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以鲱鱼精脱氧核糖核酸(Herring sperm DNA)为研究对象,利用紫外光(UV,200~275 nm,66.4 Lx)激发纳米TiO2发生光催化作用介导产生羟基自由基(Hydroxyl radical,.OH),探讨.OH引发DNA氧化损伤特性。采用凝胶电泳和高效液相色谱(HPLC)分析法跟踪DNA损伤历程;应用电子自旋共振(Electron spinresonance,ESR)及分光光度法跟踪损伤过程氧化物种及H2O2相对浓度的变化;运用生物标准样8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)为内标物,通过HPLC分析DNA损伤产物,研究DNA损伤机理。结果表明,较单纯UV辐照或暗光(Dark)催化条件,DNA浓度10 mg/L,TiO2浓度1.5 g/L、pH 7~8,紫外光激发纳米TiO2介导产生.OH引发DNA损伤程度最大;DNA损伤为.OH氧化历程,并伴随有深度氧化过程;DNA结构中鸟嘌呤最易氧化损伤,8-OHdG为DNA氧化损伤中间产物及鸟嘌呤氧化损伤的特异产物。 相似文献
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气相色谱/氢火焰检测器检测HL—60细胞DNA中氧化损伤产物8—羟基鸟嘌呤的 总被引:1,自引:1,他引:0
用0.4mmol/LH2O2处理HL-60细胞株24h,采用气相色谱/氢火焰检测器检测DNA氧化损伤产物8-羟基鸟嘌呤,并用气相色谱-质谱仪选择性离子检测对其进一步鉴定。所用方法的平均回收率为81.7%,RSD小于5%。 相似文献
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胶束毛细管电动色谱法用于DNA碱基腺嘌呤和嘌呤类抗癌药物的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
腺嘌呤(ADE)是存在于自然界的DNA碱基之一,8-羟基嘌呤(8-HP)是DNA中氧化损伤产物,6-巯基嘌呤(6-MCP)和8-氮杂鸟嘌呤(8-AZN)都属于核酸代谢拮抗药物,该药主要用于治疗急性白血病,对慢性颗粒细胞白血病及其它多种肿瘤也较有效,能在一个体系里同时检测正常DNA碱基、DNA中氧化损伤产物和抑制DNA损伤的抗癌药物, 相似文献
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以小牛胸腺DNA为对象, 在超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)存在下, 研究了纳米二氧化钛(TiO2)光催化对DNA损伤特性及SOD对TiO2光催化损伤DNA的影响. 采用凝胶电泳和高效液相色谱(HPLC)分析法, 探讨了DNA的损伤程度. 运用生物标准样8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2 -deoxyguanosine, 8-OHdG)为内标物并通过高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术(HPLC-ESI-MS/MS)对DNA损伤产物进行了跟踪分析, 采用过氧化物酶催化分光光度法及顺磁共振技术(ESR)跟踪测定TiO2光催化DNA损伤过程中H2O2和氧化物种的变化, 探讨了DNA氧化损伤机理. 结果表明, 在实验条件下紫外光照(UV, λ=200~275 nm), Dark/TiO2和UV/TiO2体系中, DNA氧化损伤程度为UV/TiO2>UV>Dark/TiO2. 光催化260 min DNA损伤99%, 反应动力学常数K=7.82×10-3 min-1. 抗氧化剂SOD具有清除光催化体系中超氧自由基( )的能力, 可以抑制DNA的损伤, 反应动力学常数K=2.27×10-3 min-1. 8-OHdG为DNA损伤中鸟嘌呤氧化的特异产物, UV及光催化体系对DNA损伤主要涉及 及羟基自由基(•OH)历程, 光催化体系对DNA损伤伴随有深度氧化(矿化)过程, 实验条件下12 h DNA矿化75.06%. 相似文献
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新型DNA电化学传感器的研制及其用于DNA氧化性损伤检测的研究 总被引:4,自引:1,他引:3
用溶胶-凝胶法在玻碳电极上制备了纳米多孔羟基磷灰石(HAp)-聚乙烯醇(PVA)涂层膜固定双链DNA,得到了一种新型DNA电化学传感器,检测了由Fenton反应引起的DNA氧化性损伤.结果表明,一定量浓度的抗坏血酸(AA)能加速Fenton反应的进行,使DNA损伤很快达到极限;损伤试剂中Fe2+的浓度越大,产生的羟基自由基(OH.)越多,对DNA的损伤就越严重;损伤试剂中EDTA的浓度越小,溶液中游离的Fe2+以及与DNA键合的Fe2+的浓度则相对越大,对DNA的损伤也就越严重. 相似文献
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高效液相色谱-电化学检测法测定脱氧核糖核酸分子氧化损伤标志物8-羟基脱氧鸟苷 总被引:9,自引:0,他引:9
采用螯合剂-Fe^2 -H2O2作为Fenton型反应的氧化源,与小牛胸腺脱氧核糖核酸反应生成8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG),建立脱氧核糖核酸(DNA)分子氧化损伤的体外反应模型,用高效液相色谱-电化学检测方法对8-OhdG进行定量。建立的方法灵敏度高,最低检出限30fmol,线性范围宽,从0.32pmol到3.2nmol,相关系数达0.9996,方法能够适用于生物体与细胞脱氧核酸分子低水平氧化损伤的检测。 相似文献
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3,7-二取代双环[3,3,1]壬烷衍生物具有许多有趣的反应特异性,可合成各种官能性金刚烷衍生物。本文以1-金刚烷醇为原料经二步反应合成7-亚甲基双环[3,3,1]壬烷-3-酮。再用催化量四氧化锇进行氧化几乎定量地得到7-羟甲基-7-羟基双环[3,3,1]壬烷-3-酮(9)。9用对甲苯磺酰氯处理得11,然后转换成1-羟基-4-原金刚烷酮(8)。根据光谱数据分析,(9)有一互变异构体(10),研究表明10的存在对合成8没有影响。预计8可以作为合成各种三取代金刚烷的原料。 相似文献