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用反相高效液相色谱法纯化白细胞介素-2条件初探胡明(沈阳军区军事医学研究所沈阳110031)关键词反相高效液相色谱法,白细胞介素-21前言高效液相色谱法(HPLC)是一项分辨率很高的液相色谱技术,具有速度快,灵敏度高、样品可回收等优点。除被广泛地应用... 相似文献
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探索了大规模生产制备基因工程白细胞介素-2(rIL-2)的新工艺,采用等度和线性梯度相结合的方法,用大型反相高效液相制备色谱法分离提纯rIL-2,并用电泳仪等测量了提纯物的纯度,结果表明:用新方法制备的rIL-2纯度大于95%,冻干后成品比活大于10~(10)IU/g,且上样量大,在实际生产中应用价值很高。 相似文献
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探索了大规模生产制备基因工程白细胞介素-2(rIL-2)的新工艺,采用等度和线性梯度相结合的方法,用大型反相高效液相制备色谱法分离提纯rIL-2,并用电泳仪等测量了提纯物的纯度,结果表明:用新方法制备的rIL-2纯度大于95%,冻干后成品比活大于10~(10)IU/g,且上样量大,在实际生产中应用价值很高。 相似文献
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1 引言高效亲和液相色谱(HPAC)是将经典亲和色谱的高特异性同高效液相色谱的快速、高效相结合产生的一种蛋白质的分离技术.它使经典亲和色谱原来需要几个小时才能完成的纯化工作缩短为十几分钟或更短,而且纯化倍数高,分离效果好.因此,HPAC在近年基因重组蛋白质的纯化方面得到了广泛的应用.基因重组人白细胞介素-2(rhIL-2)是生物体内具有重要生物学功能的细胞因子,目前已成功地进行了基因表达.本文以自制的rhIL-2单克隆抗体(McAb)的HPAC填料纯化了大肠杆菌(E.coli)表达的rhIL-2. 相似文献
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采用反相高效液相色谱法测定阿莫西林并对测定条件及有关参数进行了试验.用Shim-Pack VP-ODS柱作色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 5.0)及乙醇以90比10的混合液为流动相,流速为1.0 mL·min-1,在228nm波长处测定阿莫西林的含量,其线性范围为0.045~0.60 g·L-1,相关系数为0.9974.将方法应用于阿莫西林胶囊的测定,测定结果的相对标准偏差值小于0.6%,用标准加入法作回收试验,回收率结果在94.7%~101.3%之间. 相似文献
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聚合物型苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)微球装填的麦科菲反相高效液相色谱柱(MKF-RP-HPLC),用于白细胞介素-2(IL-2)分离的最佳色谱条件:流动相A:0.1%三氟乙酸,流动相B:80%乙腈 0.1%三氟乙酸.B液在30 min内从0%线性增大至100%,流速1.0 mL/min;检测波长:280 nm.在该色谱条件下进行系统性实验,结果表明:MKF-RP色谱柱分离IL-2的柱效、分离度、重复性和拖尾因子均能达到药典要求,且柱效和分离度与SOURCE色谱柱相当;MKF-RP色谱柱的pH适用范围为1~14;柱压与SOURCE色谱柱相当,且低于Hypersil C8色谱柱和Polaris C18色谱柱的柱压,可在更高流速下操作;MKF-RP色谱柱的非极性与SOURCE色谱柱相当;MKF-RP色谱柱的超载性能优于SOURCE色谱柱,其对IL-2进样液的最大载样量为300 μg. 相似文献
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有机酸类化合物的反相高效液相色谱法的分离条件研究 总被引:53,自引:6,他引:53
研究了在用RP HPLC法测定有机酸时如何对流动相的酸度进行控制 ,给出了流动相最佳pH的选择通式 :色谱柱允许的最低 pH值≤pH≤pKa- 2 ;研究了流动相中甲醇、乙腈存在时对此通式的影响。用研究得出的结论选择了测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸和丙二酸、丁二酸、戊二酸、己二酸时的色谱条件 ,并且研究了每种酸在各自浓度范围内测定的线性关系、回归方程、相关系数以及相对标准偏差。实验显示 ,在选定的色谱条件下进行分析测试时 ,各种酸的线性相关系数r >0 9995 ,相对标准偏差RSD <0 90 %。 相似文献
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建立了反相高效液相色谱法测定饮料中苯甲醛的方法。当苯甲醛的质量浓度在1.0~100.0 mg·L-1范围时,苯甲醛的浓度与色谱峰面积呈线性关系,线性相关系数为0.999 8。苯甲醛的回收率为99.3%-102.6%,相对标准偏差为2.0%~3.4%,方法的检出限为0.1 mg·kg-1。 相似文献
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建立了反相高效液相色谱法测定发用防晒剂二甲基对胺基苯甲酰胺丙基十二烷基二甲胺甲苯磺酸盐(简称DDABDT)的方法.采用的色谱条件为色谱柱Symmetry C8柱,流动相为V(乙腈):V(10 mmol/L NaAc)=65:35溶液(含体积分数0.02%三氟乙酸,pH5.04),流速1.0 mL/min;检测波长305 nm;进样量20μL.DDABDT质量浓度为0.05~1000 mg/L时,其浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2>0.999),检出限为0.02 mg/L(S/N=3).洗发水A中DDABDT的回收率在98.0%~102%之间,发样提取液中DDABDT的平均回收率在85%~108%之间.洗发水中DDABDT浓度测定日内和日间相对标准分别为1.2%,3.4%.头发吸附DDABDT含量测定日内和日间相对标准偏差(RSD)分别为9.1%,9.8%.同时以高效液相色谱-电喷雾离子化质谱对色谱法测定样品的DDABDT峰进行了验证.该方法已用于洗发水及头发吸附DDABDT的分析. 相似文献
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杨华梅 《理化检验(化学分册)》2013,(2):168-169,173
提出了反相高效液相色谱法测定游泳池水中尿素的含量。采用Waters Atlantis T3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以水为流动相洗脱,用二极管阵列检测器在波长195 nm处进行检测。结果表明:尿素的质量浓度在0.5~100 mg·L-1范围内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.2 mg·L-1。方法用于水样分析,加标回收率在94.1%~97.5%之间,相对标准偏差(n=6)为0.64%。 相似文献
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提出了用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分离和测定胶囊、油状试剂中维生素D2及维生素D3的含量。样品用甲醇超声提取,提取液用甲醇定容至100mL,经0.45μm滤膜过滤后供HPLC分析。采用Zorbax SB-C18反相色谱柱及C18保护柱作为分离柱,乙腈作为流动相,流量为1.0mL.min-1,在波长265nm处作紫外检测,进样量为20μL。维生素D2和维生素D3的质量浓度在0.50~20mg.L-1范围内与相应的峰面积呈线性关系,测得检出限(3S/N)依次为0.030,0.026mg.L-1。此方法应用于实样分析并在此基础用标准加入法做回收试验,同时进行精密度试验,测得回收率在95.0%~99.4%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.2%~2.6%之间。 相似文献