荧光各向异性法研究酸度对四磺基铝酞菁与牛血清白蛋白相互作用的影响

对酞菁类化合物与白蛋白相互作用的研究有助于了解其在血液中的存在形式,从而探索其光敏作用机制[1].荧光各向异性法是研究小分子与蛋白质相互作用的有力工具[2].本文将荧光各向异性的原理和方法应用于由光敏剂四磺基铝酞菁(AlS4Pc)与牛血清白蛋白(BSA)组成的体系,考察了AlS4Pc的荧光各向异性随酸度变化的规律.结果表明,BSA对AlS4Pc有较强的结合能力,提示血清白蛋白对酞菁类光敏剂可起到储存和转运的作用.1　实验部分1.1　试剂及仪器　四磺基铝酞菁的合成与纯化参照文献[3]方法进行.产物经聚酰胺层析、紫外可见吸收光谱、荧光光谱、红…     

荧光各向异性法研究环糊精包络物

推导了用荧光各向异性法测定环糊精包络物平衡结合常数的方程式,并用于测定芘-β-环糊精包络物的结合常数,获得了满意的结果,依据推得的方程式并结合各向异性～环糊精浓度曲线讨论了环糊精包络物存在形式及主-客体作用方式,预计了以蔡衍生物为配体的金属离子分析方法应用β-环糊精的可能性。     

时间分辨(荧光)各向异性及其在高分子科学研究中的应用

荧光偏振(fluorescence polarization)的实验研究始于1929年Perrin^[1]对荧光小分子在溶液中寿命的测定。直到二十年后,这一技术才被Weber等^[2]用于对蛋白质分子运动的研究。     

荧光探针法快速测定牛奶中三聚氰胺

在pH 8.40的缓冲溶液中,一定浓度的溴化十六烷基三甲基铵可以使阴离子染料荧光素的荧光强度显著增强,加入一定量的三聚氰胺后,其荧光发生猝灭,且荧光猝灭的程度在一定的范围内与加入的三聚氰胺的量呈良好的线性关系,据此建立了以荧光素作为荧光探针测定三聚氰胺含量的荧光光谱法。优化了实验条件,获得的线性范围为0.025～0.85 mg/L,检出限为0.0019 mg/L。样品回收率为82.9%～87.4%,相对标准偏差为1.9%～4.0%。方法可用于牛奶中三聚氰胺的快速测定。     

蛋白质标记荧光探针的研究及其进展

蛋白质标记荧光探针在生物分析及蛋白质组学中的应用日益广泛,被用于在分子水平上分析和识别蛋白质,检测蛋白质复杂的构象变化及各项生理活动过程如蛋白质之间的相互作用等.本文评述了近年来该类探针的研究及进展,展望了其应用前景,引用文献63篇.     

荧光光度法测定蛋白质的研究进展

评述了近10年来国内外对荧光光度法分析蛋白质的进展,引用文献78篇。     

荧光探针法研究胶原蛋白的水溶液聚集状态

利用一种分子内电荷转移化合物３ 甲氧基 ４’ Ｎ，Ｎ 二甲氨基黄酮（ＤＭＭＦ）作为荧光探针，研究了胶原蛋白在水溶液中的聚集状态．研究结果发现，当胶原蛋白浓度增大到０５ｍｇ／ｍＬ以上时，ＤＭＭＦ在４６５ｎｍ处的荧光强度有一突跃；继续增大其浓度，荧光强度越来越大．证明胶原蛋白在水溶液中随浓度增大有明显的聚集行为．利用荧光偏振法测量该体系内ＤＭＭＦ的荧光偏振特性，发现当胶原蛋白浓度增大到０５ｍｇ／ｍＬ以上时，体系具有较高的微粘度，进一步证实了胶原蛋白在水溶液中的聚集特性．     

四环素族化合物荧光标记蛋白质的研究

本文报道将四环素族化合物标记牛血清白蛋白的方法，研究了其偶联物的荧光特性，结果表明四环素族化合物具有良好的荧光标记蛋白质的功能。     

荧光纳米颗粒标记免疫分析

荧光纳米颗粒标记是目前免疫分析研究中一个新兴的领域。由于荧光纳米颗粒标记可以有效地提高单个识别分子上标记的荧光量（F/P）,从而大大提高分析的灵敏度。但是由于在标记和免疫分析过程中具有很多不同于传统荧光染料的特点,需要很多经验的积累,在现阶段限制了其在实际医学诊断中的广泛应用。本文就近年来荧光纳米颗粒标记免疫分析中涉及到的标记方法、免疫模式、影响因素等方面进行了综述。     

Rapid and Sensitive Method for Citrinin Determination Using High-Performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detection

Citrinin is a toxic product of secondary metabolism of fungi, such as certain Aspergillus, Penicillium, and Monascus species that are usually contaminating cereals. A new sensitive liquid chromatographic method with fluorescence detection was developed, validated, and applied for citrinin determination. The method is based on reversed-phase separation at pH 2.5, where citrinin exhibits the highest fluorescence quantum yield. In this setup, no derivatization step is needed. The method shows linearity in the range between 0.2 μg/mL and 0.1 mg/mL. The detection limit reached is 90 ng/mL (3.6 × 10^?7 M). Validated method was successfully applied on analysis of spiked and real cereal samples.     

Atlas of Fluorescence Spectra and Lifetimes of Dyes Attached to Protein

Abstract

Fluorescence spectra and lifetimes of ovalbumin labeled with a variety of fluorescent reagents have been measured. The peak positions of the emission spectrum and the long wavelength band of the excitation spectrum as well as the fluorescence lifetimes, are tabulated. Heterogeneity of binding sites is shown by the broadness of some emisison spectra and the presence of multiexponential decay. The atlas may serve as a guide to the properties of these dyes attached to proteins in general.     

A Fluorescence Synergistic Method for the Determination of Stilboestrol

Abstract

A simple, highly sensitive and selective fluorescence synergistic method has been developed for rapid determination of stilboestrol with Triton × — 100 (λ_ex = 318nm, λ_em = 415nm) at pH 8.80 ～ 10.20. The calibration graph is linear over the range of 0.0 ～ 30.0μg/10ml. The detection limit is 0.03μg/ml stilboestrol. The method has been successfully applied for the determination of stilboestrol in tabellae stilboestrol and injectio stilboestrol with satisfactory results. It can also be applied for the determination of stilboestrol in body fluid of special patients.     

荧光偏振免疫分析方法快速检测沙拉沙星残留

以异硫氰酸荧光素(FITC)标记沙拉沙星合成荧光标记物,采用薄层色谱法提纯,优化了反应时间、标记物和抗体的工作浓度,建立了沙拉沙星的快速荧光偏振免疫分析法( FPIA).本方法测定沙拉沙星在缓冲液中的半数抑制浓度(IC50)为43.2 μg/L;检测范围为5.7～327 μg/L,可以达到国家规定的动物性食品中兽药最高残留限量(80 μg/kg)的要求.本研究考察了FPIA测定沙拉沙星的动力学过程及对其它4种喹诺酮类药物的交叉反应.结果表明,环丙沙星、恩诺沙星、加替沙星及氧氟沙星的交叉反应率分别为3.3％,1.8％,1.7％和0.7％.在牛奶和猪尿中沙拉沙星的回收率分别在71％～94％和74％～102％之间.本方法操作简单快捷,整个检测过程只需5 min、而且灵敏度较高、特异性强,适用于动物性食品中沙拉沙星残留的快速筛选检测.     

荧光偏振发射平台法及其应用

本文从原理上叙述荧光偏振发射平台法,并用荧光单体-单体混合物及单体-聚合物体系进行验证试验。前者如荧光黄-罗丹明S(或四碘荧光素、或罗丹明B),后者如罗丹明6G-罗丹明6G聚合物体系,结果满意。     

毒素蛋白ColicinE1与磷脂膜相互作用的荧光光谱研究临界摩尔比的测定

磷脂－蛋白相互作用的临界摩尔比是研究膜脂－蛋白相互作用的重要参数．本文利用荧光光谱技术首次测定了毒素蛋白ＣｏｌｉｃｉｎＥ１在不同条件下与不同磷脂膜相互作用的临界摩尔比并通过临界摩尔比的变化讨论了插膜蛋白与磷脂膜相互作用的规律，为进一步探讨毒素蛋白的插膜机制提供了重要的基础     

用荧光关联谱单分子检测系统研究DNA分子

生命科学的发展对分析检测技术的灵敏度要求越来越高,人们希望在单分子水平上了解物质之间的相互作用以及生命的过程.     

荧光偏振免疫分析法研究17种磺胺类药物与抗体亲和力的构效关系

应用4株磺胺二甲基嘧啶(SMZ)多克隆抗体和5种不同结构的荧光标记物(Tracer)建立了荧光偏振免疫分析(FPIA)检测SMZ的方法. 讨论了4株多抗对SMZ的检测灵敏度和对17种磺胺类药物(SAs)的相对亲和力趋势, 从药物分子二维结构上探讨了多抗对小分子抗原的识别能力. 结果表明, 3号多抗对SMZ的灵敏度最高, 但是4株多抗对17种SAs的相对亲和力趋势相似, 说明抗体对抗原的结合力大小与抗原的化学结构有关.     

巴比妥酸衍生物荧光增强法快速测定牛奶中的三聚氰胺

建立了一种简单快速测定三聚氰胺的方法. 在pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中, 三聚氰胺与巴比妥酸衍生物(DBA)形成稳定的氢键, 使三聚氰胺的荧光强度显著增强, 由此建立了巴比妥酸衍生物荧光增强测定牛奶中三聚氰胺的新方法. 在优化的条件下, 该方法的线性范围为12.5~1250 μg/L, 检出限为7.5 μg/L, 相对标准偏差为2.06%, 样品平均加标回收率为96.62%. 本方法简便、快速、准确, 可用于大量牛奶样品中三聚氰胺的快速检测.