四川老坛泡菜中乳酸菌的分离与鉴定

老坛泡菜比一般泡菜具有更好的菌种多样性和菌群稳定性. 为筛选乳酸菌菌株, 从四川省眉山市仁寿县新安村农家坛龄达30年以上的老坛泡菜中, 分离得到12株疑似乳酸菌, 进行形态学观察、生理生化实验鉴定, 进一步利用16S rRNA基因序列比对、构建系统发育树, 确定疑似乳酸菌菌种. 分离鉴定出5株植物乳杆菌、3株短乳杆菌、2株肠膜明串珠菌、1株干酪乳杆菌和1株屎肠球菌, 其中以植物乳杆菌数量最多.     

MIDI Sherlock微生物自动鉴定系统鉴定方法的建立——以贻贝中分离的蜡样芽胞杆菌为例

研究了用MIDI Sherlock微生物自动鉴定系统对贻贝中分离的蜡样芽孢杆菌自动鉴定方法的建立,通过培养基和取菌量的不同展开分析,并用生理生化鉴定和PCR鉴定来验证其准确性.结果表明：MIDI鉴定系统对于用TSBA培养基培养的蜡样芽孢杆菌鉴定的准确率比用营养琼脂培养基培养的要高,而且取菌量为100~120mg组鉴定时的准确率要高于其他取菌量的组,说明培养基和取菌量的不同都会对该系统的鉴定结果产生影响.最后确定蜡样芽孢杆菌鉴定方法为：TSBA培养待检微生物,获菌量控制在100~120 mg之间,生理生化鉴定和PCR鉴定验证了该方法的准确性.     

混和菌株发酵富含共轭亚油酸酸奶的特性

功能性酸奶作为一种保健食品逐渐被人们熟知,其特别之处在于添加了具有独特功效的物质。本文利用植物乳杆菌R6、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌3株益生菌发酵添加了亚油酸的脱脂乳。其中植物乳杆菌R6能合成共轭亚油酸(CLA),从而制备出富含CLA的酸奶。进一步优化发酵条件,探寻最佳的发酵工艺。最后利用PCR-DGGE分析酸奶菌群变化与CLA合成关系,得出酸奶中混合菌株生长良好,相互之间没有抑制作用,因此,既能保证酸奶的品质,也保证了CLA的合成。 更多还原     

高产共轭亚油酸植物乳杆菌的诱变选育

利用人工诱变方法选育高产共轭亚油酸生产菌株，以实验室保藏的植物乳杆菌Lactobacillus plantarumA（简写为L.plan A）为出发菌株，经紫外线，硫酸二乙酯的依次处理，结合高浓度亚油酸平板（0．1％）的筛选和进一步摇瓶复筛，最终得到一株共轭亚油酸高产菌株Lactobacillus plantarum H3．1（简写为L．plan H3—1），其共轭亚油酸产量高达30．67mg·L^-1，比出发菌株L．planA提高了264．5％．传代实验中突变株L．planH3—1的遗传特性较稳定．实验结果证明该诱变方法对提高植物乳杆菌L．planA的共轭亚油酸产量效果比较显著。     

38株紫色土硅酸盐细菌的遗传多样性和分类地位

利用BOX-PCR指纹图谱、结合16S rRNA全序列分析对分离自四川和重庆紫色土的38株硅酸盐细菌和2株参比菌株的遗传多样性和分类地位进行了研究.BOX-PCR指纹分析结果表明,尽管都是分离自紫色土的硅酸盐细菌,但是其遗传多样性明显,分别在54%相似性水平上分为4遗传群,约50%的供试菌株与胶胨样芽孢杆菌Bacillus mucilaginosus VKPM 7519T聚在一群.对代表菌株K28和K38的16S rRNA全序列分析表明,K28与B.muculaginosus 180D的16S rRNA全序列相似性为95.9%,而K38则与蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus) ATCC14579同源性高达99.9%,这是初次发现硅酸盐细菌在蜡质芽孢杆菌(B.cereus)中有分布.     

鸡源凝结芽孢杆菌的筛选鉴定及益生性能评价

凝结芽孢杆菌作为产芽孢的乳酸菌，其抗逆性和益生作用备受关注。为获得优良凝结芽孢杆菌菌种，本研究通过热处理从芦花鸡粪便中分离鉴定出22株潜在优良的凝结芽孢杆菌，并对其抗逆性及益生性能进行评价，结果表明：在高温(90℃)、酸(pH=2.0)和胆盐(0.5%)条件下，菌株NCUBCG003、NCUBCG004和NCUBCG014存活率达85.0%以上。通过主成分分析法可知，这三株凝结芽孢杆菌在高温和胃肠道环境下的综合耐受性强于其他凝结芽孢杆菌；其次，菌株NCUBCG003、NCUBCG004和NCUBCG014有较高的乳酸产量和胆固醇降解能力，乳酸产量达5.0 g·L-1以上，胆固醇去除率可达50.0%;最后，凝结芽孢杆菌有一定的抗氧化活力，特别是菌株NCUBCG003的羟自由基清除能力可达64.03 U·mL-1,DPPH自由基清除率可达76.57%,而菌株NCUBCG014总抗氧化能力最突出，相当于3.52mM的FeSO4溶液。综上可知，菌株NCUBCG003、NCUBCG004、NCUBCG014综合益生性能强于其他凝结芽孢杆菌，且安全可靠，具备在人和动物体内发挥益生作用的潜力，可作为优良微生物菌种资源，为凝结芽孢杆菌的工业化生产和应用奠定基础。     

腌冬瓜中具有抑菌活性乳酸菌的鉴定及其抑菌特性的研究

利用双层平板法从浙东传统腌制冬瓜中筛选得到1株具有抑菌活性的乳酸菌, 命名为L34. 以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌为指示菌, 利用牛津杯法测定乳酸菌发酵上清液的抑菌活性, 发现其抑菌活性物质具有热稳定性, 对部分蛋白酶敏感; 抑菌活性随pH值的降低而增强, 表现出对酸的依赖性. 结合生理生化实验和16S rDNA序列比对结果, 鉴定L34为植物乳杆菌.     

基于自动质谱解卷积系统分析鱼露中的挥发性物质

以广东鱼露为研究对象,采用顶空固相微萃取法与气相色谱-质谱联用分析鱼露中的挥发性物质,利用自动质谱解卷积系统,结合相对保留指数对所获图谱进行定性分析。共鉴定出97种物质,包括酚类(43.36%)、酯类(16.49%)、醚类(12.69%)、醇类(12.49%)等13类物质。结果表明:利用自动质谱解卷积系统可以鉴定出更多的挥发性物质,相对保留指数的应用提高了结果的可靠性。 更多还原     

植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达

构建植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因原核表达载体,表达并纯化蛋白。本研究以植物乳杆菌ZDY 2013基因组DNA为模板,PCR扩增谷氨酸脱氢酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达和镍柱亲和层析后获得目的蛋白,活性测定显示该蛋白具有谷氨酸脱氢酶的活性。同时,对表达菌株的酸耐受性测定结果表明,细胞对pH 4.5的酸胁迫耐受性提高1.4倍。实验结果为深入研究植物乳杆菌ZDY 2013谷氨酸脱氢酶保护细胞抵御酸胁迫提供有益的参考。 更多还原     

反转座因子Foxy在棉花枯萎病菌中的存在

本实验以新疆、河南分离的棉花枯萎病菌异核体菌株及其不同表型分离子菌株为材料,采用PCR法,检测到所有供试菌株均存在可转座因子Foxy.经测序分析表明,它们之间的同源性在96%.每个Foxy片段虽不编码基因,但都存在RNA聚合酶Ⅲ结合位点的两个保守区,BoxA和BoxB,并具有EcoRI酶切位点,符合反转座因子的特征,是一种短散布序列.     

基于RF位的多阶段动态路径标识模型

为防御因特网的分布式拒绝服务攻击,提出了一种新颖的基于RF位的动态路径标识方案（RFPi）,并采用多阶段的学习过滤模型．理论分析和仿真实验均表明：所采用的新方案最大程度地实现对标记域的有效利用,提高了攻击包和合法包的区分效果,且具有良好的可扩展性,防御效果较为理想．     

多元连续型指数分布的识别性

分别讨论了3个二元连续型指数分布和多元连续型指数分布的识别性,记1 2Z=min(X,X),I=i;当iZ=X,1 2 3Z=min(X,X,X),I=i,对1 2(X,X)和1 2 3(X,X,X)分别具有Weinman型指数分布、Freund型指数分布、Block~Basu型指数分布时,讨论了已知Z,(Z,I)的分布情形下,1 2(X,X)和1 2 3(X,X,X)的分布参数的识别性状况.     

大沙鼠的年龄鉴定

2002~2003年通过对精河甘家湖荒漠梭梭林国家级自然保护区大沙鼠的实地调查,共进行野外作业9次,设置100m×100m样方40个,采用样方面积夹子法,按5×20进行布夹,共布夹3964次,捕获大沙鼠(Rhomboms opimus)173只,其中雄94只,雌79只.通过对大沙鼠体重、体长、胴体重、胚胎及产仔情况、性腺发育状况的分析与比较,我们利用差异显著的胴体重为标准,将其划分为5个年龄组.其中雌鼠:1龄组幼体30~67g,2龄组亚成体62-85g,3龄组成体1组85~113g,4龄组成体2组113~147g,5龄组老体139~173g.雄鼠:1龄组幼体33~84g,2龄组亚成体61~102g,3龄组成体1组102~158g,4龄组成体2组113~153g,5龄组老体131~193g.     

船舶操纵运动方程系数的系统辨识

作者设计并制作了伪随机二进制(PRBS)信号发生器。井以PRBS信号操舵,辨识了船舶操纵运动方程的系数。用离散时间测量决定线性连续时间模型参数。给出了Mariner标准模型和一艘渔轮的辨识结果,井与标准的Nomoto及,T计算结果进行了比较,结果令人满意。     

牛早期胚胎性别鉴定的PCR方法研究

探讨了ＰＣＲ法鉴定牛早期胚胎性别时所用的引物,反应缓冲液中Ｍｇ２＋浓度,循环反应的次数及可能造成污染的各种因素对性别鉴定结果的影响．并对１８个胚胎进行了性别鉴定,移植３８枚性别鉴定后的胚胎,成功产下２头与预测性别一致的牛犊,胚胎性别可鉴率为９４．１％,预测性别符合率为１００％．     

云居山的大型真菌资源及分布

本文报导了云居山的大型真菌及其分布,并对开发利用提出建议。     

一株砷抗性钩端螺旋菌的分离与鉴定

以含砷金尾矿样品作为浸矿微生物生长的能源物质,利用富集培养方法从江西银山铜矿尾矿矿坑酸性废水中分离得到一株砷抗性细菌AS-1,该菌株革兰氏染色阴性,其最适生长温度在35℃~40℃之间,最适生长pH1.0~2.0。16SrDNA系统发育分析表明,该菌与嗜铁钩端螺旋菌(Leptospirillum ferriphilum)的相似度达99%,属于同一类群。浸矿试验结果显示,试验组分离菌AS-1脱砷率达到61.2%,对照组砷元素含量浸矿前后无显著差异,表明分离的AS-1浸矿菌具有较强的脱砷能力。     

一株鸭细小病毒的分离鉴定与ns基因序列分析

采用余姚某鸭场濒死鸭肝组织悬液，接种鸭胚尿囊腔增殖病毒，蔗糖梯度离心法纯化病毒，电镜观察见直径约20nm的球形病毒粒子，免疫琼脂扩散实验结果显示与鸭细小病毒（duck parvovirus，DPV）抗血清有明显沉淀线；SDS-PAGE电泳可见3条结构蛋白带，与DPV毒株一敛；参照GenBank DPVns基因序列979～1566bp设计引物，PCR扩增反应获得其目的片段．克隆到载体pMD18-T后测序，该序列与GenBank中的番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus，MDPV）以及巴比里鸭细小病毒（Barbarie duck parvovirus，BDPV）的ns基因序列同源性为98％．病鸭肝组织匀浆液雏鸭感染试验显示雏鸭发病症状及剖解病理变化明显，死亡率为75％．利用血清学实验与鸭肝炎Ⅰ型、禽流感和新城疫病毒感染举别．由此确定引起本次鸭场疫病的病原为DPV，命名为04NY株．     

二元混合型指数分布的识别性及其应用

对新提出的一类二元混合型指数分布和其他三类二元混合型指数分布,讨论了它们的分布识别问题,即记z=min（x1,x2）,I=i,当z=xi;记U-max（＆,x2）,J=j,当U=Xi;已知（Z,I）或（U,J）的分布,求（X1,X2）分布的唯一性问题．给出了（x1,x2）服从Marshall-Olkin型指数分布时,有关寿险中Z及u的精算现值的2个公式．