谷氨酸生产菌噬菌体鉴定和特性研究

对谷氨酸生产菌ＦＭ８２０－７、Ｔ６－１３分离到的６株噬菌体的形态学、生物学特性、ＤＮＡ和结构蛋白的分子量进行了比较。结果表明，各株噬菌体头部大小与尾部结构不同，除噬菌体１０２０外，其他噬菌体的宿主范围都较宽，ｐＨ值和温度稳定性稍有差别，各噬菌体的ＤＮＡ和蛋白分子量存在显著差异，还对噬菌体保藏方法进行了摸索。     

谷氨酸生产菌噬菌体理化特性的初步研究

从味精厂废发酵液中分离得到２株谷氨酸生产菌噬菌体３Ｃ１３和３Ｃ４１，提纯的噬菌体经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析：３Ｃ１３由１条主带、至少８条次带组成，多肽分子量在２８８４０￣９５０００道尔顿之间；３Ｃ４１呈３条主带、３条次带，多肽分子量在１７３７８￣７９４３３道尔顿之间。对提纯的核酸进行酶解消化、分子展层等生化分析以及限制性内切酶试验，证明２株噬菌体的核酸均为线状双链ＤＮＡ。３Ｃ１３核酸分子量为２７．８１     

高产谷氨酸菌S9114的选育及生产实绩

以天津短杆菌（Ｂｒｅｖ．ｔｉａｎｊｉｎ）Ｔ６－１３出发，经紫外线、亚硝基胍用原生质体等诱变处理，选育出Ｓ９１１４菌株，具有耐高糖、耐高谷氨酸，不利用谷氨酸和产酸率高的特性。摇瓶产酸最高达９６．９ｇ／Ｌ，比原出发菌提高５０％。经工艺条件优化，在２０ｍ３发酵罐最高产酸９２．３ｇ／Ｌ（转化率５６．５％）。在６０ｍ３发酵罐连续１０批平均产酸８２．１ｇ／Ｌ，转化率４８．７４％、在１５００升发酵罐进行高生物素添加青霉素流加糖的工艺实验，最高产酸达９８．７ｇ／Ｌ，转化率５２．２％，周期２６小时。     

谷氨酸发酵噬菌体研究初报

噬菌体污染,常给谷氨酸发酵造成严重危害,所以查明系外源噬菌体的污染或溶原菌诱导出的噬菌体污染,就成了人们关注的首要问题。我们从谷氨酸生产菌北京棒状杆菌突变株——FM820-7紫外线、丝裂霉素C诱导分离到二株噬菌体526,528,从FM820-7菌株生产环境样品中分离到一株噬菌体530,对分离的噬菌体形态及生物学特性进行了初步研究。并就溶原菌株诱导方式、噬菌体的检测实验条件进行了探讨,为迅速澄清污染源,提供了直接有效的手段。     

应用原生质体融合技术选育L-异亮氨酸生产菌

以黄色短杆菌WY10和ASL495为亲本菌株，分别摸索了其原生质体形成和再生的条件，并在此基础上，进行了原生质体融合试验，考察了PEG浓度、融合时间等条件对原生质体融合的影响；最后利用所确定的条件对两亲株进行了融合，筛选出目的融合子WYA09和WYA17，带有双亲株标记Met^-和Leu^-。经产酸验证后，产酸量没有大幅提高，但副产氨基酸(主要是亮氨酸)减少，对工业生产中分离提纯工作和下一步的筛选高产菌工作都大有益处。     

谷氨酸生产菌的选育

研究代谢调节突变株的选育方法．以北京棒杆菌Q-72为出发菌株,经紫外线诱变,筛选能在以琥珀酸为唯一碳源的培养基上生长良好的菌株,强化CO2固定反应．突变株UH62的产酸率和转化率分别比出发菌株提高1．45％和9．1％．     

复合诱变和原生质体融合选育S-腺苷甲硫氨酸酿酒酵母高产菌株

对生产S-腺苷甲硫氨酸（SAM）的酿酒酵母（S.cerevisiae）菌株R1进行复合诱变和原生质体融合。采用酶解法获得出发菌株S.cerevisiae R1的单倍体菌株hR10,对其进行UV和DES复合诱变,筛选出了4个单倍体正突变株DR1-3、NM14、NM39和NM45。制备了单倍体正突变株的原生质体,采用热灭活和UV灭活法灭活双亲原生质体,在聚乙二醇（PEG）的诱导下进行原生质体融合,筛选得到融合子F35,其生产 SAM的产量为22.5 mg/L,与出发菌株R1（11.1 mg/L）相比,提高了103%,并且能够稳定遗传。采用正交试验优化了F35发酵生产SAM的培养基和发酵时间,优化了的培养基配方为麦芽糖100 g/L,蛋白胨10 g/L,NH₄H₂PO₄4g/L,NH₄Cl₅g/L,MgSO₄0.1g/L,KH₂PO₄6 g/L,发酵时间为72h。     

酯酶同工酶技术在选育Bt新菌株中的应用

研究了苏云金杆菌亲本菌株及通过原生质体融合而获得的融合子的酯酶同工酶谱，通过比较分析，融合子的酯酶同工酶谱较之亲本菌株有显著变化，表明酯酶同工酶在原生质体融合中可作为鉴定融合子的遗传标记     

高产2-苯乙醇酿酒酵母的选育

从8株酿酒酵母中初筛到一株2-苯乙醇产量达1.48g.L-1的菌株FD0419.以此为出发菌株,分别进行硫酸二乙酯化学诱变和原生质体紫外诱变,获得3株耐受性提高但2-苯乙醇产量下降的菌株,再与出发菌株进行原生质体融合.最终,筛得菌株R-UV3,其2-苯乙醇产量达2.51g.L-1,比出发菌株提高69.6%.     

对虾养殖池底泥中光合细菌分离及其生物学特性

从虾池底泥样品富集分离出2株光合细菌,分别编号为M1和M2,均为革兰氏阴性菌,繁殖方式为二均分裂.细胞中含有细菌叶绿素a,经形态、生理生化特性初步鉴定,M1和M2菌株均为红假单胞菌属(Rhodopseudomonas)的成员,初步研究了NaCl浓度对其生长的影响.     

蒙古口蘑与双孢蘑菇原生质体融合育种研究

以蒙古口蘑和双孢蘑菇为出发菌株,研究了酶浓度、酶解时间、菌龄和渗透压稳定剂、再生培养基等对蒙古口蘑和双孢蘑菇原生质体制备和再生的影响.结果表明,蒙古口蘑原生质体制备和再生的最佳条件是,培养5 d的菌丝体用2.5%(w/w)的溶壁酶酶解4 h,渗透压稳定剂为0.6 mol/L KCl,MB为再生培养基,制备率为7.53×1010个/L,再生率为8.4×10-4;双孢蘑菇原生质体制备和再生的最佳条件是,培养5 d的菌丝体用2%(w/w)的溶壁酶酶解3 h,渗透压稳定剂为0.6 mol/L KCl,PQA为再生培养基,制备率为6.96×1010个/L,再生率为7.4×10-4.对两种菌原生质体的释放过程进行形态观察,均为顶端释放.采用双亲灭活原生质体融合技术对蒙古口蘑和双孢蘑菇原生质体融合进行研究,蒙古口蘑原生质体采用热灭活,65℃处理30 min,灭活率达100%,双孢蘑菇采用紫外灭活,在15 W紫外灯下,距离30 cm,处理20 min,灭活率达100%,两菌株按1∶1混合,以30%PEMG(6 000)为促融剂,融合10 min,融合率为5.6×10-5.经遗传稳定性检验,融合菌株的遗传稳定率为80%,从菌落特征、菌丝形态、菌丝生长量、酯酶、游离全蛋白、乳酸脱氢酶、乙醇脱氢酶和过氧化物酶等同工酶方面对融合子进行筛选,获得一株具有双亲性状的融合株.     

食用菌原生质体融合研究

以具有黑色分生孢子与抗N_aN_3遗传标记的鲍鱼菇原生质体,经碘乙酰胺灭活后与佛罗里达侧耳、Cr02原生质体融合,已取得种间融合子。同时,以佛罗里达侧耳与香菇Cr02采用碘乙酰胺双灭法,取得属间融合子,并经酯酶同工酶酶谱分析证实。     

锰细菌的选育及其固定化除锰

从成熟滤柱中成功筛选出3种具有去除Mn2+效果较强的革兰氏阳性细菌,并对其生理生化特性进行详细研究.3种菌体适宜生长的pH值和温度范围很广,在富营养和贫营养条件下都可以良好生长,并对Mn2+去除效果很好,去除率均在86%以上,去除率增高阶段对应菌体的对数生长期阶段.采用聚乙烯醇和海藻酸钠混合包埋的方法将菌体包埋,制成的固定化颗粒机械强度高,传质性能好;固定化颗粒与廉价河砂混合填埋的柱子对贫营养模拟水中的Mn2+去除效果很好,3种菌体最大去除率均大于85.6%.     

紫外诱变原生质体选育高产L-乳酸菌株的研究

以干酪乳杆菌ZZ-L为出发菌株,对其原生质体制备条件进行了优化.结果表明,用为0.4 mg/mL的溶菌酶溶液和0.7 mol/L NaCl溶液作为渗稳剂对菌龄为22 h的干酪乳杆菌ZZ-L酶解时间110 min,原生质体的形成率为89.5%,再生率为47.7%,达到最佳水平.并对原生质体进行了紫外诱变育种.通过平板和静置发酵实验,筛选得到8株突变株产量比出发菌株高的突变株,其中菌株ZZ-06的L-乳酸产量达78.6 g/L,比出发菌种提高了20.7%,突变株ZZ06经12次传代,其遗传性状稳定.     

大肠杆菌和枯草芽胞杆菌的原生质体融合

本文对大肠杆菌（Escherichia coli）和枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）的原生质体融合进行了研究，获得了融合菌原生质体的再生，根据两种菌的形态和利用淀粉的能力上存在的明显差异，对融合菌的原生质体进行筛选，实验结果表明，融合细胞具有降解淀粉的能力，但不形成芽胞。     

甘草酸单铵抑制细菌生长的初步研究

本文采用杯碟法研究了甘草酸单胺对辨析不致病性细菌的抑制作用。结果显示，ＭＡＧ对辨析不细菌均用有不同程度的抑菌效果，其对变形杆菌作用最强，对伤寒杆菌Ｏ作用较弱。