纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件

以褐色高温单孢菌（Thermomonospora fusca)为出发菌株，通过60s和80s的紫外线交替诱变孢子悬液，采用透明圈法初筛和摇瓶培养复筛的方法，获得了一株高产纤维素酶的突变株PE－211。与原始菌株相比，该突变株的产酶活力提高了1倍多。文中还对PE－211的产酶条件进行了研究。     

新疆罗布泊周边胀果甘草内生芽孢杆菌BLG-542产碱性纤维素酶最佳条件的研究

文章以罗布泊胀果甘草中分离出的78个菌株中初步筛选出7株产碱性纤维素酶的菌株为研究对象,进行产碱性纤维素酶最佳优化条件的研究.碱性的胀果甘草内生芽孢杆菌菌株接种于CMC-Na为碳源,复合蛋白胨为氮源的培养基中,分析研究菌株产碱性纤维素酶的最佳条件优化.通过从78株本实验室于2006年保藏的罗布泊胀果甘草内生菌中筛选出能产生胞外碱性纤维素酶的7株菌,其中酶活力最高的菌株为BLG-542.本研究主要以酶活力最高的菌株BLG-542为出发菌株进行研究.经过对产酶条件优化,获得了胀果甘草内生菌产碱性纤维素酶最佳配方培养基:D-木糖10g/L,复合蛋白胨10g/L,可溶性淀粉10g/L,酵母粉5g/L,K2 HPO4 1g/L,MgSO4 0.2g/L,NaCl 20g/L,Na2CO3 10g/L;实验产酶最佳接种量为6％,最佳培养温度为37℃,最佳培养时间为48h,产酶最佳PH为9.0;菌种生长最佳PH为7.6,经过优化产酶条件纤维素酶活力从优化前的3.8U/mL提高到6.26 U/mL,是优化之前的1.8倍;该研究表明特殊生态环境的植物内生菌与次生代谢产物、活性物质、酶类有密切的关系,环境除对内生菌酶的产生极其活性影响外,还影响着内生菌的次生代谢.该地区植物内生菌均有潜在的应用价值.     

厌氧碱性纤维素酶产生菌的富集及产酶特性研究

在牛粪堆肥中富集得到能够较高降解纤维素的菌系JYB,液体摇瓶培养产生的碱性酶活达到0.62u/mL,菌体生长的最适温度为40℃,最适pH值为8.5.摇瓶产酶实验表明,JYB产生的纤维素酶对碱性环境有较好的耐受能力,在温度为45℃,pH值为9.0的条件下酶活性最高,该碱性酶在纺织品的洗涤方面具有较好的应用前景.     

纤维素酶益生菌的选育及产酶条件

从土壤中筛选出一株产纤维素酶的细菌B1,通过形态观察、生理生化特征及16S rDNA同源性序列分析,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).经微波-硫酸二乙酯复合诱变筛选出正突变株B1-1,其纤维素酶酶活达到0.373 U/mL,经5次传代后,该菌株遗传性状稳定,且胃肠道耐受性良好;B1-1菌株最佳产酶条件为20 g/L麦芽糖,2.5 g/L硫酸铵,pH值为5.0,37 ℃下培养36 h.     

耐热纤维素酶产生菌及产酶条件

从西双版纳温泉水样中分离经鉴定为嗜热脂肪芽孢杆菌的ＣＣ２２菌株（ＢａｃｉｌｕｓｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓｓｔｒａｉｎＣＣ２２）在６０℃生长时,培养液中可积累耐热的ＣＭＣａｓｅ（４３ｍＵ／ｍＬ）和ＦＰａｓｅ,（１０６ｍＵ／ｍＬ）．产酶高峰期在培养１６ｈ左右,最适起始ｐＨ为６．５,温度为６０℃．ＣＣ２２能利用某些无机氮形成纤维素酶,一定配比的有机氮和无机氮的混合物是ＣＣ２２形成纤维素酶的最好氮源．ＣＭＣＮａ纤维二糖及一些农作物原料能作为碳源供ＣＣ２２形成纤维素酶,高浓度葡萄糖对ＣＣ２２纤维素酶的形成有抑制作用．１５ｇ／Ｌ的ＮａＣｌ对ＣＣ２２产酶有抑制作用,但体积分数为１％的６号微量矿质营养液无论对菌的生长和产酶均有显著促进作用．     

产中性纤维素酶真菌产酶条件的优化

研究了碳源、氮源、接种量、培养时间、培养温度、培养基初始pH等条件对产中性纤维素酶真菌菌株瓶霉菌（Phialophora sp．z8）产酶的影响．结果表明：该菌株产中性纤维素酶的适宜碳源为1％稻草粉加1％可溶性淀粉,最适氮源为0．2％的（NH4）2SO4加0．1％的牛肉膏,接种量为5％,培养时间为72h,培养温度为28℃,培养基初始pH为6～7．在最适宜的条件下,培养液中内切葡聚糖酶活力可达到2．95IU／mL,而天然纤维素酶活力和滤纸酶活力却很低。     

产纤维素酶粗糙脉孢菌1602产酶条件优化

通过优化设计，确定纤维素高产菌株Neurospora crassa 1602摇瓶发酵最佳产酶条件为：培养液初始pH值为5、5，培养温度为28℃，摇瓶转速为150rpm，培养96h；3％玉米芯粉、0．5％麸皮酸水解液(0．6mol/L)能够促进产酶，最适宜的有机氮源为黄豆粉；最适宜的无机氮源为NH4HSO4．在最适发酵条件下，其纤维酶的活力CMCase为10．34IU／ml．FPase为0．71IU／ml．     

碱性果胶酶生产菌株的产酶条件优化

对自行筛选的碱性果胶酶生产菌培养条件进行了优化.考查了碳源、氮源浓度和接种量对发酵产酶的影响.经单因素实验和正交试验研究,该菌株最佳产酶条件组合为:果胶添加量0.3％、NaNO3添加量0.6％、接种量6％.在此条件下,碱性果胶酶酶活力达到6 079 U/mL.     

碱性脂肪酶产生菌的诱变及产酶条件的研究

微生物脂肪酶 ( E.C.3.1 .1 .3)是一种重要的工业水解酶 ,它可降解甘油三酯为甘油二酯、单甘酯和脂肪酸 [1 ] .碱性脂肪酶是洗涤剂用酶制剂中的一种 ,它可分解衣物上天然污垢中较难除去的甘油三酯 ,提高洗涤剂的去污能力 ,降低表面活性剂和三聚磷酸盐的用量 [2 ] .这里我们报道产碱性脂肪酶菌株的诱变及产酶条件优化等方面的研究结果 .1　材料和方法1 .1　材料1 .1 .1　菌种　芽孢杆菌 O6 2 6 ,筛选自青白江炼油厂的土壤中 .1 .1 .1　培养基　初筛培养基 ( g/L ) :上层　牛肉膏 3,蛋白胨 1 0 ,K2 HPO40 .5 ,Mg SO4.7H2 O0 .5 ,Na NO3…     

间歇出酶对里氏木霉产纤维素酶的影响

在分批补料的基础上,采用间歇出酶的方法,对里氏木霉产纤维素酶进行了研究。结果表明:分批补料过程中最佳的补料速度为5.5 g/(L·d),在此条件下产酶第8天滤纸酶活力和β-葡萄糖苷酶活力达到14.40 U/mL和1.59 U/mL。在分批补料的基础上进行间歇出酶,与对照相比,第4、6、8天出酶模式(模式1)时,总滤纸酶活力提高18.14%; 第4、7天出酶模式(模式2)时,总滤纸酶活力提高17.75%; 第5、8天出酶模式(模式3)时,总滤纸酶活力提高27.35%。研究表明,通过间歇出酶可以有效提高纤维素酶总滤纸酶的活力。     

嗜热蛋白酶生产菌Bacillus sp.DPE7的产酶条件研究

芽孢杆菌(Bacillus sp. )DPE7产嗜热蛋白酶的适宜条件,较好的碳源是0.1%葡萄糖,最佳氮源为酵母粉加硫酸铵,在pH 6～11范围内产酶均良好.在65℃,175 r/min,pH 9的产酶培养基中发酵24 h,产酶量可达23.4 U/mL.0.01% MnCl2,0.15% CaCl2或0.15%吐温存在时能刺激菌株产酶.     

根霉Rhizopus sp.TC1产酶条件的研究

根据要因实验原则,选择影响因子较大的因素进行实验,初步研究了根霉Rhizopussp.TC1的产酶条件.经实验确定优化产酶条件为:稻草∶麸皮=1∶1;固液比=1∶3;接种量9 mL种子液/100 g湿基;温度28℃,在此条件下发酵96 h,FPA和CMC酶活分别达到17.8 IU/g、187.0 IU/g,较优化前的12.3 IU/g、131.6 IU/g分别提高了45%和42%.     

一株产高温纤维素酶曲霉菌的发酵条件及培养基优化

对一株产高温纤维素酶的曲霉(Aspergillus sp.)F4菌株进行培养基及发酵条件的优化.最佳产酶液体培养基配方为:稻草粉40 g·L-1,(NH4)2SO43.5 g·L-1,NaCl 2 g·L-1,KH2PO42 g·L-1,MgSO4.7H2O 0.5g·L-1,甘油0.20%,pH 5.5;优化后CMC酶活力提高16.7倍.优化后产酶条件为:接种量4%,温度37℃,摇床转速150 r.min-1,装液量80 mL/250 mL.在此条件下发酵8 d,CMC酶活力达到了12.26 U.mL-1,比优化前提高了约2倍.     

嗜热侧孢霉2441纤维素酶产酶条件优化及突变株选育

为了提高嗜热侧孢霉2441纤维素酶的产量,对产酶条件进行了优化,测定了酶的特性,对选育抗葡萄糖效应突变株和中温型突变株进行了探索.实验中酶活力测定以微晶纤维素、CMC-Na和水杨苷为底物,DNS法测定还原糖;产酶条件优化采用正交试验设计,以微晶纤维素酶活为指标;通过NTG诱变和UV诱变选育抗葡萄糖效应突变株和中温型突变株.结果表明:产酶条件优化后,嗜热侧孢霉2441的纤维素酶活极显著提高(P0.01);2441的微晶纤维素酶、CMC-Na酶和β-葡萄糖苷酶的最适作用温度分别为60℃、65℃、70℃,最适作用pH值均为5.5,温度高于70℃及碱性条件下,酶活力显著下降;选育的抗葡萄糖效应突变株N20-01,微晶纤维素酶活提高13.203%,CMC-Na酶活提高47.176%,β-葡萄糖苷酶活提高119.517%;选育的中温型突变株U40-03,在32℃培养时与2441在45℃培养时相比,微晶纤维素酶活提高11.411%,CMC-Na酶活提高29.484%,β-葡萄糖苷酶活提高54.759%.     

纤维素酶测活方法的分析——基于构建统一的工业化纤维素酶测活标准

本实验分析了国内外常用的测活标准IUPAC标准(Ghose, 1987)、中国农业行业标准（NY/T 912-2004）及各大公司的企业标准,结果显示采用IUPAC标准推荐的方法测定纤维素内切酶活力和总酶活力操作简单,稳定性、重复性较好.实验进一步对国内生产厂家的一系列产品进行了测定分析,为工业化纤维素酶测活体系的统一奠定了基础.     

一株纤维素酶产生菌的固态发酵初步研究

用预处理的天然纤维素为碳源，从土壤中筛选出8株产纤维素酶能力较强的真菌，选取其中CMC糖化力(CMCase)和滤纸糖化力(FPA)均较高的JZ—H进行固态发酵实验，初步研究表明，该菌以杂草为碳源，(NH4)2S04和蛋白胨为氮源，500mL三角瓶装干料10g，自然pH，30℃培养96h，发酵物的CMcase达128．5IU／g，FPA达75．8U／g，蛋白质增加13．5％．     

纤维素复合酶在秸秆饲喂奶牛中的应用效果研究

以玉米秸秆为粗饲料饲喂奶牛,研究添加纤维素复合酶对奶牛的生产性能的影响效果。结果表明：试验期内,试验组和对照组相比标准乳量提高了63.03%（P〈0.01）,平均乳脂率提高了18.29%（P〈0.05）;试验组奶牛粪中NDF和ADF的排出量和表观消化率与对照组相比,差异极显著（P〈0.01）,DM的排出量和表观消化率差异显著（P〈0.05）,而CP的排出量和表观消化率差异均不显著（P〉0.05）。     

黑曲霉液体发酵生产纤维素酶的研究

从土壤中分离得到一株产纤维素酶的黑曲霉菌株Ａｓｐ．ｎ－１３,采用二级液体发酵生产纤维酶;对液体发酵条件进行了研究,确定了发酵培养基配方。试验结果表明,滤纸酶活力最高达１６４Ｕ／ｍＬ,ＣＭＣ酶活力最高达２７２Ｕ／ｍＬ,最适发酵周期为７６－８４ｈ。     

纤维素酶对亚麻纤维酶整理工艺研究

以纤维素酶对亚麻纤维酶整理工艺进行研究,探讨酶的处理温度以及时间对酶整理效果的影响。通过实验,确定了最佳工艺条件及参数,并对酶整理后的亚麻织物进行白度、强力性能指标的测试。