胶乳微球与抗体蛋白相互作用机理的荧光光谱法分析

利用共价偶联的方法制备了胶乳-抗体蛋白复合物,并采用荧光光谱法对复合物的性质进行了研究,以揭示胶乳微球与抗体蛋白之间的相互作用机理。内源荧光光谱分析结果表明,共价偶联后,抗体蛋白的最大发射峰发生显著蓝移,最大发射峰强度显著降低,抗体蛋白的三级结构发生了一定的变化,胶乳微球与抗体蛋白之间的相互作用对抗体蛋白的内源荧光有显著的猝灭作用,猝灭效果随着偶联体系pH值以及胶乳浓度的增加而增强,猝灭机制为静态猝灭。外源荧光光谱分析结果表明,共价偶联后抗体蛋白的最大发射峰强度显著增强,且随着偶联体系pH值的升高,抗体蛋白的疏水性显著降低,随着胶乳浓度的增加,疏水性逐渐升高。     

荧光光谱法研究核黄素与核黄素结合蛋白的相互作用

运用荧光光谱研究了核黄素与核黄素结合蛋白的相互作用,并探讨了两者间的结合类型、结合常数、结合过程中热力学参数和能量转移。结果表明:核黄素结合蛋白内源荧光的猝灭是由于核黄素与蛋白质之间形成复合物,并符合静态猝灭机理。298,308,318K下核黄素与核黄素结合蛋白的结合常数分别为:5.35×108,1.54×108,0.56×108 L.mol-1。热力学数据表明核黄素与核黄素结合蛋白之间主要作用力为氢键和范德华力。Frster能量转移理论确定了核黄素与核黄素结合蛋白的作用距离与能量转移效率分别为0.70nm与0.39。利用同步荧光光谱研究了核黄素结合蛋白与核黄素结合过程中构象的变化。     

荧光光谱法研究蒜头果蛋白与金属离子的相互作用

蒜头果蛋白(malanin)是从云南、广西特有植物蒜头果中分离纯化出的一种新的、具有抗肿瘤活性的糖蛋白。用荧光光谱法研究了Cu2+,Ag+和Ca2+对malanin和apo-malanin溶液(经EDTA透析脱去金属离子后的脱金属蛋白)荧光强度的影响。结果表明,Cu2+对malanin和apo-malanin荧光均有明显的静态猝灭现象,其离解常数K_d分别为2.37×10-4和2.66×10-4 mol·L-1;Ag+对malanin的荧光强度变化不大,但对apo-malanin荧光强度却有明显的静态猝灭现象,其离解常数K_d为2.37×10-4 mol·L-1;而Ca2+对malanin和apo-malanin荧光强度均无明显变化,说明Ca2+对维持malanin分子天然构象具有重要作用。     

荧光和UV-Vis光谱法研究DL-天冬氨酸-Ag的反应

用UV-Vis、荧光光谱和电泳等方法研究了DL-天冬氨酸(Asp)同银(Ⅰ)离子的相互作用及介质的pH、Asp浓度等条件对天冬氨酸同银(Ⅰ)离子作用的影响.天冬氨酸-银体系在235.2nm和493nm左右有最大吸收;在281.7nm激发波长下天冬氨酸产生荧光(发射波长为333.8nm),当Asp同银离子发生反应后,出现了荧光猝灭现象.天冬氨酸-银体系带负电荷,双电层的电动电位为-1.81×10-4V.     

荧光光谱法研究β-环糊精衍生物对氟比洛芬的包结作用

采用荧光光谱法研究了β-CD衍生物对氟比洛芬的包结作用。实验考察了β-CD衍生物种类及其浓度、乙醇含量、离子强度及pH等因素对包结作用的影响。实验结果表明:随β-CD衍生物浓度的增大,荧光强度逐渐增强,其中HP-β-CD的增强效果最明显,即表明HP-β-CD对氟比洛芬的包结作用最强。1/(F-F0)对1/[CD]所作的双倒数曲线为直线,说明氟比洛芬与环糊精形成1∶1的包合物。随离子强度增大,包合作用增强;溶液中乙醇比例和pH越大,HP-β-CD与氟比洛芬包结物的包合作用越弱。     

乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物性质的荧光光谱法分析

乳清分离蛋白与葡聚糖的混合物在干热处理条件下,发生了以褐变为特征的美拉德反应。当葡聚糖分子量由67kD增至150kD时,游离氨基含量分别下降了35.77%和30.53%,糖链越长,其接入到蛋白质肽链的难度越大。采用荧光光谱对乳清分离蛋白-葡聚糖接枝物的性质进行分析。内源荧光光谱图显示,接枝产物在405nm的最大荧光强度显著提高,且350～500nm范围内的荧光强度顺序为:G67>G150,这说明接枝物中有Maillard反应体系所特有的荧光物质生成;由外援荧光光谱图得出,接枝产物在470nm的最大荧光强度均有明显降低,各溶液体系中荧光强度高低顺序依次为:WPI>G150>G67。疏水性指数的测定进一步说明两种不同分子量的葡聚糖接入到蛋白质肽链中,对乳清分离蛋白的疏水性均有一定的屏蔽作用。     

荧光光谱法研究β-紫罗兰酮与溶菌酶的相互作用

应用溶菌酶内源荧光光谱研究了芳香族化合物β-紫罗兰酮与卵清溶菌酶蛋白之间的结合反应,测定了两者之间的结合常数kA为1.44×103L·mol-1,结合位点数n为0.85.根据Foerster非辐射能量转移理论,确定了能量给体与受体之间的结合距离为2.27nm,符合非辐射能量转移条件.通过同步荧光光谱和三维荧光光谱,进一步研究了β-紫罗兰酮对溶菌酶蛋白构象的影响,结果显示β-紫罗兰酮的加入引起溶菌酶蛋白构象的变化,溶菌酶内部色氨酸残基所处环境的疏水性降低.     

荧光光谱法研究5-氟脲嘧啶与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法研究了抗癌药5-氟脲嘧啶(5-Fu)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。5-Fu对BSA的荧光有较强的猝灭作用,其猝灭方式为静态猝灭。25℃和37℃时,5-Fu与BSA之间的结合常数KA分别为7.2×104、4.9×104L.mol-1,结合位点数分别为1.18和1.17。计算得到不同温度下反应的热力学参数,表明二者之间的结合主要以静电力为主。     

基于同步-导数荧光光谱法的多组分农药残留测定的研究

多组分农药残留物的荧光检测中,由于组分间结构与化学性质相似,导致荧光光谱相互重叠,常规荧光光谱法难以同时进行测量。利用同步-导数荧光光谱法对西维因与克百威这2种常用农药的荧光光谱进行了研究,并试验了pH值对两者荧光特性的影响。在pH为7.8的条件下,选择Δλ=60 nm,在250～450 nm的波长范围内对两者混合溶液进行了同步荧光光谱扫描,并做一阶导数处理。实验结果表明,两者的同步导数荧光光谱完全得到了分离,消除了彼此间的干扰,能够对两者的混合溶液进行同时测定。西维因与克百威的线性范围分别为0.013～1.156 μg·mL-1与0.025～1.042 μg·mL-1,检出限分别为0.013 μg·mL-1与0.025 μg·mL-1,回收率分别为98%～104%与96%～103%;相对标准偏差均低于2.25%。     

分子对接和荧光光谱法研究槲皮素与β-葡萄糖苷酶的相互作用

结合分子对接法和光谱法,研究了槲皮素与β-葡萄糖苷酶的相互作用及作用机理.首先利用AutoDock 4.2软件对β-葡萄糖苷酶与槲皮素、竞争性抑制剂对硝基苯-β-D-琉基葡萄糖的分子对接分别进行研究,然后采用荧光光谱法研究了槲皮素与β-葡萄糖苷酶的结合反应,并测定了结合常数.结果表明:这种相互作用使β-葡萄糖苷酶发生内...     

液态簧振动力学谱在蛋白质水凝胶脱水变性过程的应用研究

本文用液态簧振动力学谱(RMS-L)方法, 对典型蛋白质水凝胶鸡蛋清的脱水变性过程进行了测量, 结果表明, 随水含量的减少, 鸡蛋清至少存在4个力学谱的显著变化过程. 基于此结果并结合力学谱的理论分析, 作者推测, 随水含量的减少, 鸡蛋清可能依次存在下述4个状态: 1) 类体水(bulk-likewater) 的蛋白质水凝胶态; 2) 键合水 (bond water) 的蛋白质水凝胶态; 3) 键合水和键合蛋白质(bonding protein) 的混合态; 4) 键合蛋白质态. 而蛋白质的空间构型(spatial configuration)转变即变性, 主要发生在拥有键合水的蛋白质通过失水向键合蛋白质转变的混合态. 这表明RMS-L对鸡蛋清脱水变性过程的检测是有效的, 所得结果对蛋白质变性机理、以及蛋白质水凝胶态的深入研究也应具有参考价值. 关键词： 力学谱 蛋白质水凝胶 蛋白质变性     

Application of gain-modulated avalanche photodiodes in phase-sensitive fluorescence spectroscopy

Phase and modulation fluorometry experiments at frequencies up to 875 MHz and lifetime-selective fluorescence detection with picosecond resolution are reported. A high-frequency gain-modulated silicon avalanche photodiode is used as an opto-electronic crosscorrelator which permits 10 ps time resolution and 1 photon per laser period sensitivity. Application of the correlator to fluorescence rejection from Raman spectra is proposed.     

磁共振波谱及成像技术在纳米尺度物质生物效应研究中的应用

纳米尺度物质的生物效应研究是近年来在纳米科技发展过程中派生出来的一个崭新的、发展很快的且多学科高度交叉的领域，需要把纳米科学、物理学、化学以及生物医学等多学科的研究手段结合起来，进行综合研究．核磁共振波谱与成像，作为一种原位、无损、动态、实时、多信息的检测手段，在此领域的研究中将发挥不可或缺的重要作用．文章分3个方面简要介绍核磁共振波谱与成像技术在纳米尺度物质生物效应研究中的应用：（1）纳米尺度物质在生物组织及个体内的检测与分析；（2）纳米尺度物质与生物大分子相互作用的核磁共振波谱研究；（3）纳米尺度物质生物效应的核磁共振代谢组学研究．     

磁共振波谱及成像技术在纳米尺度物质生物效应研究中的应用

纳米尺度物质的生物效应研究是近年来在纳米科技发展过程中派生出来的一个崭新的、发展很快的且多学科高度交叉的领域,需要把纳米科学、物理学、化学以及生物医学等多学科的研究手段结合起来,进行综合研究.核磁共振波谱与成像,作为一种原位、无损、动态、实时、多信息的检测手段,在此领域的研究中将发挥不可或缺的重要作用.文章分3个方面简要介绍核磁共振波谱与成像技术在纳米尺度物质生物效应研究中的应用：(1)纳米尺度物质在生物组织及个体内的检测与分析;(2)纳米尺度物质与生物大分子相互作用的核磁共振波谱研究;(3)纳米尺度物质生物效应的核磁共振代谢组学研究.     

Many-electron effects in the Auger-photoelectron coincidence spectroscopy spectra of the late 3d-transition metals

The valence hole created by the L2–L3 M45 Coster–Kronig (CK) transition may hop away from the ionized atomic site before the L3-hole decays. Then when the third (Auger) electron emitted by the L3-hole decay is measured in coincidence with the photoelectron emitted by the initial L2-level electron ionization, the coincidence spectrum becomes similar or identical to the singles spectrum of the secondary (Auger) electron emitted by the L3-hole decay as if it decayed as an initial single core hole. Thus the coincidence spectrum is essentially governed by the valence-hole dynamics of both the intermediate states and the final states of the L2–L3 (M45) CK-transition preceded Auger transition. In the present paper the Auger-photoelectron coincidence spectroscopy (APECS) spectra of Fe, Co, and Ni metals reported by C.P. Lund et al. (Phys. Rev. B55 (1997) 5455) are analyzed in light of the delocalization and localization of the valence hole(s) created by the CK transition or the CK-transition preceded Auger transition.     

Application of the genetic algorithms to data modeling in the case of fluorescence spectroscopy

The genetic algorithms (GAs) are applied to extract the values of parameters that describe the behavior of the asymmetric rotorlike fluorescence probes embedded in the uniaxially ordered system. The capabilities of the GA are enhanced by an application of a simple first order derivative search for the values of the multiplicative factors at each stage of the evolutionary run. The convergence is improved by the help of a gradient-expansion search performed after the GA is done. The potentiality of this approach demonstrates an example concerning the synthetic data set. The text was submitted by the authors in English.     

Application of XAFS spectroscopy to studying the microstructure and electronic structure of quantum dots

Variations in the microscopic structural parameters of semiconductor nanoclusters (interatomic distances, coordination numbers, and types of neighboring atoms) under variation of the preparation conditions of Ge/Si, GaN/AlN, and InAs/AlAs heterostructures are determined by the EXAFS-and XANES spectroscopy methods. The effect of preparation conditions on interphase diffusion and structure parameters in semiconductor nanoclusters is revealed. The effect of the temperature of synthesis at different stages, the substrate orientation and pretreatment, the composition of the molecular beam (in particular, the presence of Ge⁺ cations) on the local composition of nanostructures is studied. Relations between the size and shape of nanoparticles and their local spatial characteristics (interatomic distances, stoichiometric composition, and phase boundary characteristics) are examined.     

Application of 57Co emission Mössbauer spectroscopy to studying biocomplexes in frozen solutions

Emission Mössbauer spectroscopy with the ⁵⁷Co isotope was used to study very dilute rapidly frozen aqueous solutions of cobalt(II) complexes with low-molecular-weight biomolecules (aromatic amino acids – anthranilic acid and L-tryptophan) and within a sophisticated biopolymer, bacterial glutamine synthetase, a key enzyme of nitrogen metabolism. The appearance of after-effects of the ⁵⁷Co→⁵⁷Fe nuclear transformation as well as the coordination properties of the cation and the ligands in the complexes are discussed on the basis of their Mössbauer parameters.     

Laser-induced fluorescence spectroscopy of FeS in the visible region

The laser-induced fluorescence excitation spectra of jet-cooled FeS molecules have been recorded in the energy range of 18 900-21 600 cm⁻¹, in which four parallel and one perpendicular transitions were identified for the first time. Spectroscopic constants of the observed excited states of FeS were determined by analyzing their rotationally resolved spectra. In addition, the lifetimes of most observed bands were also measured.