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谷氨酸脱羧酶在新型羧甲基化交联烯丙基葡聚糖凝胶树脂上的 … 总被引:1,自引:0,他引:1
本文首次用合成的羧甲基化的以N,N’-甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖(简称CM-CADB)凝胶生化树脂为新型载体,研究了谷氨酸脱羧酸在CM-CADB树脂上的固定化与环境的信赖关系。确定了酶固定化最佳条件:缓冲体系为pH4.4,0.10mol/L磷酸氢二钠-0.05mol/L柠檬酸,载体为交联度35%,交换容量3.0meq/g的CM-CADB凝胶树脂,吸附平衡时间4h以上,酶用量为30.0mg/g 相似文献
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壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究 总被引:14,自引:0,他引:14
以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用两种方法制备了固定化胰蛋白酶。考察了固定化反应中pH值,戊二醛的浓度,以及给酶量对固定化胰蛋白酶活力的影响,并研究了这两种固定化胰蛋白酶的性质。实验结果表明,以戊二醛预交联的网状壳聚糖为载体制备的固定化胰蛋白酶具有更加优良的性能,在最佳固定化反应条件下,酶的活性加收率可达56%。此固定化胰蛋白酶的最适pH为7.0-8.5,最适温度为60℃,Km值为2.52mol/L,固定化胰蛋白酶表现出较好的热稳定性,pH贮存稳定性,以及在乙醇水溶液中的稳定性。 相似文献
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青霉素酰化酶在甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物上的固定化 总被引:6,自引:0,他引:6
用共价键合法将青霉素酰化酶固定化在珠状多孔的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GM)共聚物上,研究了固定化反应时间、温度、pH值和酶液用量对固定化青霉素酰化酶的表观活性、表观偶联效率、活性回收及稳定性的影响.将GM共聚物载体加入到磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH10.8)与青霉素酰化酶液(每克干载体用酶液1ml)的混合溶液中,在30℃下反应72h,单位质量(干重)固定化酶的表观活性为348U/g,表观偶联效率为66.7%,活性回收为31.7%. 相似文献
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甲醛活化壳聚糖制备固定化l—天冬酰胺酶 总被引:12,自引:0,他引:12
研究了以甲醛活化的壳聚糖为载体固定化l-天冬酰胺酶,其活力回收可达到113%,比用以戊二醛为交联剂进行固定化的活力回收要高出五倍多。分别从缓冲液的pH值及甲醛用量等方面进行了固定化l-天冬酰胺酶的条件优化,并且对固定化酶的性质作了探讨。 相似文献
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本文以苯氨基磺酸型多孔聚苯乙烯为载体,重氮化活化其苯氨基与糖化酶上的氨基反应。在固定化酶过程中,随反应时间的延长,不但固定化酶总活力增加,而且其比活和热稳定性也随之升高,最终可得活力为20000U/g干胶,比活为500的高活力固定化酶,该固定化酶在pH4.5,60℃无底物下保温,其半寿期是天然酶的5倍。以麦芽糖,糊精(分子量为1500)和可溶性淀粉为底物测定该固定化酶活力表明:对某种孔度一定的载体 相似文献
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固定化根霉细胞催化拆分(R,S)-环氧丙醇丁酸酯的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用聚乙烯醇包埋、硫酸钠固定法对根霉( Rhizopussp.Bc0-09)菌体细胞进行了固定化,所得凝胶具有良好的机械性和稳定性. 对固定化细胞催化( R,S)-环氧丙醇丁酸酯水解反应的性能进行了研究. 对pH值的影响考察结果表明, 30 ℃下, 反应初速度在pH 值为5.5 时最大; 酶的立体选择性在pH值为5.5~6.0 时最高, 对映体比率( E值)为57. 对温度的影响考察结果表明,pH 值为5.5, 反应初速度在55 ℃时最大; 酶的立体选择性随温度升高而下降. 固定化细胞具有较好的操作稳定性. 相似文献
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聚丙烯酰胺固定化糖化酶特性的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究以丙烯酰胺单体通过反向悬浮聚合技术合成聚丙烯酰胺作为载体材料,采用包埋—交联法固定化葡萄糖淀粉酶,并对其特性进行了研究.结果表明,该固定化酶最适pH值为5.0,最适温度为55~58℃,而且具有较好的贮存稳定性和操作稳定性,8个月后该固定化酶的残余活力仍保持在94%左右,可重复使用43批次,此固定化酶酶活回收率达到56%.实验表明丙烯酰胺悬浮聚合固定化糖化酶的方法是简便可行的. 相似文献
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以氨丙基多孔球为载体,戊二醛为交联剂制得固定化α-胰凝乳蛋白酶。其含酶量为3.6mg/g,米氏常数Km=1.2×10^-3mol/L,最适宜温度为35℃,pH值为7.0,对热、酸碱、甲醇以及尿素的稳定性有较大提高,Ca^2+激活效应明显。用该固定化酶连续拆分DL-苯丙氨酸制备L-苯丙氨酸时,拆分产率高于90%,产品纯度超过96%;连续使用2个月后仍能保持较高酶活力。 相似文献
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用羧甲基化的N,N’-甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡萄糖(简称CM-CADB)凝胶树脂为新型载体,研究了谷氨酸脱羧酶(GDC)在CM-CADB上的固定化与环境的依赖头等确定了酶固定化最佳条件,研究了固定化GDC的性状与底物浓度,pH温度的依存性,动态响应特性,热稳定性的寿命,求算了米氏常数。将固定化GDC酶柱与进样系统具CO2气敏电极的离子活度分析器-计算机数据采集系统匹配,构成酶反应谷氨酸检测装置 相似文献
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聚乙烯-葡萄糖氧化酶膜的制备和性能研究朱如瑾,殷弘浩,刘永盛,黄家湛(成都高分子材料国家重点实验室成都科技大学高分子研究所成都610065)关键词聚乙烯,等离子体,固定化酶,葡萄糖氧化酶固定化酶是60年代发展起来的生物工程技术I‘].酶的固定化方法主... 相似文献
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本文用共沉淀法制备了平均直径为384纳米的α,ω-二羧基聚乙二醇磁性毫微粒,碱性蛋白酶通过吸附交联法被固定于磁性毫微粒,研究了制备研究中的吸附时间,给酶量,戊二醛浓度,pH和离子强度对磁性固定化酶活力及酶固定化率的影响。比较了碱性蛋白酶磁性固定化酶与自由酶的酶学性质,磁性固定化酶的最适温度没有改变,但热稳定性显著使高;磁性固定化酶的最适pH向酸性方向移动了1.0个pH单位。 相似文献
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以二乙烯苯和双丙烯酸多缩乙二醇酯为交联剂、聚醋酸乙烯酯(PVAc)或它与醋酸丁酯(BAC)的混合物为致孔剂、BPO为引发剂,用悬浮聚合随后水解的方法制得了部分水解聚(丙烯酸甲酯-醋酸乙烯酯-甲基丙烯酸甲酯)[HP(MA-VAc-MMA)]多孔载体,研究了PVAc及(PVAc+BAC)用量、分子量及混合比对HP(MA-VAc-MMA)孔结构的影响。结果表明,当PVAc的M>2.5×105,PVAc/BAC为2.3,用量为10~20%时,可制得孔隙率较高,孔径分布较窄,孔表面积较大的多孔载体。这种载体适用于微生物固定化。 相似文献
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纳米颗粒增强的葡萄糖生物传感器 总被引:36,自引:1,他引:35
研制的纳米增强葡萄糖传感器是用纳米憎水Au颗粒。亲水Au颗粒、憎水SiO_2颗粒以及Au和-SiO_2颗粒混合与聚乙烯醇缩丁醛(PVB)构成复合固酶膜基质,用溶胶-凝胶法固定葡萄糖氧化酶(GOD),组成葡萄糖生物传感器.实验表明,纳米颗粒可以大幅度提高固定化酶的催化活性,响应电流从相应浓度的几十纳安增强到几千纳安,电极响应迅速, 1min达到稳态,探讨了纳米颗粒效应在固定化酶中所起的作用,开辟了制备直接电子传递第三代生物传感器的新途径和纳米颗粒应用的新领域。 相似文献
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聚苯乙烯阴离子交换树脂固定α—淀粉酶的研究(Ⅱ) 总被引:3,自引:0,他引:3
用聚苯乙烯阴离子交换树脂作载体,采用吸附法将a一淀粉酶固定化,研究了固定化条件和固定化酶的性能。固定化条件为:酶浓度10mg/ml,固定化pH6.8,吸附时间16h,吸附温度6℃。固定化酶的pH稳定性、热稳定性、贮存稳定性都有一定的提高。最适作用温度及PH较自由酶为高,Km值为自由酶的1.6倍。同时也进行了固定化酶的操作稳定性研究。 相似文献
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有机溶剂中脂肪酶催化的2—辛醇动力学拆分 总被引:9,自引:0,他引:9
利用有机溶剂中假单胞菌脂肪酶催化的对映选择性酯化反应,对外消旋(R,S)-2-辛醇进行了光学拆分。分别考察了冻干时酶缓冲液的pH值和浓度以及2-辛醇酯化的酰基给体(脂肪酸),有机溶剂,反应温度等因素对脂及酶催化性能的影响。结果表明,冻干时酶缓冲液的pH值和浓度对酶的活力影响很大,而对选择性影响较小。以pH值为8.3,浓度为20mmol/L的磷酸盐缓冲液最为适合。 相似文献