人尿激酶原在CHO细胞中的基因扩增与高效表达

本文通过基因共转染和基因共扩增方法,在SV40病毒晚期启动子控制下成功地在中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷株(CHO-DHFR~-)中高效表达了人尿激酶原,其表达水平在5×10~(-6) mol/L氨甲喋呤存在下可达2—3μg/10~6细胞/24 h。采用PMA诱导可将表达水平提高至3.5—4μg/10~6细胞/24 h。相应的Pro-UKcDNA在细胞基因组上整合的拷贝数为200—300拷贝/细胞。Western blot分析表明,表达出来的重组Pro-UK与天然Pro-UK具有相似的分子量:S_(2444)测活法证明重组Pro-UK具有体外酰胺水解活性。     

烟草、小麦和水稻三个设计的rbcs结构基因的全合成和在大肠肝菌中的表达

用计算机辅助再设计了烟草、小麦和水稻的核糖酮-1,5-双磷酸羧化酶/氧化酶的成熟亚基(rbcS)的三个基因,结合化学方法和酶促配位进行了全合成,并在大肠杆菌中以高得产表达.     

诱导根癌农杆菌vir区基因表达水稻代谢物的分离,鉴定和生物活性研究

从孕穗期至开花期水稻(oryza sative L. cv. lndia IR 72)的茎叶提取液中, 筛选并分离出二种能高效诱导根癌农杆菌(Agrobacterium tumfaciens) vir 区基因表达的信号分子,这两种信号分子的化学结构分别是5,7,4'-三羟基-3'-5'-二甲氧基黄酮和5,4'-二羟基-3',5'-二甲氧基-7-β-D-葡萄糖氧基黄酮.     

苏芸金杆菌蜡螟亚种(Bacillus thuringiensis subsp. galleriae)(H5ab)δ-内毒素基因的克隆和表达

本文通过分子杂交得到阳性克隆FG2,带有8.5kb的Barn HI和Sal I插入片段,经western blot分析表明此重组子表达了130kD和68kD的δ-内毒素蛋白,能与HD-1的δ-内毒素抗血清反应,同时对2—3龄的玉米螟进行了生物活性测定,证明有毒杀活力。本工作首次报道了苏芸金杆菌蜡螟亚种(H5ab)的δ-内毒素基因在大肠杆菌中的克隆和表达,同时为δ-内毒素基因在130Md质粒上的定位提供了直接证据。