扁桃酸对映体光学纯度的柱前衍生化HPLC测定

建立了一种用高效液相色谱(HPLC)测定扁桃酸光学纯度的新方法。用苯胺将扁桃酸衍生化,产生相应的对映体衍生物,正己烷为流动相,乙醇和异丙醇作极性调节,用DNB-Leucine色谱柱进行分离。考察了流动相组成和柱温对其分离的影响,确定分析条件为:流动相为V(正己烷)∶V(乙醇)=85∶15,温度20℃,流速1.5 mL/min。在此条件下拆分扁桃酸衍生物对映体,达到基线分离,分析时间在7 min以内,分离因子达到1.62。与旋光仪方法的测定结果一致,两种方法测定的光学纯度偏差不超过1.96%。该方法可以准确、方便地测定扁桃酸的光学纯度。     

柱前衍生化高效液相色谱法准确测定2-氯丙酸的光学纯度

用1-萘胺对2-氯丙酸进行柱前衍生化,衍生化反应在30℃条件下进行10min或更长时间。选择ChiralcelOD-H色谱柱和正己烷-醇类为流动相,考察了流动相组成和柱温的变化对2-氯丙酸衍生物对映体拆分效果的影响。确定流动相为V(正己烷):V(甲醇):V(乙醇)=50:45:5,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长224nm为较优分析条件,分离因子2.5,8min内出峰。现有文献和试剂手册提供的2-氯丙酸的比旋光度标准值之间相差很大,在实际测量和计算中无准确标准可依。柱前衍生化结合手性固定相色谱方法灵敏度高,重现性好,操作较简单,可用于准确测量2-氯丙酸的光学纯度,并准确给出一定条件下2-氯丙酸的比旋光度和光学纯度的对应关系([α]D20-13.94(neat,d1.2547),e.e.97.9%)。     

手性试剂柱前衍生化高效液相色谱法测定α-苯乙胺的光学纯度

建立了一种简便的手性试剂柱前衍生化反相高效液相色谱测定α-苯乙胺光学纯度的方法。采用2,3,4,6-四-O-β-D-吡喃葡萄糖异氰酸酯(GITC)对α-苯乙胺进行衍生化,优化了衍生化反应参数;使用Agilent Zorbax C18色谱柱分离衍生化产物,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH 3.0)(体积比为58:42),流速1.0 mL/min,检测波长241 nm,柱温为30 ℃。实验结果表明,α-苯乙胺两个对映体的衍生化产物分离良好,在0.15～15.0 mg/L范围内呈现良好的线性关系。方法的检出限为0.05 mg/L,定量限为0.15 mg/L,日内和日间精密度考察中测定值的相对标准偏差(RSD)均小于0.5%。建立的方法适用于α-苯乙胺的质量控制。     

柱前衍生高效液相色谱法测定NTCA的光学纯度

用1-萘胺对乙酰四氢噻唑-2-硫酮-4-羧酸进行柱前衍生,产生非对映体衍生物.以正己烷和乙醇或异丙醇为流动相,选择Chiralcel OD-H色谱柱上对NTCA衍生物进行了拆分,考察了流动相组成和柱温对其衍生物分离的影响,获得较好的分析条件,分离因子达到1.3.该结果进一步与旋光仪法相比较,相对偏差不超过1.9%.     

柱前衍生化-HPLC测定仲丁胺对映体的纯度

用3, 5-二硝基苯甲酸对仲丁胺进行柱前衍生, 将其衍生物在CHIRALCEL OD-H手性固定相上拆分, 并通过二极管阵列紫外检测器对其衍生物进行检测, 建立了一种拆分仲丁胺消旋体、测定仲丁胺光学纯度的新方法. 以正己烷和乙醇或异丙醇为流动相, 在CHIRALCEL OD-H手性固定相上对仲丁胺衍生物进行了拆分, 并考察了流动相组成和柱温对该对映体衍生物分离的影响, 获得较好的分析条件, 分离因子大于1.2. 非手性试剂柱前衍生化法测定仲丁胺光学纯度与旋光度方法比较, 结果一致. 方法可用于仲丁胺对映体的质量控制.     

高效液相色谱柱前衍生化法测定牛磺酸含量

高效液相色谱柱前衍生化法测定牛磺酸含量谢继红,陈玉仁,唐少珍（大连市医药科学研究所大连ｌ１６０１３）１前言牛磺酸又称牛胆硷（Ｔａｕｒｉｎｅ）,其化学名为２－氨基乙磺酸,普遍存在于动物体内,特别是海洋生物体内,据文献报道￣［１－３］,牛磺酸以游离形式存...     

高效液相色谱法测定米根霉乳酸发酵液中乳酸的光学纯度

 以 2 ,3,6 三甲基 β 环糊精作手性流动相添加剂 ,C18柱为固定相 ,考察了流动相的pH和手性流动相添加剂浓度对乳酸对映体分离度的影响 ,建立了DL 乳酸的拆分定量分析方法。用归一化法分析DL 乳酸时引入了定量校正因子 ,确定了外标法测定L 乳酸的回归方程、精密度和回收率。测定了米根霉L 乳酸发酵液中D 型异构体的质量分数及其随放置时间的变化情况。     

柱前衍生高效液相色谱法测定四氢噻唑-2-硫酮-4-羧酸的光学纯度

用苯胺对四氢噻唑-2-硫酮-4-羧酸(TTCA)进行柱前衍生,将其衍生物在手性固定相上拆分,通过二极管阵列紫外检测器和在线旋光检测仪对其衍生物进行检测,建立了一种拆分TTCA消旋体、测定TTCA光学纯度的新方法。以正己烷和乙醇或异丙醇为流动相,在DNB-Leucine手性固定相上对TTCA衍生物进行了拆分,并考察了流动相组成和柱温对其衍生物分离的影响,获得较优分析条件,分离因子大于1.2。非手性试剂苯胺柱前衍生化法测定(R)-TTCA的光学纯度与旋光度方法比较,结果一致,相对偏差小于1.34%。     

甲壳素纯度的高效液相色谱法测定

由于生物材料中甲壳素或壳聚糖是大分子，不溶于水，以及与蛋白质等结合在一起而难以定量测定，工业生产中尚无甲壳素或壳聚糖纯度的标准测定方法；采用甲壳素水解生成氨基葡萄糖，再用氯甲酸芴甲酯(FMOC—C1)进行衍生，利用液相色谱技术对衍生产物进行分析；结果表明，HPLC法是生物材料中甲壳素的一种灵敏的、特有的定性定量分析方法，为生物材料及工业化生产中甲壳素纯度的测定提供了一个方便的手段。     

柱前衍生化高效液相色谱法分析多糖中的单糖组成

报道了多糖中单糖组成的柱前衍生化高效液相色谱测定方法。采用反向高效液相色谱250nm紫外检测和使用梯度洗脱，6种还原单糖的1－苯基－3－甲基－5－吡唑啉酮衍生实现了良好的分离并具有良好的峰形。对单糖组成的定量测定进行了方法学考察，建立了单糖组成分析的数据分析方法，并用所建立方法对一个多糖中的单糖组成进行了分析，获得良好的重复性。     

Direct determination of enantiomeric purity of FMOC amino acids with high performance liquid chromatography

Summary Analytical methods are described which allow a direct determination of enantiomeric purity of seventeen FMOC amino acids commonly used in peptide synthesis. The corresponding ester derivatives can be separated directly on cellulose tris(3,5-dimethylphenylcarbamate) (Chiralcel-OD). The methods are suitable for primary as well as secondary FMOC amino acids. The presence of a highly sensitive fluorescence moiety within the molecule, in combination with large separation factors (-values between 1.5–2.2) allowed for a general detection limit below 0.05%. In several cases the antipode has been determined in the ppm-range. An interesting result has been observed with respect to the elution order of the FMOC amino acid esters. The elution order of the Trp enantiomers is opposite to that obtained with the other amino acids. This is contrary to the generally held belief that elution order is identical within a homologous series of racemates when chromatographed under identical conditions on the same chiral stationary phase. In addition, the inversion of elution of the Pro enantiomers depending on the estertype indicates a competition of different separation mechanisms.     

柱前衍生化高效液相色谱手性固定相法拆分手性氰醇

利用正相高效液相色谱法在多糖衍生物手性固定相(OJ-H、OD-H、AD-H或AS-H)上成功地分离了一系列(31个)氰醇对映体的乙酰化或丙酰化衍生物,并拆分了3个脂肪族氰醇对映体的乙酰化衍生物。探讨了这些外消旋体在这四支手性柱上的色谱行为,通过考察流动相组成、流速、进样浓度和温度等因素对对映体拆分效果的影响,优化了色谱分离条件。方法已应用于脂肪酶催化转酯化拆分反应中手性氰醇衍生物的光学纯度的鉴定。     

高效液相色谱法测定烟火药剂中的没食子酸

建立了烟火药剂中没食子酸的高效液相色谱检测方法。采用ZorbaxEclipse XDB-C18色谱柱(4.6×150 mm)分离,以甲醇-0.1%冰乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min;测定温度为25℃;采用紫外检测器检测,检测波长为274 nm。没食子酸的质量浓度在0.5~20μg/mL时与色谱峰面积之间线性关系良好(相关系数r=0.9999);对烟火药剂样品进行3个不同浓度水平的添加回收,回收率为90.8%~100.2%,相对标准偏差(RSD)为1.2%~6.4%。     

高效液相色谱法测定胭脂红酸的研究

研究了以反相C18柱,V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(pH 2.8 H3PO4)=12∶8∶80混合溶液为流动相,对胭脂红酸进行高效液相色谱分析的方法。胭脂红酸在2.5~40μg/mL范围内的吸光度线性相关系数达0.9998,方法回收率在98.2%~101.1%,相对标准偏差为0.78%~1.2%,已用于样品中胭脂红酸的测定。     

高效液相色谱法分离和测定酒石酸和马来酸

１引言 酒石酸（２,３一二羟基丁二酸）和马来酸（顺丁烯二酸）都是重要的有机化工原料,它们被广泛地应用于有机合成和其它化工生产领域［１］． 酒石酸的制备常用钨酸作为催化剂,由马来酸识水溶液与过氧化氢进行环氧化反应再经水解精制而成,其中常含有微量的没有反应的马来酸,因此,建立有效的分离和测定酒石酸和马来酸的方法,对于酒石酸生产条件的选择与控制,以及产品的质量检测等都有十分重要的意义． 目前尚未发现有关同时分离和测定酒石酸和马来酸的文献报道．我们首次采用反相高效液相色谱法,跟踪监测了酒石酸生产过程中的物…     

磺丁基醚-β-环糊精手性流动相添加剂法分离兰索拉唑对映体

采用磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)为手性流动相添加剂,建立了兰索拉唑对映体的高效液相色谱分离分析方法.对影响兰索拉唑对映体分离的主要因素:环糊精种类和浓度、缓冲溶液pH以及有机改性剂种类和含量进行考察.确定最优色谱条件:色谱柱为Spherigel C18 (150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为V(乙腈):V(水相)=20:80(水相含10 mmol/L SBE-β-CD、 10 mmol/L NaH2PO4缓冲液、 pH 2.5),流速为0.9 mL/min,检测波长为288 nm.在此条件下,兰索拉唑对映体的保留时间分别为14.4和15.8 min,分离度为2.0.两对映体质量浓度在0.2～50 μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9996),保留时间的RSD分别为0.27%和0.26%,峰面积的RSD分别为0.65%和0.68%.     

柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸

建立了一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法用于测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy)。使用三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)为还原剂,N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)为衍生剂进行样品预处理,Agilent Hypersil C-18柱(250 mm×4.0 mm, 5 μm)进行分离,流动相为15 mmol/L醋酸钠-乙腈-混合酸(300 mL水中含1 mL醋酸和1 mL磷酸)混合溶液,采用梯度洗脱,荧光检测激发波长为330 nm,发射波长为380 nm。Hcy的回收率为(102.08±4.94)%。线性范围为0.500～100 μmol/L,检出限（以信噪比为3计）为0.016 μmol/L。日内与日间相对标准偏差均小于5%。利用该方法对7例高血压患者和7例健康志愿者的血浆进行了测定,结果表明两组间的Hcy含量存在显著的差异(p＜0.05)。本方法简单、快速、灵敏、特异,适用于血浆Hcy的临床定量测定。     

双水杨醛邻苯二胺柱前衍生-高效液相色谱法测定茶叶中的Pb~(2+)

建立了利用双水杨醛邻苯二胺希夫碱(SALOPHEN)作为衍生剂结合高效液相色谱(HPLC)测定茶叶中Pb~(2+)含量的方法。Hypersil ODS2 C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,甲醇-水(80∶20,v/v)为流动相,检测波长为226 nm,反应体系pH为10.0。结果表明,样品中Pb~(2+)的线性范围为0.1~30 mg/L,线性相关系数为0.998 8,检出限为0.01 mg/L,加标回收率为91.87%~96.96%。该方法具有较高的灵敏度和稳定性,适用于茶叶中Pb~(2+)的检测。     

Determination of the enantiomeric purity of oxfenicine by high-performance liquid chromatography

Summary Reaction of the methyl esters of the -amino acids, R-(–)-, and S-(+)-4-hydroxyphenylglycine (oxfenicine) with the enantiomerically pure acid anhydride of R-(+)-1-methoxy-1-trifluoromethyl-phenylacetic acid (i.e. R-(+)-MTPA) yields diastereoisomeric amides which are separable by high-performance liquid chromatography (HPLC). The ratios of the diastereoisomeric amides may be measured chromatographically and are shown to correspond to the enantiomeric purities of the amino acids. This method is particularly well suited for detecting low levels of an enantiomeric impurity in -amino acids which possess a base labile -methine hydrogen atom.