一种高效的酿酒酵母和毕赤酵母电击转化法

 电击转化由于其高效率而被广泛地应用于酿酒酵母的转化过程中。但是由于菌种退化或是暴露于污染的环境,很多菌种的转化效率会显著地下降2~4个数量级。探索了一种改进的电击转化方法,它借助于单链载体DNA和转化后在YPD培养基中的复苏过程,可以使转化效率比之前曾报道过的已经最优化的用醋酸锂和二硫苏糖醇进行预处理的转化方法效率提高13倍。在毕赤酵母中使用这一改进的方法,可以使转化效率提高高达114倍,在一些已经退化的酿酒酵母菌株中,此方法也可以提高转化效率将近100倍。这一方法将为几乎所有酿酒酵母和毕赤酵母的分子操作提供极大的便利。     

根癌农杆菌电击转化条件的研究

探索了根癌农杆菌EHA105的高效转化方法.将双元载体质粒pBIN19/glgB经电击转化法导入根癌农杆菌EHA105,研究不同实验条件对转化率的影响.结果表明:在细胞浓度OD600为1.0时进行电转化,转化率最高,达到每微克DNA1.12×105CFU;当电场强度为11 kv/cm,转化率最高,达到每微克DNA1.78×105CFU;在一定的细胞浓度范围内,电击转化率与细胞浓度密切相关,转化率随着细胞浓度的上升而上升;质粒大小能影响电击转化率,转化率随着质粒的增大而下降.应用该优化的电击转化条件将双元载体质粒pBIN19/glgB成功导入根癌农杆菌EHA105,构建了植物双元表达载体.     

酿酒酵母细胞四种转化方法的比较

1978年 ,Hinnen等和 Begges首先报道了酵母原生质体转化方法 [1 ,2 ] .该方法的优点是转化效率较高 ,但此方法容易形成多倍体细胞 ,且细胞再生困难 .后有人在此基础上进行改进[3] ,虽提高了转化效率 ,减少了多倍体细胞的形成 ,但菌落再生时间较长 ( 4～ 6d) .Ito等提出了不完全破坏细胞膜的完整酵母细胞的转化方法 ,并对多种金属离子对转化效率的影响进行研究 [4] .进入 90年代后 ,人们在 Li Ac的加入量、热冲击时间、PEG4 0 0 0的浓度等方面进行了改进 [5～ 7] .本文选取了四种不同的转化方法进行比较 ,以期找到最佳的转化方法 .1　材…     

提高科技成果转化率关键需提高成果推广度

作者通过理论和实例分析，阐述以待科技成果转化问题，在重视置的评价的同时，更要重视质的评价。提高转化率，关键在于提高成果的推广度。据此，作者地对领导、管理部门，中试，转化机制，农民素质等方面提出了具体的建议。     

我国科技成果低转化率的原因及对策

随着科技的迅猛发展，其对经济的作用日益增强。科技和经济呈现出相互依存、相互渗透的一体化发展趋势，其最重要的结合点就是科技成果的转化；而提高科技成果的转化率，是促进效益增加和国力增强的有效途径。据报道，我国目前每年取得科技成果３万多项，在生产中稳定使用且具有一定规模的不足２０％，而最后形成产业的只有５％左右，科技对经济的贡献率还远远低于发达国家［１］。与发达国家科技成果转化率超过５０％相比，我国的科技创新资源的浪费十分严重。一、科技成果转化率低的原因１．科技成果自身与市场脱节严重，缺乏成果转化时效…     

谈化学反应的转化率

本文讨论了化学反应转化率的正确定义,并纠正了某些教材中的不正确说法。     

反应条件对苯丙乳液共聚中阳离子单体转化率的影响

系统地研究了苯乙烯(S t)、丙烯酸丁酯(BA)、丙烯酰胺(AM)和阳离子单体二甲基二烯丙基氯化铵(DADM AC)共聚反应中反应温度、引发剂、乳化剂、单体质量分数和单体比例等因素对DADM AC转化率、单体总转化率和乳液阳电荷密度的影响.结果表明:反应条件对DADM AC的转化率影响较大,DADM AC的转化率随其质量比和S t与BA的质量比的增加而减小,随AM质量比、引发剂用量、乳化剂用量及单体质量分数的增加而增大.在温度为75℃时,单体总转化率、DADM AC的转化率及乳液阳电荷密度最大,当阳离子单体质量分数稍大于5%时,单体总转化率可达94.6%.     

盐胁迫条件下酿酒酵母的代谢通量分析

用计算代谢通量的方法研究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)在高盐胁迫条件下的生理代谢.结果表明,在盐胁迫条件下,胞外海藻糖、甘油、乙醇和乳酸的质量浓度分别较常规培养条件下提高了24.44%,60.89%,23.32%和26.76%,而柠檬酸、琥珀酸和苹果酸的质量浓度分别较常规培养条件下降低了82.11%,50.37%和53.33%.代谢通量分析表明,在盐胁迫培养条件下糖酵解途径各支路的代谢产物通量均有所增加,而TCA循环中各代谢产物的通量均有所减少.     

啤酒酵母的生活史与有性接合的研究进展

介绍有关啤酒酵母的生活史,单倍体接合型基因的结构、表达、转换与控制,啤酒酵母的有性接合过程,性激素的结构、功能与分泌、性凝集物质的功能、分泌等的研究进展与成果。     

B.R.S.变换的推广

本文从要求拉氏函数密度的不变性出发导出了非阿贝尔规范场中的Ｂ．Ｒ．Ｓ，变换，论证了其中的系数ξ与内部空间分量指标ａ．ｂ．ｃ……的无关性；并推广了Ｂ．Ｒ．Ｓ．变换及Ｗａｒｄ－Ｔａｋａｈａｓｈｉ恒等式．在普遍情况下，规范群的群参量θ（ｘ）没有不定性．     

葡萄的基因转化效率及其影响因素

经农杆菌介导转化葡萄的胚性愈伤组织,研究了影响转化效率的几个因素。结果表明,愈伤组织经１４天预培养,菌液经６－８倍稀释,共培养时保持ＰＨ６．０以及在农杆菌对数期之前８小时加入乙酰丁香酮都显著提高了转化效率。     

乳酸乳球菌电转化条件的研究

以质粒pTRKH2为材料,对乳酸乳球菌MG1614进行电转化条件的研究.实验结果表明,在电转化过程中,电场强度、电阻大小、细胞生长状态和电击后菌株复苏时间均对转化效率有明显影响,得到了乳酸乳球菌的最适电转化条件为:对数生长中期的细胞,经1%甘氨酸处理,在10kVcm电场强度、400Ω电阻下电转化,转化后细胞在SGM17培养液中培养2h后涂布选择性培养基,转化率(转化子个数与DNA质量之比)可达1.2×103个μg,比优化前的转化效率提高近100倍.     

超声波对酿酒酵母诱变作用的初探

通过利用现有超声波仪器对酿酒酵母进行诱变作用试验,初步探讨了超声波对酿酒酵母致突变的因果效应.试验结果表明,在相同的时间内,超声波频率越高对试验菌株的致死率越高;同一频率,超声波辐射时间增加也可使试验菌株的致死率增高,同时经过诱变处理后的菌株其生理生化特性也有变化.     

酿酒酵母氧化应激反应的研究进展

所有好氧生长的生物都必须经受由于氧分子的不完全还原形成活性氧类物质而产生的氧化应激反应。酵母细胞受氧化应激后会很快合成自我修复性的物质,以抵御这些不良环境。本文主要概述了酿酒酵母的氧化应激反应,并对该过程中的几种重要的转录调节因子进行阐述。