胶体金免疫电镜技术用于植物病毒的检测

胶体金免疫电镜技术具有步骤简便。胶体金探针能精确定位、电镜下分辨率高等优点,给细胞化学标记体系带来了一种改革,近年来越来越多地应用于生物学和医学研究中,如:细胞内某些生物活性物质的定位研究、组织细胞形态发生研究、酶的研究等,但在农业科研中的应用还很少。尤其在病毒检测方面,目前国内只见到以胶体金免疫电镜技术检测动物病毒的报道,而用于植物病毒检测的报道尚无。本文报道了以改良的柠檬酸钠—鞣酸还原法制备大小适于植物病毒标记的胶体金颗粒的方法,制备的胶     

胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒

本实验利用胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒（ tomato zonate spot virus, TZSV）,分别以TZSV的N 蛋白多克隆抗体及TZSV的Gn蛋白多克隆抗体为一抗,然后以胶体金标记羊抗兔IgG?gold（10 nm）为二抗对病毒进行胶体金标记,电镜观察用TZSV Gn蛋白抗体标记的胶体金颗粒能很好地结合到病毒粒体上。结果表明该方法可以实现对TZSV更为准确可靠地检测。     

离子捕获电镜技术在犬传染性肝炎病毒和细小病毒感染快速诊断中的应用

本研究应用离子捕获电镜技术和直接负染电镜技术比较检测了临床上疑似为犬传染性肝炎和犬细小病毒性肠炎的犬送检样品。结果表明 ,离子捕获电镜技术具有快速、简便、直观和敏感等优点 ,可做为快速检测临床送检样品中病毒的常规方法推广应用     

动物病毒疫苗研制及其产品的电镜检测

应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞，并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化、培育及筛选的目的毒。结果发现了部分培养细胞有支原体污染，有的还有细菌污染；同时在某些培养的原毒、基础种毒、生产种毒及其产品中也发现了一些病毒的污染和联苗中互相感染现象。如此证明了电镜技术能够及时发现问题，及时解决问题，使之科研少走弯路，提高产品质量。     

离子捕莸电镜技术在犬传染性肝炎病毒和细小病毒感染快速诊断中的应用

本研究应用离子捕获电镜技术和直接负染电镜技术比较检测了临床上疑似为犬传染性肝炎和犬细小病毒性肠炎的犬送检样品。结果表明，离子捕获电镜技术具有快速、简便、直观和敏感等优点，可做为快速检测临床送检样品中病毒的常规方法推广应用。     

用免疫电镜技术检测和研究甜菜坏死黄脉病毒和黑色焦枯病毒

本文利用免疫电镜技术准确地检出带有甜菜坏死黄脉病毒的病株，从而正确评价甜菜丛根病防治效果，对甜菜黑色焦枯病毒进行了免疫电镜形态学观察并证实了抗血清制备试验效果良好。     

电镜技术在病毒性肝炎诊断和研究上的应用

本文综述了电镜技术在甲、乙、丙、丁和戊型病毒性肝炎，包括新发现的数种病毒性肝炎诊断和研究上的应用情况，并简介了有关材料来源和处理及标本制备技术。资料显示，电镜技术在各型病毒性肝炎的发现，证实及病因研究上起重要作用。     

采用免疫胶体金标记结合负染色电镜技术对体外组装的中间纤维定性

将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合，清晰显示体外组装的波形纤维具有１０ｎｍ中间纤维结构特征，抗波形纤维蛋白－金颗粒特异地标记在波形纤维上，用抗波形纤维蛋白－金颗粒对体外组装的微管进行标记则呈阴性反应。实验结果表明将免疫胶体金标记与电镜负染色技术相结合可以同时显示体外组装的细胞骨架纤维的精细结构和蛋白属性。     

应用免疫吸附电镜技术检测草鱼出血病病毒

免疫吸附电镜技术[ISEM]是免疫学与超微形态学相结合的一种新的检测技术。它快速,灵敏、特异性强,是可靠的病毒诊断技术之一。我们应用免疫吸附电镜技术对草鱼出血病病毒进行了检测,并获得了理想的效果。方法: 将兔抗草鱼出血病病毒血清分别稀释为1:200、1:400、1:800、1:1600、1:3200、1:6400倍,然后取不同稀释度的抗血清分别滴在蜡盘上,把铜网漂浮在液面上(室温18-20(3)孵化5分钟后,将铜网移至病毒粗制样品中悬浮,室温反应15分钟,捞起吸干,用蒸馏水漂洗,2％PTA染色3-5分钟。同时设酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫复合物及PTA负染色电镜观察作比较。     

应用免疫电镜技术对烟草试管苗中病毒的鉴定

马铃薯病毒源,即作为抗血清抗原其浓度和纯度,直接关系到利用ELISA等方法鉴定马铃薯茎尖脱毒试管苗实验的可靠性和灵敏度。黑龙江省马铃薯研究所建立的用烟草试管苗保存毒源的方法,虽可使马铃薯病毒源在试管中长期生长和保存,但烟草试管苗经过数次转接后,常使其病毒浓度和纯度发生变化。为提高抗血清质量,当保存的毒源试管苗作为制造抗血清的抗原,最好先用免疫电镜直观测出它们的浓度和纯度。试验方法试验用复合抗血清Anti TMV+Anti PVX+Anti PVY制作免疫电镜样品对PVX_1、PVX_2、     

低丰度蛋白Mlo的免疫金标记技术研究

小麦Mlo蛋白是一种低丰度蛋白。本文利用Mlo蛋白的2种抗血清对不同标记条件下的免疫胶体金标记情况进行了研究。结果表明,一抗结合时间对标记结果有影响,60min的标记时间对Mlo蛋白定位比较合适;小麦Mlo蛋白11．2抗血清对Mlo蛋白的标记效果要比CT抗血清的标记效果好;IgG胶体金探针要比蛋白A胶体金探针更适合于对低丰度蛋白的检测。     

Detection and evaluation of current filaments in MIS sandwich systems by applying mirror electron microscopy (MEM) and scanning electron microscopy (SEM)

Conducting channels form at weak points of an insulating layer by applying a voltage to MIS sandwich systems produced by vacuum evaporation. Local variations of the surface potential caused by the current filaments can be detected by applying MEM and SEM. An evaluation of the filament current is possible by a quantitative contrast interpretation of the corresponding image structures observed in the MEM     

Computer-assisted simulation of high-voltage electron microscopy using serial images recorded by conventional transmission electron microscopy

Here we describe a computer-assisted method which, based on conventional transmission electron microscopy, renders simulated high-voltage electron micrographs. We perform arithmetic minimum filtering on stacks of aligned serial transmission electron microscopic images. In this way, the structural information of the separate images is fused into one compound image that highlights organization patterns otherwise easily overlooked or impossible to comprehend. Our method, like high-voltage electron microscopy, offers the possibility to build stereo-pairs for high-resolution three-dimensional analysis of tissue layers 1-2 microm thick. The use of background elimination and the development of a depth enhancement routine improved the three-dimensional effect and facilitated the analysis of the interior of objects. As an example, we use the method to display the distribution of axonal organelles at nodes of Ranvier and the shape and contents of a highly branched hippocampal dendritic spine.     

Detection of glycoconjugates by lectin gold labelling, silver enhancement, and scanning electron microscopy

A method for detecting glycoconjugates on cell surfaces in scanning electron microscopy is described. Terminal saccharides were specifically recognized by a lectin conjugated to biotin, and, after incubation with an anti-biotin antibody conjugated to colloidal gold, silver enhancement was used to produce deposits large enough to be detected in standard scanning electron microscopes. Secondary electron images revealed the ultrastructure of the tissue investigated, while backscattered electron images showed the distribution of lectin binding sites. Using digital recording and processing, the two channels were combined in colour-encoded images. The new method brings together lectin histochemistry and scanning electron microscopy and thus allows the three-dimensional distribution of glycoconjugates to be analysed at an ultrastructural level.     

植物病毒的电镜诊断

本文介绍了植物病毒新的分类和命名系统，综述了植物病毒电镜诊断的常规技术和以及各个病毒属的形态学特征。在ＩＣＴＶ报告的１１科、４７属共７８９种植物病毒中，花椰菜花叶病毒属、杆状ＤＮＡ病毒属、番茄斑萎病毒属、苜蓿花叶病毒属、双生病毒科、吸肠孤病毒科、弹状病毒科等七个具有典型形态特征的属或科，以及螺旋对称结构的杆状及线状病毒，通过负染色可作出诊断。寄生细胞的病理变化尤其内含体的形态结构也是诊断的重要依据     

水生动物病毒的电镜和荧光显微镜观察

应用透射电镜和荧光显微镜对三种水生动物病毒粒子形态、病毒感染细胞的超微结构变化及亚细胞定位进行比较和研究。负染电镜观察显示:鳜鱼弹状病毒(SCRV)粒子呈典型的子弹状形态,长约76～118 nm,直径约29～52 nm;鲈鱼呼肠孤病毒(LJRV)粒子呈正二十面体结构,具有双层衣壳,直径约70～80 nm;蛙虹彩病毒(RGV)粒子呈正二十面体结构,具有囊膜,直径大小约150 nm。超薄切片观察表明,宿主细胞的基本结构遭到不同程度的破坏,成熟病毒粒子分布在胞质中或以出芽的方式释放到胞外,且RGV增殖后在胞质中聚集形成晶格状结构。免疫荧光观察进一步显示,RGV感染细胞后能产生多个直径大小不一的包涵体。本研究结果有助于了解和认识水生动物病毒的超微形态特征、复制过程及致病机理。     

Scanning electron mirror microscopy and scanning electron microscopy of integrated circuits

The recently developed scanning electron mirror microscope (SEMM) is compared with other types of electron microscopes, such as the electron mirror microscope (EMM) and the scanning electron microscope (SEM), for examining integrated circuits. Potential advantages of the SEMM include high resolution, elimination of electron bombardment damage, and high sensitivity of voltage gradients, magnetic fields, and topography. Preliminary observations of integrated, circuits obtained with the feasibility SEMM at various specimen potentials are discussed.