质

从长毛对虾内脏物分离提纯碱性磷酸酶，经快速蛋白液相色谱（ＦＰＩＣ）检验为单一蛋白纯．研究该酶的性质，酶的紫外吸收特征峰在２７８ｎｍ处，荧光激发峰在２８２ｎｍ处，发射光谱特征峰在３４０ｎｍ处．酶的分子量为８２０００道尔顿．酶水解ＰＮＰＰ的最适温度为４７℃、最适ｐＨ为８．２．在３７℃、ｐＨ８．３下，酶的Ｋｍ值为８．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ．Ｍｇ２＋对该酶有激活作用，Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋甲醇、乙醇，乙二醇则表现抑制作用．Ｈｇ２＋的抑制作用表现为反竞争性类型，其抑制常数为９．０×１０－５ｍｏｌ／Ｌ．     

鸡肝碱性磷酸酶提取及在线固定化研究

分别用有机溶剂沉淀法和盐析法从大骨鸡肝中提取出碱性磷酸酶,并考察了提取酶液的酶促反应动力学性质.在此基础上,利用顺序注射系统将提取酶在线固定于XC—72导电炭黑表面,制备了固定化碱性磷酸酶.结果表明,大骨鸡肝碱性磷酸酶催化磷酸苯二钠分解的最佳pH=10.8,最适温度为50℃,米氏常数为1.62 mmol/L.相比游离酶,所得固定化酶的比活力显著提高.     

家蚕碱性磷酸酶的功能基团研究

用PCMB、NBS、PMSF、TNBS、SUAN、DTT、BrAc、IAc等在一定条件下选择性修饰家蚕碱性磷酸酶的部分氨基酸残基,对酶活力的变化进行测定.结果表明:PMSF、SUAN、BrAc、IAc和TNBS的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;PMSF、DTT和NBT的修饰对酶的影响较小.初步认为,巯基和组氨酸的咪唑基可能是家蚕碱性磷酸酶的必需功能基团,赖氨酸残基和二硫键对保护酶的催化能力是必需的.     

碱性磷酸酶在体外钙化中的作用

报道了用碱性磷酸酶抑制剂左旋咪唑和缓钙化剂偕二磷酸钠，通过体外钙化实验，跟踪测试ＡＫＰ比活力及＾４５Ｃａ在佝偻病从鼠的骺骨生长板中的掺入。结果表明，钙化与酶失活，缺乏Ｃａ＾２＋或Ｐｉ的条件下不会发生，ＡＰＫ活力对钙化的发生是必需的，ＡＫＰ尖力超高，钙化速度越快，同时，钙化会加速ＡＫＰ失活，钙化速度越快，ＡＫＰ活力降低越快。     

乙醇对大肠杆菌碱性磷酸酶活性与构象的影响

常用有机试剂乙醇作为效应物对大肠杆菌碱性磷酸酶（ＥＡＰ）活性影响状态作用机制进行了研究．结果表明,ＥＡＰ酶活性随着乙醇浓度增大而迅速下降,说明乙醇对 ＥＡＰ有明显的失活作用,ＩＣ５０为１３％．关于乙醇对 ＥＡＰ失活作用机制的研究表明,乙醇对 ＥＡＰ的失活作用是以非竞争性机制模式进行的．应用荧光光谱研究 ＥＡＰ经乙醇微扰后的分子构象变化,发现 ＥＡＰ的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强,说明酶蛋白分子中的荧光发色基团所处微环境已经发生变化,乙醇对 ＥＡＰ分子构象存在显著影响．      

综合利用清平磷矿废料的一种简单可行的办法

介绍了综合利用高Ａｌ低Ｐ含量的清平磷矿废料的一种简单可行的办法．在焙烧清平磷矿废料的硫酸浸取液中加入硫酸铵，在酸性条件下，在常压及５℃的低温下，使铝铵钒（ＮＨ４Ａｌ（ＳＯ４）２·１２Ｈ２Ｏ）大量结晶，从而导致Ｐ和Ａｌ分离．到目前为止，Ａｌ２Ｏ３的总浸取率在８０％以上，其回收率在９０％以上．最后，从残余Ｆｅ３＋、Ａｌ３＋和部分ＳＯ２－４被除去的滤液中，通过石灰水分步中和、沉淀，能得到合格的饲料磷酸氢钙和磷肥．     

金属离子和脲对背角无齿蚌碱性磷酸酶的影响

研究了多种金属离子对背角无齿蚌碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性的影响，结果表明：Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋和Ｌｉ＾＋等一价金属离子没有影响：Ｍｇ＾２＋，Ｃａ＾２＋，Ｂａ＾２＋，Ｎｉ＾２＋，Ｍｎ＾２＋和Ｃｏ＾２＋有激活作用；而Ｃｕ＾２＋，Ｚｎ＾２＋，Ｈｇ＾２＋，Ｃｄ＾２＋及Ａｇ＾＋有抑制作用，脲对ＡＫＰ的变性失活作用，按脲浓度可为低于２ｍｏｌ／Ｌ和高于２ｍｏｌ／Ｌ两种类型，低浓度脲对背角无齿蚌ＡＫＰ活性抑制的动力学表     

3种淡水育珠蚌碱性磷酸酶（ALP）比较酶学的初步研究

分别从三角帆蚌、褶纹冠蚌、背角无齿蚌的外套膜中部分提取了一种碱性磷酸酶，并对这３种来源的ＡＬＰ进行了比活力和动力学性质的比较研究，经过相同提纯步骤后，外套膜ＡＬＰ比活顺序是褶纹冠蚌＞背角无齿蚌＞三角帆蚌；三角帆蚌ＡＬＰ作用于底物磷酸苯二钠的最适ｐＨ值为９．４０，最适温度为３７℃，米氏常数Ｋｍ为０．５３ｍ ｍｏｌ／Ｌ；褶纹冠蚌ＡＬＰ的最适ｐＨ值为９．１２，最适温度为４０℃，米氏常数Ｋｍ为１．７２ｍ     

文昌鱼早期发育中两种碱性磷酸酶的表达

以BCIP为底物研究了碱性磷酸酶在文昌鱼胚胎和幼体中的表达图式.在囊胚、原肠胚和神经胚早期(12～13小时)未检测到碱性磷酸酶的特异性表达;到神经胚中期(15小时,约6个体节),碱性磷酸酶在每一体节的中部开始表达,在胚胎中形成3～6个条纹;在18小时神经胚中,碱性磷酸酶在肌节中表达;到24小时在后部内胚层中也开始表达;在36～48小时幼体中,碱性磷酸酶在消化道中强烈表达,但在咽鳃区不表达,同时在肌节中仍有弱的表达.研究表明碱性磷酸酶可能在肌节的发育过程中具有一定作用.碱性磷酸酶在消化道中的表达可能与这一时期消化道开始行使功能有关.为了鉴定文昌鱼碱性磷酸酶的性质,还研究了L-苯丙氨酸对碱性磷酸酶表达图式的影响,结果表明文昌鱼至少存在两种碱性磷酸酶在消化道中表达的一种是肠型的,与脊椎动物碱性磷酸酶可能为同一类型;另一种主要在肌节中表达,可能是组织非特异性的碱性磷酸酶.     

大肠杆菌碱性磷酸酶突变体的构建及其结构与功能研究

以大肠杆菌碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)高活性突变株(L138PG233S)为亲本,采用重叠延伸PCR的方法进行定点突变,成功获得了氨基酸替换突变体3个,并对它们的酶活性、特性、内源荧光发射峰等与亲本酶进行了比较分析.结果发现:与亲本酶相比,突变体酶的酶活性降低了18%～85%,Vmax值降低,Km增加,内源荧光发射峰λmax增大等.与亲本酶相同,Zn2 ,Mn2 ,Mg2 仍是它们的激活剂,Na3PO4是它们的抑制剂;这些实验结果说明突变体酶活性的降低直接与其构象变化有关,被替换的氨基酸在维持碱性磷酸酶的结构和功能方面具有特定的作用.     

地层碱化的试验研究

提出了地层碱化的新措施,研究了与本措施有关的岩石的碱溶和沉积、原油的乳化和破乳两个问题.用溶液元素分析法研究了静态条件下岩石碱溶规律,得出矿物碱溶顺序为;蒙脱石>高岭石> 伊利石> 正长石> 石英> 绿泥石,这表明碱化适宜地层为高粘土含量的高温低渗砂岩地层.用浊度法研究了 pH值和电解质对碱溶产物沉积的影响.结果表明,当 pH值降至 9～10或遇Ca2 、Mg2 时,碱溶产物析出凝胶或无机沉淀.用不稳定系数法研究了不同因素对原油乳化和破乳的影响,得出注碱乳化配方.该配方由适当碱浓度和最佳盐含量组成,pH值降低或遇ca2 、Mg2 ,可促进注碱乳化原油破乳.此外,通过多点测压渗流装置模拟了油水井碱化过程,证实碱化具有近井增注、远井调剖效果.     

海洋细菌Pseudomonas sp.7-11产碱性蛋白酶的研究

本文研究了海洋细菌Pseudomonas sp.7-11产碱性蛋白酶的发酵条件及调控机制，并对该蛋白酶进行了分离纯化，实验结果显示，7－11为好氧菌，具有某些嗜低温的特性，而且适宜在偏碱性的条件下生长并产酶；酪蛋白培养基适合该菌株产酶；K^＋对产酶起关键作用；复合氨基酸对产酶有抑制作用，发酵液经盐析和离子交换层析等得到了两个活性峰，其中一个峰达到电泳纯，因此该菌产生蛋白酶不止一种。