高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中游离和结合型胆汁酸

建立了高效液相色谱-串联质谱同时测定血清中游离和结合型胆汁酸的方法。血清样品经固相萃取后,在C18色谱柱上梯度洗脱,用负离子多反应监测模式检测。15种胆汁酸在0.10~100.0μmol/L的浓度范围内与响应呈良好的线性,r为0.9990~0.9999;检出限为0.001~0.006μmol/L;本方法的相对标准偏差日内不超过3.0%,日间不超过6.0%;平均回收率为86.0%~110.0%,适合于临床检测血清胆汁酸。     

反相高效液相色谱法测定鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸

建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测大鼠胆汁中游离与结合型胆汁酸的方法.以4-溴甲基-7-甲氧基香豆素为衍生剂,月桂酸为內标,Waters Nova C18色谱柱分离,采用甲醇/乙腈和水梯度洗脱,荧光激发波长(λex)330 nm,发射波长(λem)400 nm,內标标准曲线法定量.各胆汁酸在5-2 400μmol/L范围内线性良好,r为0.998 9-0.999 7.最低检出限为1.2-2.5μmol/L.精密度日内在1.05%-3.67%之间,日间在3.16%-6.83%之间.平均回收率为87.8%-106.7%.该方法灵敏、重复性好,分析时间短,线性范围宽,适合于科研工作中对鼠胆汁中各胆汁酸进行定量检测.     

高效液相色谱法固相酶检测系统测定人体液结合型胆汁酸的研究

人体液中胆汁酸水平异常能灵敏地反映出消化系统病变。胆汁酸测定对于肝、胆病变诊断、治疗及基础医学研究有重要价值。 本法用反相色谱分离胆汁酸,柱后串接3α-羟基类固醇脱氢酶(3α-HSD)固相酶柱,胆汁酸在酶催化下,将底物辅酶Ⅰ(NAD)定量转换成NADH,荧光检测NADH,从而定量测定胆汁酸。方法特异性强,灵敏度高,样品处理简便,分析速度快。该法国外已有报道,国内尚未见。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定血清中9种胆汁酸

建立了一种柱前衍生反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定血清中9种胆汁酸的方法。以4-溴甲基-7-甲氧基香豆素(BMC)为衍生剂,用Waters Nova C18色谱柱分离,采用甲醇／乙腈和水梯度洗脱,荧光检测,9种胆汁酸在5～40μmol／L范围内具有良好线性,r为0．9988～0．9998。回收率为85．40％～100．45％,检出限为1～2μmol／L。该法灵敏、特效、重复性好,可用于临床血清中微量胆汁酸的测定。     

高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定分析血清中胆汁酸

利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基苯磺酸酯(BDEBS)作柱前衍生化试剂,在EclipseXDB-C8色谱柱上,采用梯度洗脱对10种胆汁酸(BAs)荧光衍生物进行了优化分离。95℃下在二甲基亚砜(DMSO)溶剂中以柠檬酸钾作催化剂,衍生反应35min后获得稳定的荧光产物,衍生反应完全。荧光激发和发射波长分别为λex=333nm,λem=390nm。采用大气压化学电离源(APCISource)正离子模式,实现了血清中胆汁酸的定性测定。分析物的定量测定采用荧光法进行。线性回归系数均在0.9996以上,检出限为22.36~44.57×10-15mol。     

血清中胆汁酸的高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定

在Hypersil C18色谱柱上，利用新型荧光试剂1，2-苯并-3，4-二氢咔唑-9-乙基对甲苯磺酸酯（BDETS）作柱前衍生化试剂，采用梯度洗脱对10种胆汁酸（BAs）荧光衍生物进行了优化分离。95℃下在二甲基亚砜溶剂中以柠檬酸钾作催化剂，衍生反应30min后获得稳定的荧光产物，衍生反应完全。激发和发射波长分别为λex=333nm，λem=390nm。采用大气压化学电离源（APCI）正离子模式，实现了血清中胆汁酸的定性和定量测定。线性回归系数均在0.9996以上，线性范围宽，检出限为12．94—21．94fmol。     

培植牛黄与天然牛黄中游离和结合胆汁酸含量的测定和比较

用薄层光密度法测定了十个生产单位的18批培植牛黄的游离和结合胆汁酸的含量,并与天然牛黄及牛胆粉比较,结果表明,培植牛黄含有与天然牛黄相同的胆汁酸成分,其中培植牛黄的游离胆汁酸比天然牛黄略高,结合胆汁酸含量多数样品与天然牛黄相当,总胆汁酸含量多数样品比天然牛黄略高。     

交联键合型聚丙烯酰胺毛细管电泳涂层柱的快速制备及评价

建立了一种简单快速制备交联键合聚丙烯酰胺涂层毛细管电泳柱的方法。在这一方法中,未经处理的毛细管柱直接用含有一定比例的丙烯酰胺、交联剂甲叉基双丙烯酰胺、硅烷化试剂乙烯基三乙氧基硅氧烷以及引发剂偶氮二异丁氰的丙酮溶液进行动态涂渍,再经热处理使单体的交联和聚合物在毛细管壁上的键合反应同时发生。所制柱能够有效地抑制电渗流和蛋白质在毛细管壁上的吸附。碱性蛋白在ｐＨ４．０的缓冲液中分离时,获得的平均分离柱效为     

褶合曲线分析法同时测定血清中镁和钙

应用计算机辅助褶合曲线分析法和计算机信息处理技术 ,无需分离和掩蔽 ,同时测定了血清中的镁与钙。血清中镁和钙的平均加标回收率和相对标准偏差 (n=5 )分别为 99.0 7% ,2 .32 %和 98.33% ,2 .5 8%     

纤维素键合型手性整体柱的制备及其在快速手性分离中的应用

采用N-丙烯酰琥珀酰亚胺(NAS)为基质单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,原位聚合制备聚(NAS-co-EDMA)毛细管整体柱,并通过化学键合法将自合成的纤维素-三(4-甲基苯甲酸酯)(CTMB)共价键合到整体柱上,制备用于快速手性分离的纤维素键合型手性整体柱.优化了整体柱制备和衍生化条件;通过对固定相红...     

柱前衍生-高效液相色谱法测定大熊猫血清中18种游离氨基酸

建立了大熊猫血清中18种游离氨基酸的反相高效液相色谱分析方法.血清样品经HPO3沉淀蛋白后,在弱碱性条件(pH 9.0)下游离氨基酸与2,4-二硝基氯苯在90℃水浴中避光反应1.5 h,生成具有紫外吸收的衍生物,用反相C18柱分离,紫外检测器检测,内标法定量.18种氨基酸的工作曲线的相关系数范围为0.9951～0.9999;相对标准偏差为1.4%～4.7%;检出限为0.20～7.72μg/mL;加标回收率为65.9%～118%.     

采用带微型预处理柱和分离柱的FIA分光光度系统同时测定硅和磷

用阳阴离子交换柱和流动注射分析组合,建立了在线预处理和预分离同时测定磷和硅的FIA方法。用本法测定了头发、淡菜、茶叶、马尾藻和大米中的硅和磷。方法的测定范围为1．0mg/L-24mg/L(PL4^3-),0.5mg/L-12mg/L(SiO3^2-),回收率：96.7%-99.0%(PO4^3-),100%-102%(SiO3^2-);RSD(PO4^3-)=1.3%,RSD(SiO3^2-)=1.8%。     

无机阴离子在涂敷十六烷基吡啶的C18键合相柱上的分离和测定

近年来,离子相互作用色谱法得到了迅速发展,使用这种方法,不仅可用有机树脂作固定相,同样可使用高效的键合固定相,并且可以通过改变离子相互作用,试剂在流动相中的浓度或涂敷在固定相上的量来改变柱的交换容量。实验使用常规的液相色谱仪,易于方法的广泛应用。在无机阴离子的分离中,这一方法显示了优越的分离效率。 本文研究了在涂敷十六烷基吡啶的C_8键合固定相上分离无机阴离子,并利用一些无机阴离子在     

微型HPLC-固定化酶柱后反应器-电化学检测法测定血清和全血中的葡萄糖

提出了用Ni(Ⅱ)处理10μm强酸型阳离子交换剂Partisil-10SCX再吸附葡萄糖氧化酶以制备固定化酶的新方法。酶的吸附和固定化酶的活性较一般的物理吸附有明显的改善。由此制得的固定化酶柱后反应器接入微型高效液相色谱-电化学检测体系进行了血清和全血中葡萄糖含量的测定,并实现了葡萄糖和尿酸的同时检测。     

柱前荧光衍生-高效液相色谱法测定尿和血清中的环境雌激素

建立了同时测定人尿和血清中环境雌激素双酚A、4-壬基酚、17α-乙炔基雌二醇及内源性雌激素雌三醇、17α-雌二醇和17β-雌二醇的对硝基苯甲酰氯柱前荧光衍生-高效液相色谱测定方法。尿样经酸水解、固相萃取柱浓缩、净化分离;血清样品经乙腈沉淀蛋白后,用乙醚萃取游离态雌激素,N2气流挥干、在无水条件下,雌激素与对硝基苯甲酰氯反应生成荧光产物,用高效液相色谱法定量。检出限为2．7—8．3μg／L;加标回收率尿样为78．0％-102．5％,血清样为72．6％-98．6％;方法精密度为1．29％-4．52％。应用本法对20份尿样和10份血清样进行了测定,结果满意。     

高效分离糖及糖和糖甙的α-、β-差向异构体的新型柱——β-环糊精化学键合相柱

]β-环糊精化学键合相色谱柱用于分离糖、糖醇,糖与糖甙的α-和β-差向异构体有好的分离效果。在室温,常规洗脱分离糖,大多数不存在差向异构体的分离。分离一些糖的差向异构体,在0℃有更好的效果。多种溶剂体系,如乙腈/水、丙酮/水,乙酸乙酯/甲醇/水、乙醇/正己烷等都可有好的分离效果。所有的分离都为正相体系。柱效和柱的稳定性均很好。如果使用uv检测器的低波长端（如195nm,以乙腈/水为移动相,不仅可用之检测糖,还可作梯度洗脱。     

四磺基铁(Ⅲ)酞菁二级散射和反二级散射法测定人血清白蛋白

在pH2．0的Clark-Lubs缓冲液中,人血清白蛋白与四磺基铁(Ⅲ)酞菁结合而使二级散射和反二级散射急剧增强。在0～2．3mg／L和0～3．4mg／L浓度范围内,二级散射和反二级散射的增强与人血清白蛋白浓度呈线性关系,检出限分别为0．40mg／L和0．16mg／L。还考察了某些共存物质的影响,讨论了反应机理。     

聚乙二醇二甲基丙烯酸酯整体柱固相萃取-高效液相色谱法测定血清中卡马西平和10-羟基卡马西平

使用乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）在注射器中构筑固相萃取整体柱,并结合高效液相色谱法,建立了测定血清中卡马西平（CBZ）和10-羟基卡马西平（MHD）的分析方法。实验考察了反应温度和反应时间对整体柱萃取性能的影响和淋洗溶液种类、洗脱溶液种类及体积对固相萃取的影响。在优化条件下,该固相萃取柱对血清中CBZ和MHD能够有效富集、净化。对0.02~40 μg/mL CBZ和0.05~100 μg/mL MHD标准溶液进行分析,结果表明,在各自的范围内CBZ和MHD线性关系良好,相关系数（r）均为0.999。CBZ和MHD的检出限分别为0.004 μg/mL和0.01 μg/mL;在3个加标水平下,CBZ和MHD的平均回收率分别为92.7%和94.2%,日内（n=3）和日间（n=3） RSD≤6.1%。该固相萃取柱批内（n=3）和批间（n=5） RSD≤5.3%,反复使用8次的RSD≤5.8%。该法简单、高效,适用于癫痫患者血清中CBZ和MHD的测定。