卵母细胞的卵龄对猪核移植效率的影响

对核移植中,猪卵母细胞的卵龄对核移植效率的影响进行了研究结果表明：体外成熟培养 ４８ ｈ 的猪卵母细胞最适合作为核受体,其激活率达 ７８．３％ ,并无裂解;去核率高达９０％ ;在作为核受体进行核移植时,融合率为７５％ ;重构胚胎的卵裂率为６４．６％ 卵龄进一步增大,激活率略有增加,但去核率、融合率和卵裂率均下降     

电脉冲激活猪卵母细胞的研究

通过对猪卵母细胞的电激活进行系统研究,结果表明：对于体外成熟卵母细胞,电场强度为 １ ２５０ Ｖ／ｃｍ ,脉冲时程为４０、６０ μｓ时,效果较好,一次脉冲激活率可达８５．３％ 和８７．１％ ;而对于体内成熟卵母细胞,电场强度为１ ５００ Ｖ／ｃｍ ,脉冲时程为４０、６０ μｓ 时,效果较好,一次脉冲激活率达８５．７％ 和８８．２％ ;增加脉冲次数并不能显著提高激活率,反而使卵母细胞裂解率显著增加;激活液选用０．３ ｍ ｏｌ／ Ｌ甘露醇（含０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｍｇ Ｓ Ｏ４ ）时,添加 ０．１ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｃａ Ｃｌ２ ,获得较好的激活率（８７．８％ ）电脉冲激活卵母细胞后进一步培养,体内和体外成熟卵母细胞的发育率并无显著差异     

兴国红鲤卵母细胞发育中的多糖物质

以池养的兴国红鲤(Cyprius carpio var singuonensis)雌性卵巢为材料,研究了生殖季节内卵巢中卵母细胞内多糖物质的定域分布与变化规律。同时,观察了在饥饿条件下卵母细胞中多糖分布的变化。观察结果证明:1时相卵母细胞中除质膜和其周围结缔组织上有较强的PAS反应外,细胞内几乎     

非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP激活电流ID2成分的分析

在带有滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞标本上,应用双电极电压钳及胞内透析方法进行记录,外加ATP所激活的内源性膜电源包括3个成分依次为：快内向电流（early fast depolarizing current,ID1),慢内向电流（lateslow depolarizing current,ID2)和慢外向电流(slow hygerpolarrizing current,IH),本文主要分析ID2成分的特征及其产生的机制,结果如下：（1）胞内透析500μmol/L GDP-β－S,500min后被完全阻断;（2）外液中[Cl^-]从100mmol/L下降到5mmol/L时,在ATP（100μmol/L）作用下,ID2幅值随[Cl^-]的下降明显增大;（3）外液中无Na^ 时ID2幅值增高（P＜0．05）。结果表明,ID2是由P2Y受体所介导,通过G蛋白耦联及胞内信号转导而引起胸内Ca^2 依赖性Cl^-外流所致。     

蛋白质相互作用网络中信号通路的识别算法

基于分枝限界方法,提出了QuickPathWay(QPW)算法来预测蛋白质信号通路.该算法使用蛋白质网络中节点间的距离作为约束条件来进行双向搜寻,减少了多余中间节点数.实验表明,QPW算法能够在5 min内找到长度为8的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,其他较短的信号通路的查询时间不超过1 min.本实验同时也验证了QPW算法的可靠性.QPW算法与其他研究者的类似算法相比速度更快.     

非洲爪蟾卵母细胞内源性ATP激活电流ID2成分的分析

在带有滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞标本上,应用双电极电压钳及胞内透析方法进行记录,外加ATP所激活的内源性膜电流包括3个成分依次为快内向电流(early fast depo1arizing current,ID1),慢内向电流(1ateslow depolarizing current,ID2)和慢外向电流(s1ow hygerpolarizing current,IH).本文主要分析ID2成分的特性及其产生的机制.结果如下(1)胞内透析500 μmol/L GDP-β-S,50 min后被完全阻断;(2)外液中[Cl]从100mmol/L下降到5 mmol/L时,在ATP(100μmol/L)作用下,ID2幅值随[Cl-]的下降明显增大;(3)外液中无Na+时ID2幅值增高(P＜0.05).结果表明ID2是由P2Y受体所介导,通过G蛋白耦联及胞内信号转导而引起胞内Ca2+依赖性Cl-外流所致.     

久坐对脊椎肌肉sEMG信号的影响

采集18名女性受试者在不同久坐时间下,颈夹肌和竖脊肌在最大用力收缩（MVC）过程中的表面肌电（surface electromyography, sEMG）信号,分别考察其初始1.5 s的线性时频指标AEMG、MPF、非线性分析指标%DET的差异,以及全程MVC过程中MPF的变化趋势,以探讨久坐对脊椎肌肉活动水平和功能状态的影响.发现：在久坐前、久坐1.5 h、久坐3 h之后3种状态下,颈夹肌和竖脊肌在MVC的前1.5 s信号中,其时频信号AEMG、MPF及非线性信号%DET均无明显变化;在1 min脊椎持续MVC过程中,颈夹肌MPF均呈现线性递减趋势,且下降速率依次增大;竖脊肌MPF则呈现线性递增趋势,且上升速率依次减小.由此可得,久坐对于脊椎肌肉的最大收缩力量并无影响,但是对其维持最大收缩力量的能力有所改变.     

凋亡抑制基因P35对杆状病毒增殖的影响

以野生型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographacali for nica Nuclear Polyhedrosis Virus,Ac     

乌药根挥发油对HepG2细胞增殖和凋亡的影响

研究乌药根挥发油对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。采用MTT法检测并比较乌药根挥发油对人肝癌HepG2细胞和正常肝细胞HL-7702增殖的影响;采用琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪法研究乌药根挥发油诱导HepG2细胞凋亡的作用。经不同浓度乌药根挥发油处理HepG2细胞24h,随药物浓度的增加,细胞生长抑制率逐渐增加。在低浓度范围(≤50μg·mL-1)时,乌药根挥发油对肝癌细胞的毒性作用要明显强于对正常细胞的作用。经过80和100μg·mL-1乌药根挥发油处理24h的HepG2细胞观察到典型的DNA ladder。经100、150和200μg·mL-1乌药根挥发油处理8h后,sub-G1期细胞的含量逐渐升高,分别是6.8%、12.6%和20.3%。提示乌药根挥发油能够有效抑制肝癌HepG2细胞的增殖,且具有一定的癌细胞选择性;同时能诱导HepG2细胞发生凋亡。更多还原     

温度对特氏肉食螨发育历期的影响

对特氏肉食螨在４种恒温（２０℃,２５℃,３０℃,３５℃）条件下的发育历期和了详细的研究,结果表明,特氏肉食螨整个发育历期在２０℃条件下最长（１０２．４d),在３５℃条件下最短（２９．６d);该肉食螨整个未成熟期的发育起点温度为１２．９℃,有效积温为２５０．５（日度）。     

Mst1对结直肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响

MST1是死亡受体信号通路Hippo通路的核心成员,其基因表达异常多见于结直肠癌、肝癌、胃癌等肿瘤。为了探讨MST1表达对人结直肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响及其发生机制,采用PolyJet TM介导pEGFP-N1-Mst1及LipofectamineTM2000介导Mst1特异性-siRNA转染至SW480细胞,分别建立高低表达Mst1的细胞模型。对不同分组的细胞增殖、凋亡及凋亡相关蛋白的表达进行检测。结果显示,Mst1高表达组细胞增殖抑制、凋亡率及凋亡相关蛋白的表达显著增高,反之,Mst1低表达组细胞增殖加快,细胞凋亡率及凋亡相关蛋白的表达显著降低。结果提示,Mst1的靶向调控能较好地控制结直肠癌细胞的增殖与凋亡,可作为人结直肠癌防治的新研究靶点。 更多还原     

丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响

采用荧光探针染色法，琼脂糖凝胶电泳分析方法．流式细胞仪技术研究丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响．结果显示，丝裂霉素处理CHO-K1细胞后，细胞核质收缩凝集，核碎裂及出现凋亡小体；琼脂糖电泳呈现典型的DNA梯带；流式细胞仪检测到典型的细胞凋亡峰(亚G1峰)，分别用10，15，20，25mg／L丝裂霉素处理CHO-K1细胞，其细胞凋亡率分别为4．76％，9．20％，14．51％，37．46％，且凋亡率随药物浓度的升高而升高，显示两者的正相关性；作用浓度相同而改变处理时间时．发现细胞凋亡率随处理时间的延长而呈上升趋势；流式细胞仪细胞周期分析，显示随着丝裂霉素浓度提高或作用时间延长，G1-S期细胞百分比降低，G2／M期细胞百分比升高，Ap峰与G1-S期负相关，与G2／M期正相关．     

p16蛋白对B型流感病毒诱导HeLa细胞凋亡的影响

以流感病毒 B/沪防 93- 1株感染 He L a细胞 ,通过 Hoechst332 5 8荧光染色、琼脂糖凝胶电泳分析检测细胞凋亡 ,并用免疫组化技术测定 p16蛋白的表达 ,探讨 p16蛋白表达对 He L a细胞凋亡的影响 .结果表明 ,B型流感病毒感染 He L a细胞可诱导其凋亡 ,感染 2 4h后 ,细胞凋亡数达 84.5 % ;He L a细胞凋亡伴随 p16蛋白的表达 ,2 4h达高峰 ,阳性率为 49.2 3± 1.70 .研究结果提示 ,B型流感病毒感染诱导 He L a细胞凋亡过程与 p16基因激活相关 ,p16蛋白可能是介导流感病毒诱导细胞凋亡的另一重要途径 .     

大蒜素对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响及机制

探讨大蒜素(DT)对人上皮性卵巢癌SKOV-3/DDP细胞的增殖抑制及诱导其细胞凋亡的分子机制。用人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:①正常对照组;②DT组:于培养基中加入DT(终浓度分别为5、10、20、40μg·mL-1)分别作用细胞24、48和72h;③顺铂(DDP)组(5μg·mL-1);④DT+DDP组(20μg·mL-1 DT和5μg·mL-1 DDP)。MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot分别检测基因bax、bcl-2的mRNA和蛋白表达。与正常对照组比较,DT组SKOV-3/DDP细胞增殖抑制率与凋亡率均有显著的增加(P0.05),且作用呈剂量和时间依赖性,Bax mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2mRNA和蛋白表达下调(P0.05);与DT或DDP组比较,DDP+DT组的细胞生长抑制率及凋亡率均有显著增加(P0.05),且Bax mRNA及蛋白表达上调,Bcl-2mRNA和蛋白表达下调的程度大于单用组(P0.05)。大蒜素对SKOV-3/DDP细胞有显著的抑制增殖和促凋亡的作用,增加SKOV-3/DDP细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与大蒜素调控Bax/Bcl-2蛋白表达有关。     

逆转录病毒载体导入重组ICAD和ICAD-DM对STS诱导大鼠C6细胞凋亡的影响

为了观察caspase依赖的脱氧核糖核酸酶(CAD)及其抑制剂ICAD对星形孢菌素(STS)诱导的C6细胞凋亡的影响,用含有ICAD/DFF45和caspase抗性的ICAD/DFF45突变体ICAD DM基因的复制缺陷型逆转录病毒载体转染包装细胞,并用产生的病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞株C6,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞.结果发现STS可显著诱导ICAD组的C6细胞出现DNA凋亡梯带,而ICAD DM组不出现DNA凋亡梯带;与ICAD DM组相比,STS对ICAD组MTT代谢的抑制作用更强(P<0.05);透射电镜观察显示ICAD DM组的细胞核形态改变弱于ICAD组.表明ICAD/DFF45的切割应在CAD/DFF40的激活中占主导地位,抑制ICAD/DFF45的切割并不能阻止凋亡的发生,但可延迟细胞死亡的速度,对染色质凝聚和核固缩的出现亦有一定抑制作用.     

黑色素对流感病毒诱导细胞凋亡的抑制效应

用荧光染色技术及流式细胞仪分析方法研究了 Ａ１／京防８６１ 和 Ｂ／沪防９３１ 两株流感病毒感染与细胞凋亡的关系,探讨利用嗜麦芽假单胞菌黑色素抑制流感病毒诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞凋亡的可能性 结果显示：黑色素在 １００ ｍ ｇ· Ｌ－ １ 浓度范围内,对 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞无细胞毒性; Ａ１／京防 ８６１ 和 Ｂ／沪防 ９３１ 两株流感病毒均可诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ细胞凋亡,但二者存在毒力差异（ｐ＜ ０．０５）病毒感染１２ ｈ 后,荧光染色可观察到典型的凋亡核形态,流式细胞仪则可检测到病毒诱导 Ｍ Ｄ Ｃ Ｋ 细胞产生的凋亡峰,且细胞凋亡率分别为３７．０２％ 和 ２７２９％ ;２０ ｍ ｇ· Ｌ－ １ 的黑色素可有效抑制两株流感病毒诱导细胞凋亡,使细胞凋亡指数从２５％ ～３５％ 降至３％ 以下 结果表明,黑色素可以抑制 Ａ 和 Ｂ型流感病毒诱导细胞凋亡     

温度和盐度对南移养殖刺参(Apostichopus japonicus)胚胎和幼体发育的影响

采用浙江省苍南县养殖海区人工越冬养殖、性腺成熟的刺参为材料,观察并描述了精卵排放至稚参的整个胚胎发育和幼体变态过程,温度和盐度对其胚胎和幼体发育的影响.结果表明,在水温21℃,盐度28.6‰,p H 8.0的条件下,整个胚胎发育过程需要31 h左右,变态发育至稚参需13~15 d.不同水温和盐度对受精卵的孵化率、胚胎发育和幼体的变态时间有显著影响.南移刺参胚胎和幼体发育适宜的水温范围为18~21℃,水温下降至15℃不能受精,适宜的盐度范围为28.6‰~32.4‰,盐度降低至20.5‰或升高至39.1‰,受精卵均不能正常发育.     

对浙江山地地貌发育的几点新认识

笔者经多年考察，认为浙江山地地貌中热带地貌遗迹显著，山区新构造运动主要表现为缓慢地抬升，沿海阶梯状斜坡主要是由于差异风化和剥蚀所造成。     

新疆双峰驼乳清蛋白组分对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用

目的:探讨新疆双峰驼乳清蛋白组分对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定新疆双峰驼乳蛋白组分对HeLa细胞增殖的抑制作用;荧光染色检测HeLa细胞凋亡的形态变化;倒置显微镜、扫描电镜和透射电镜观察HeLa细胞的形态变化;用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率、线粒体膜电位的变化.结果表明:新疆双峰驼乳清蛋白组分TR35可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡,并呈时间和剂量依赖性(P<0.01);倒置显微镜、扫描电镜和透射电镜观察到典型的凋亡特征,荧光显微观察到凋亡小体;Annexin-Ⅴ/PI双染检测出现早期凋亡细胞;线粒体膜电位去极化,并将细胞周期阻滞在S期.结论:新疆双峰驼乳清蛋白组分TR35可抑制HeLa细胞的增殖和诱导细胞凋亡,TR35组分诱导细胞凋亡的途径可能与线粒体通路有关.     

信号转导抑制剂对TNF β诱导L929细胞凋亡的研究

本文采用FDA-PI荧光染色,DNA电泳和流式细胞仪等实验手段研究了本实验室自行重组并纯化的人TNF β对L929细胞的细胞毒效应,结果表明TNF β主要是诱导L929细胞以凋亡的形式死亡。实验还采用8种信号转导抑制剂,观察它们对TNF β杀伤L929细胞的影响,以探讨细胞凋亡的信号转导途径。初步研究表明：磷脂酶A2,Ca2+通道、丝氨酸蛋白酶的抑制剂能抑制TNF β对L929细胞的杀伤,而且抑制剂的持续存在能更有效地发挥这一抑制作用;相反地,蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶的抑制剂可促进凋亡;而环加氧酶、磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂则对细胞凋亡不起作用。